舟山鮸鱼群体遗传多样性的AFLP研究

利用AFLP分子标记技术对舟山近海海域野生亲代和人工繁育子一代(F1)的2个鮸鱼(Miichthysmiiuy)群体遗传多样性进行分析研究。结果表明:8对选择性引物在2个群体60个个体中,共扩增出505条清晰条带,其中多态片段为369条,总的多态位点比例为73.07%。亲代和F12个群体的多态位点数,多态位点比率,Nei’s遗传多样性指数和Shannon信息多样性指数分别为367、349、72.51%、68.86%、0.422 2、0.4139。两群体内遗传相似系数亲代为0.987 6,子代为0.971 5。鮸鱼亲代群体的Nei’s遗传多样性指数、遗传相似度和Shannon信息多样性指数比子代群体的都要高。群体间的遗传相似系数和遗传距离分别为0.979 6、0.020 6;基因分化系数Gst为0.022 3,群体间无显著遗传分化;经分子方差(AMOVA)分析,结果表明97.78%的遗传变异来源于群体内个体间,群体间无显著遗传变异。

浙江舟山近海仔稚鱼时空动态变化及与环境因子的关系

为探明舟山近海海域仔稚鱼丰度的分布、出现概率及与环境因素的综合关系,进一步研究该海域渔业资源的补充机制,根据2019年3、4、7、11月在舟山近海海域开展的4个航次仔稚鱼生态调查资料,研究了舟山近海仔稚鱼的出现概率、群落结构(种类组成及优势种数量)的动态变化,探讨仔稚鱼群落的季节变化和对环境变化的响应,以及环境变化对仔稚鱼补充量的影响。结果显示:空间上,调查海区水深范围5~50 m,仔稚鱼集中分布于水深10~20m的近岸河口岛礁区;时间上的季节变化比较大,春夏季丰度高,冬季少。GLM模型结果显示:近岸河口型仔稚鱼在近岸出现的概率为0.65~0.95,在近海出现的概率为0.26~0.60;近海型仔稚鱼在近岸出现的概率为0.12~0.34,在近海出现的概率为0.32~0.54。仔稚鱼优势种春夏季各出现1种,秋冬季各出现2种,全年仔稚鱼优势种有4种。数量分布为:仔稚鱼种类数春季(19种)、夏季(16种)、秋季(10种)、冬季(5种),具有明显的季节性变化。按种类适温属性划分,调查海区仅出现暖温性和暖水性两种,其中暖温性15种(占已知适温类型种类的60%),暖水性10种(占40%);按生态类型划分,主要包括河口型(9种,36%)、沿岸型(9种,36%)、近海型(7种,28%)。研究结果揭示了仔稚鱼丰度的时空分布特征和环境因子之间的关系,为舟山近海产卵场保护区、资源量化管理等措施提供科学依据。

温度对厚壳贻贝(Mytilus coruscus)鳃组织纤毛结构及摄食率的影响机制研究

纤毛是着生在贻贝鳃上感知外界物理和化学信号并帮助食物转运的一类重要细胞结构,温度的变化会改变纤毛的形态和生理生化特征,从而影响贻贝的摄食行为。为探究不同温度下厚壳贻贝的摄食率变化,以及温度对纤毛的形态、酶活和相关基因表达的影响,实验设置16、26和32℃三种温度处理厚壳贻贝,处理24h后测定1h内每个处理组的摄食率,同时采用组织学方法对各处理组鳃上的纤毛形态结构进行观察,并测定鳃组织的抗氧化酶活力和纤毛相关基因tekt1、tekt2、tekt3、tekt4、caf58、caf100、dnah、rsph99和ift74的表达变化。实验结果显示,32℃处理组厚壳贻贝的摄食率显著低于其他两组(P<0.05),且32℃处理组贻贝鳃上的前纤毛、侧纤毛以及纤毛细胞受损严重并部分脱落,血腔间隙破损暴露,而其余两组鳃上纤毛形态较为正常;不同温度处理下鳃组织的过氧化氢(H2O2)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力呈现温度特异性;与16℃处理组相比,26℃处理组中除tekt4和ndah外其他7个纤毛相关基因表达均显著上调,32℃处理组除tekt1外其余8个基因表达均显著下调(P<0.05)。上述结果表明,32℃高温处理对贻贝鳃上纤毛造成严重损伤,导致纤毛运动、纤毛再生和纤毛感知功能均受到一定程度的抑制,从而影响食物颗粒的运输,造成摄食率的降低。

