中国水仙离体诱变研究

以带鳞片叶的鳞茎盘为外植体，接种在添加激素的MS培养基上，通过激素组合筛选合适的培养基获得不定芽，同时对在预分化培养基上接种7d的外植体、接种25d后转接到分化培养基上3d的外植体、诱导产生的试管小鳞茎进行辐照诱变处理，研究了^60Coγ射线对中国水仙丛生芽分化以及小鳞茎生长的影响。结果表明，接种7d的外植体更适合作为水仙离体诱变的材料，其不分化剂量为50—60Gy，半剂量为15～20Gy，在10和15Gy处理中，发现了两种小鳞茎突变类型，一种为叶片数增多的矮化突变体，一种为试管小球茎膨大速度加快，所以适宜辐射诱变的剂量为10～20Gy。试管小鳞茎的辐射致死剂量约为50Gy，半致死剂量为25Gy。

反义PSY基因植物表达载体的构建及其对中国水仙的转化

实验从中国水仙花瓣中分离得到该基因的572bp的片段,将该片段反向连接到pCAMBIA1301双元载体质粒上,得到CaMV35S组成型启动子的表达载体pCAM35S-PSY,用“冻融法”将pCAM35S-PSY质粒转入农杆菌LBA4404和EHA105两个菌株中。PCR扩增和酶切鉴定结果表明,所构建的反义表达载体pCAM35S-PSY是正确的并已经成功导入农杆菌中。随后,按照业已建立的遗传转化体系对中国水仙进行了遗传转化,得到了转基因抗性芽。