舟山市3例发热伴血小板减少综合征的病原学与遗传特征

目的 对舟山市3例疑似发热伴血小板减少综合征（SFTS）病例进行病原学鉴定、确诊，并分析其遗传特征。方法选用巢式RT-PCR测定新布尼亚病毒核酸及L、M、S3个特异性基因，并对基因扩增产物进行测序，测序结果与GenBank上公布的序列进行比对确认。用DNAStar软件构建进化树与序列距离表。用间接免疫荧光法测定患者恢复期和急性期血清新布尼亚病毒IgG抗体滴度。结果3例SFTS患者急性期血清中均能检测到新布尼亚病毒的3个特异性基因片段，其中S基因核苷酸序列与舟山市同类基因核苷酸序列的同源性在9414％～100．0％，患者恢复期血清病毒抗体滴度较急性期增高4倍以上。结论经过病原学鉴定，3例临床疑似患者确诊为发热伴血小板减少综合征的新近感染病例。舟山市新布尼亚病毒的遗传特征比较稳定。

舟山市鼠伤寒沙门菌毒力岛标志性毒力基因的检测

沙门菌是世界上食源性腹泻最常见的到致病病原菌之一。全球每年约报告13亿因沙门菌感染导致的急性胃肠炎病例．其中约有300万例患者死亡。我国沙门菌食物中毒多年来也居细菌性食物中毒的首位，根据2005-2009年浙江省食品污染物监测及食源性病原菌监测网数据显示，鼠伤寒沙门菌是食物中毒、腹泻门诊及食品污染物监测中的重要病原菌。

实时荧光定量RT—PCR快速检测H7N9禽流感病毒

目的构建一种灵敏、特异、快速的实时荧光定量RT—PCR反应体系用于临床H7N9禽流感疑似病例早期诊断及外环境H7N9病毒的监测。方法以H7N9禽流感病毒H7基因和N9基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针，并对引物、探针及反应条件进行优化，验证该反应体系检测的特异性、灵敏度、重复性和检测速度，然后与两种商品化试剂盒（试剂盒I和试剂盒Ⅱ）进行各项指标及184份现场样本作平行比对。结果新建立的H7N9禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR反应体系呈典型的扩增曲线、扩增时间约50min，H7基因与N9基因的最低检出限分别为28拷贝／μL与41拷贝／μL。重复性测定显示，H7和N9检测Ct值的变异系数（CV）分别为0．17％～0．89％和0．33％～0．59％，扩增效率分别为0．9491和0．9713；与其他常见禽流感病毒或肠道病毒无明显交叉反应。184份现场可疑样本阳性检出率为5．43％（10／184），与试剂盒Ⅱ结果一致。结论本研究建立的实时荧光定量RT—PCR反应体系具有检测速度快、灵敏度高、特异性强、重复性好、结果可靠等特点，可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交易市场等外环境H7N9禽流感病毒监测。