舟山渔场银鲳和灰鲳繁殖特性的比较

用常规的生物学调查方法对舟山渔场银鲳和灰鲳进行了周年的取样调查分析，并对其性腺做石蜡切片，观察性腺发育情况，对银鲳和灰鲳的繁殖特性进行比较研究。结果表明：银鲳和灰鲳在繁殖季节性比为1：1；两者的性腺发育和卵母细胞发育没有显著差异（P〉0．05），V时相的卵母细胞卵径都为700～870μm，油球1个，油球径260～400μm，初级卵膜厚度12～19μm；都为一个繁殖期内多次产卵类型的鱼类；繁殖期内银鲳、灰鲳雌性生殖群体的平均叉长分别为22．5cm、29．0cm，银鲳雄性生殖群体又长主要集中在14．0～17．0cm，灰鲳雄性生殖群体叉长为23．0～25．5cm；银鲳的繁殖季节在每年的4月初至6月初，繁殖高峰在4月中旬到5月中旬，银鲳卵巢成熟系数最高可达25％；而灰鲳的繁殖期在每年的6月初至8月中旬，繁殖高峰在6月下旬到7月下旬，灰鲳的卵巢成熟系数最高只有12．6％。银鲳繁殖期的水温为18～24℃，灰鲳为24～28℃；其他环境条件差异不大。另外还对银鲳和灰鲳卵母细胞发育的特征、繁殖期内卵巢成熟系数的变动以及繁殖期内环境因子的变动对产卵群体的数量影响进行了讨论。

重金属铅在刺参组织的蓄积、分配、排放规律研究

采用暴露实验方法,研究了海水中铅在刺参内脏、纵肌、体壁组织内吸收、积累和排放规律。结果表明,铅浓度为0.5mg·L-1时,在不投喂的情况下,各组织中铅蓄积量随暴露时间增加而增大,第12d达到吸收平衡,此时铅蓄积量(mg·kg-1干重)为内脏(162.76)>纵肌(138.61)>体壁(71.14)。蓄积速率为内脏团>纵肌>体壁,这表明内脏是铅蓄积的主要部位。染毒18d后将刺参分为两组均移入清洁海水中,分别在投喂普通饵料和投喂添加海藻多糖的普通饵料的条件下,进行排放实验,结果表明,随排放时间增加各组织铅蓄积量明显下降,第24d时各组织中铅大部分排出。未添加多糖一组排放率为纵肌(59.12%)>内脏团(52.02%)>体壁(47.86%),添加多糖组各组织铅排放率要高于未添加多糖组,为内脏团(80.29%)>纵肌(67.85%)>体壁(51.41%)。表明,受铅污染的刺参在清洁海水暂养一段时间后,各组织器官均能排放出一部分重金属,其中可食用部分体壁可排出大约50%,饵料中添加海藻多糖对重金属铅的排放有明显促进作用。

银鲳人工育苗技术研究

2005—2006年，在舟山海域银鲳繁殖季节（4～5月），随流刺网和张网捕鱼船出海，捕捞性腺成熟的银鲳进行人工授精，把胚胎运回岸上在孵化桶中继续孵化，得到初孵仔鱼并移入水泥池中进行培育。在水温19．0—24．0℃、盐度25．0～28．0的人工育苗条件下培育苗种。饵料为轮虫、卤虫无节幼体和配合饲料，孵化后3d仔鱼开始开口摄食。银鲳初孵仔鱼～12日龄为仔鱼期，13～40日龄为稚鱼期，41日龄起转为幼鱼期。经50d培育，获得20～27mm叉长的银鲳幼鱼。育苗成活率为5％～14％。

养殖黄鲷繁殖特性及诱导产卵的初步研究

初步研究了黄鲷(Dentex tumifrons)在人工养殖条件下的繁殖生物学特性,以及诱导产卵.根据养殖记录并辅以鳞片的年轮鉴定,可催产的初次性成熟最小雌性黄鲷为2龄,体长14 cm,体重110 g.按体长区分,20 cm以下的黄鲷雌雄比为1∶0.15; 20 cm以上的黄鲷雌雄比为1∶0.45.每年有二个产卵期分别在3～5月和11月.黄鲷属卵巢发育不同步、分批产卵类型鱼类.黄鲷每个产卵季节的个体怀卵量为5 400-27 000粒,平均15 000粒左右.经催产后产出的黄鲷受精卵平均卵径886 μm,平均油球径184 μm.受精后围卵周隙约16 μm.在水温20.0～22.0 ℃、盐度34的条件下,历时36 h 40 min完成胚胎发育,孵化出仔鱼.在养殖条件下,对3龄以上的黄鲷亲鱼进行人工繁殖比较适宜,诱导产卵的成功率较高.用15 μg+5 mg/kg的LHRH-A2+DOM能有效地催产Ⅵ期性腺黄鲷产卵.水温等环境因子的改变能使黄鲷春季产卵比自然海区的黄鲷提前1～2个月.

灰鲳卵巢发育的组织学研究

采用常规的生物学调查方法并取其卵巢做石蜡切片,用显微镜观察灰鲳(Pampuscinereus)的卵巢发育,进行组织学研究。对灰鲳卵巢中的卵母细胞的各个时相的形态特征进行了较为详细的描述;对灰鲳卵巢的周年变化进行了分析,结果显示,灰鲳卵巢发育可为6个时期,繁殖期在6～8月,8月下旬起至9月中旬卵巢开始退化,9月中、下旬起卵巢进入重复发育的Ⅱ期,直到翌年3月都停留在重复发育的Ⅱ期,4月初部分灰鲳卵巢开始重新发育。灰鲳的卵巢平均成熟度在0.3%～12.3%之间。研究表明,灰鲳属多次产卵类型的鱼类。

中国对虾养成期细菌性黑鳃、褐斑综合症的病原生物学研究

本文是对中国对虾黑鳃、褐斑综合症进行病原菌分离和人工感染试验的报告。经细菌学鉴定表明,分离菌分别为海弧菌Vibrio pelagius Baumann和溶藻弧菌Vibrio alginolyticus sakazaki。人工感染试验显示,海弧菌是引起对虾黑鳃、褐斑综合症的主要病原菌,溶藻弧菌的合并感染导致对虾败血死亡。此外还应用电子显微镜对分离纯化的病原细菌进行了超微结构观察。

舟山岱衢族大黄鱼放流增殖试验

＂舟山大黄鱼＂又称岱衢族大黄鱼,曾是东海最主要的经济鱼类之一,列＂四大经济鱼类＂之首。上世纪八十年代初以前,大黄鱼产量占浙江省海洋渔业总产量的10%～20%,但由于过度捕捞和海洋环境污染的加剧,大黄鱼资源严重衰退而几乎＂销声匿迹＂。福建省于1986年开始进行官井洋大黄鱼人工繁育和养殖研究,获得生产性突破,并同年开始增殖放流试验。浙江省于1997年引进福建大黄鱼,并于1998年开始在浙江沿岸水域放流大黄鱼苗种,但其品质和性状都远远不如本地岱衢族大黄鱼,

养殖对虾暴发性流行病——中国对虾肝胰腺坏死病研究

1993年我国沿海各省市养殖对虾发生了暴发性流行病,造成了极大的损失。本文报导我们在浙江省舟山市调查和研究的结果,发现肝胰腺坏死杆状病毒和弧菌并发感染是引起对虾死亡的主要原因。

鮸鱼性腺发育人为调控技术研究

根据鮸鱼自然繁殖习性，模拟其自然繁殖生境，采用调控水温、光照，并结合注射生物激素，对舟山近海鮸鱼的性腺发育进行人为调控。试验结果表明：通过调控水温、光照周期和注射外源激素能使鮸鱼由原来在9～10月份产卵提前到6月份产卵；而仅调控水温只能提前至8月份产卵；仅调控光照或仅在春季注射激素，不会使鮸鱼提前产卵。经调控后6月份产出的卵其受精率、孵化率和畸形率与9～10月份相比差异不显著。同时对调控方法和对不同年龄亲鱼的调控结果进行了讨论。

四指马鲅仔稚鱼发育及生长特征的初步研究

在人工育苗条件下,对四指马鲅Eleutheronema tetradactylum（Shaw）早期发育的形态及生长特性进行了观察和初步研究。形态发育观察结果表明：四指马鲅初孵仔鱼全长为（1.957±0.055）mm,在培育水温为26℃、盐度为30的条件下,第2天开口,第3天卵黄囊完全被吸收,可开始摄食;初孵仔鱼～13 d为仔鱼期,14～36 d为稚鱼期,之后转为幼鱼期。生长特性分析结果表明：四指马鲅仔鱼期全长、肛前长和体高的生长速度明显快于稚鱼期,全长、肛前长和体高与日龄均呈多项式函数关系（P〈0.01）;仔鱼培育过程中,个体生长速度存在明显差异,20日龄仔鱼全长和肛前长的差异较大,其最大值和最小值的比分别是2.437倍和2.004倍。因此,在仔鱼培育生产实践中要注意分池,足量投喂适口饵料,以减少个体间的相互残杀。

MS-222对东海带鱼幼鱼的麻醉效果研究

为研究MS-222麻醉剂对东海带鱼Trichiurus haumela幼鱼的麻醉效果,在水温(26. 0±1. 0)℃条件下,对体质量为(43. 21±0. 52) g的东海带鱼进行了不同MS-222浓度的麻醉试验,根据鱼体在最终麻醉状态和复苏过程中的行为特征,把麻醉程度分为6个时期,复苏过程分为4个时期,测定了麻醉和复苏各期试验鱼的呼吸频率,并利用不同质量浓度的麻醉剂,研究了其对东海带鱼幼鱼的麻醉程度和麻醉效果,以及对血清皮质醇和血糖水平的影响。结果表明:当MS-222麻醉剂浓度低于20 mg/L时,试验鱼的最终麻醉程度为0期;当麻醉剂浓度高于80 mg/L时,试验鱼的最终麻醉程度均能达到6期;试验鱼的入麻时间随着MS-222浓度的升高而减少,复苏时间随MS-222浓度的升高而增加;在本试验条件下,测得的MS-222有效质量浓度为120～140 mg/L;在MS-222浓度为20、40 mg/L条件下,血清皮质醇含量随麻醉时间的延长呈先上升后下降的趋势,在MS-222浓度为60 mg/L条件下,血清皮质醇含量呈逐渐下降的趋势,各浓度组试验鱼在6 h时血清皮质醇含量最低,但无显著性差异(P>0. 05);各试验组鱼血糖含量随麻醉时间的延长呈逐渐下降的趋势,均在6 h时降至最低,也无显著性差异(P>0. 05)。研究表明,MS-222麻醉剂对东海带鱼幼鱼的有效质量浓度为120～140 mg/L,具有良好的麻醉效果。

藤壶壳应用于对虾养殖尾水处理的初步研究

为研究藤壶壳作为生物滤料应用于对虾养殖尾水处理的可行性,通过比较陶瓷环组、聚乙烯(PE)组、藤壶壳组和藤壶壳+PE组4个不同滤料组合的生物挂膜效果,初步评价藤壶壳作为生物滤料的应用价值;通过设定藤壶壳的不同填充率(滤料体积∶尾水体积),研究填充率对对虾塘养殖尾水处理效果的影响。结果显示:藤壶壳组挂膜成功时间较早,水处理效果好;藤壶壳不同填充率对水处理中悬浮物、氨氮(NH_4^+-N)、亚硝酸盐氮(NO_2^--N)的处理效果有显著影响,A、B、C、D各组悬浮物在6 h时的去除率分别达(68.7±4.3)%、(74.5±7.0)%、(80.9±4.2)%和(82.1±3.8)%,其中B、C、D组去除率显著高于A组(P<0.05);4组的氨氮最终去除率都在92.1%以上,以0.1 mg/L为基准,A组氨氮降至此质量浓度以下需要时间5 d,B、C组4 d,D组3 d,降解速率为D组>C组>B组>A组;4组的亚硝酸盐氮最终去除率都在98.0%以上,以0.1 mg/L为基准,A组的亚硝酸盐氮降至此质量浓度以下需要时间为6 d,B、C、D组需要5 d,降解速率为D组>C组>B组>A组。研究表明:藤虎壳作为生物滤料应用于对虾养殖尾水处理,效果良好,且随着填充率的增大,处理效率增强;但考虑到经济成本和应用实际,建议藤壶壳填充率为2∶9。

黄口荔枝螺早期发育的初步研究

对黄口荔枝螺Thais luteostoma早期发育进行了研究,详细记录了其早期发育过程中的发育时间与特征,并对各阶段进行显微摄像。结果表明:黄口荔枝螺卵囊高度平均为7.33 mm,卵粒数量平均为165粒;黄口荔枝螺的早期发育属间接发生型,受精卵呈椭圆形,卵裂为盘状卵裂;在卵囊内,胚胎发育包括卵裂期、囊胚期、原肠胚、膜内担轮幼虫、膜内面盘幼虫;幼虫发育包括面盘幼虫、后期面盘幼虫和匍匐幼虫。从受精卵到面盘幼虫均见营养卵的存在。

条纹锯鮨胃排空特征和适宜投喂频率研究

适宜的投喂频率是水产养殖中保障养殖对象正常生长、优化水产养殖经济效益的关键因素。以条纹锯鮨(Centropristis striata)幼鱼为实验对象,研究了胃排空率和不同投喂频率对其生长、存活率、饲料系数、营养成分及酶活性等相关指标的影响。结果显示,在水温22℃条件下,条纹锯鮨胃含物湿重在4 h内下降明显,随后下降趋于平缓,最后降到0;比较线性模型、指数模型和平方根模型3种数学模型拟合条纹锯鮨胃排空率的结果表明,平方根模型的拟合效果最好,方程为Y 0.5=2.050-0.084t。水温22~26℃条件下,设置4个投喂频率处理组:F1(1次·d^(-1))、F2(2次·d^(-1))、F3(3次·d^(-1))和F4(4次·d^(-1)),进行8周养殖实验。结果显示,条纹锯鮨幼鱼的体质量、增重率、特定生长率和肥满度均随着投喂频率增加而增加,且F1组与其他各组差异显著(P<0.05)。随着投喂频率的增加,饲料系数先降后升;其中,F1组饲料系数最高,F2组饲料系数最低。随着投喂频率的增加,各组鱼体内水分、灰分、粗蛋白、蛋白质效率和蛋白质生产值呈降低趋势,粗脂肪呈升高趋势。F1组血清总蛋白与其他各组间差异显著(P<0.05);白蛋白各组间没有显著性差异(P>0.05);F2组球蛋白最高,葡萄糖和甘油三酯值随投喂频率的增加而升高,谷丙转氨酶和谷草转氨酶值随投喂频率增加先升高后降低。综合胃排空率、生长性能、饲料系数、营养成分等指标,在本实验条件下,条纹锯鮨幼鱼的适宜投喂频率为2次·d^(-1)。研究结果可为养殖生产实践中饲料投喂频率管理提供理论指导。

条石鲷卵巢发育的组织学研究

采用常规的生物学调查和石蜡组织切片法,对条石鲷Oplegnathus fasciatus卵巢发育周期和卵巢发育中各个时期卵母细胞的形态特征以及产卵类型等进行了组织学研究。结果表明,条石鲷卵母细胞的发育过程在年周期中可分为6个时相：Ⅰ时相的卵母细胞呈原始分化状态,Ⅱ时相卵母细胞出现明显的卵黄核,Ⅲ时相卵母细胞出现皮质液泡,Ⅳ时相的卵母细胞分化明显,卵黄颗粒部分融合,Ⅴ时相和Ⅵ时相分别为卵子形成和退化吸收时相。卵巢发育可分为6个时期：繁殖期主要在5—7月,其卵巢有Ⅳ期、V期;8月卵巢开始退化,9月进入重新发育的Ⅱ期,直到翌年3月都为越冬Ⅱ期卵巢;3月下旬条石鲷卵巢开始重新发育为Ⅲ期卵巢。条石鲷卵巢的平均成熟系数为0.70%~12.57%。组织学观察结果表明,各时相卵母细胞发育不同步,因此条石鲷属多次产卵。