基于国家药品抽检的宁心宝胶囊质量评价与研究

目的 基于国家药品抽检工作,系统性评价宁心宝胶囊的质量以及分析存在的问题,为该品种的质量控制提供参考和建议。方法 对抽样的308批次样品进行标准检验,探索性研究基于核糖体DNA第二内转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2)基因测序对宁心宝胶囊样品虫草头孢菌进行菌种鉴定;采用HPLC建立宁心宝胶囊指纹图谱以及同时测定尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷6个成分含量;采用UPLC测定麦角甾醇含量;采用LC/MS/MS对8种真菌毒素(黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、赭曲霉毒素A、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素)进行筛查。结果 308批次样品依标检验合格率为100%。探索性研究表明,27家企业的48批次样品均能鉴定到目标菌种,但目标菌种的丰度差异较大,范围为0.15%~99.85%。经企业调研发现,目标菌种丰度与原料药来源相关。对308批次样品的HPLC指纹图谱、核苷类成分多指标含量以及麦角甾醇含量测定结果进行综合分析,结果显示所有样品主要分成两类,原料来源于原研企业优于仿制企业。各项目相关性分析表明菌种纯度与指纹图谱相似度、核苷类成分含量和麦角甾醇含量之间呈正相关。真菌毒素污染风险较低。结论 建议质量标准中增加指纹图谱整体控制和核苷类多指标含量和麦角甾醇含量测定项;菌种纯度是影响宁心宝胶囊质量的关键因素,监管部门和原料药生产企业应重点关注菌种传代以及发酵过程中的菌种纯度。

灵芝酸A药理作用及其机制研究新进展

灵芝被广泛应用于食品(保健)、药品和化妆品等领域。灵芝酸A是一种具有重要药理活性的灵芝三萜类化合物。现代药理研究表明,灵芝酸A具有抗肿瘤、抗神经精神系统疾病、肝保护作用、降血脂作用、抗炎和肾保护作用等多种药理作用。本文对灵芝酸A的药理学作用及其机制研究新进展进行梳理与总结,为其进一步开发和应用提供参考。

苍术麸炒前后吡咯里西啶生物碱含量变化研究

目的:建立苍术中吡咯里西啶生物碱(PAs)的含量测定方法,考察麸炒前后5个PAs的变化规律。方法:采用UPLC-MS/MS法进行含量测定,采用ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(体积比为11∶89),恒流洗脱,流速0.30 mL·min^(-1),进样体积1μL;电喷雾离子源,正离子多反应监测模式,以标准曲线法计算含量。结果:3批苍术经过麸炒后,PAs总量从188.74~254.64μg·kg^(-1)下降到101.74~135.36μg·kg^(-1);野百合碱从25.35~52.18μg·kg^(-1)下降到23.25~37.41μg·kg^(-1);氮氧化野百合碱从25.12~40.22μg·kg^(-1)下降到6.98~18.23μg·kg^(-1);克氏千里光碱从11.64~36.25μg·kg^(-1)下降到3.64~12.85μg·kg^(-1);蓝蓟定从37.52~85.32μg·kg^(-1)下降到32.41~38.25μg·kg^(-1);氮氧化蓝蓟定从26.96~74.21μg·kg^(-1)下降到11.82~26.37μg·kg^(-1)。结论:该方法可用于苍术中PAs的测定。麸炒后PAs总量和单个含量均有降低,阐明了苍术麸炒解毒的科学内涵。

UHPLC-MS/MS同时测定活血化瘀类中成药中非法添加的30个化学药物

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定活血化瘀类中成药中非法添加抗心绞痛、抗凝、抗血小板聚集以及抗炎镇痛等30个化学药物的方法。方法样品采用60%甲醇超声提取,以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,经色谱柱Phenomenex Kinetex C_(18)(2.1 mm×100 mm,2.6μm)分离,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为40℃。质谱采用电喷雾电离,正负离子同时扫描,多反应监测的模式采集数据。结果30个化合物在考察的浓度范围内线性关系良好,相关系数均>0.999,各化合物的检出限为1.3~238.4 ng·g^(-1),平均回收率为63.7%~108.2%,RSD为1.0%~6.7%。采用该方法对90批舒筋活血片进行检测,共有3批检出对乙酰氨基酚,其余化合物均未检出。对乙酰氨基酚检出量为每片0.16~0.93μg,远低于对应药品日服用的最小剂量,排除人为故意添加。可能的原因是企业共线生产清洁验证不彻底引起的残留。结论该方法快速准确,灵敏度高,高选择性,可用于活血化瘀类中成药非法添加30个化合物的定性筛查和定量检测。

香丹注射液与3种输液配伍后丹参素钠等6种有效成分的稳定性研究

目的研究香丹注射液与葡萄糖注射液、氯化钠注射液、葡萄糖-氯化钠注射液配伍后6种有效成分的稳定性。方法采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定香丹注射液与葡萄糖注射液、氯化钠注射液、葡萄糖-氯化钠注射液配伍后放置不同时间丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、紫草酸、丹酚酸B和丹酚酸A的含量变化。结果香丹注射液与氯化钠注射液配伍后,紫草酸、丹酚酸A含量逐渐下降;而咖啡酸逐渐上升;与葡萄糖-氯化钠注射液配伍后,丹酚酸A含量逐渐下降,咖啡酸含量逐渐上升;与葡萄糖注射液配伍后,只有丹酚酸A含量逐渐略微下降。结论香丹注射液最好与葡萄糖注射液配伍,并且尽快使用。

基于气相色谱-离子迁移谱的覆盆子与山莓的鉴别研究

目的:比较覆盆子及其混淆品山莓的挥发性特异气味成分差异,为覆盆子和山莓的鉴别提供新手段。方法:采用气相色谱-离子迁移谱(GC-IMS)对覆盆子和山莓的挥发性成分进行检测并比较成分变化;结合SIMCA-P软件进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)寻找其特征差异成分。结果:明确鉴定覆盆子挥发性成分42种,主要包括醛类、酯类、萜烯类等;GC-IMS指纹图谱显示覆盆子与山莓的挥发性成分存在差异,PLS-DA筛选出21种区分覆盆子和山莓的显著差异成分,包括丁酸丙酯、3-羟基-2-丁酮、2-丁酮等。结论:覆盆子与山莓的挥发性气味成分存在差异,表明GC-IMS可实现两者的鉴别,为进一步研究覆盆子及其复方制剂的质量控制提供方法学参考。

基于全国中药资源普查的益母草药材质量分析

目的:通过全国中药资源普查开展益母草的质量评价研究,掌握全国范围的益母草质量问题并寻求对策,保障公众用药安全。方法:采用法定标准检验对益母草质量进行评价和分析。结果:共抽取82批次益母草,按法定标准检验,不合格率高达50.00%(41/82);不合格项目为性状、鉴别、浸出物及含量测定,不合格主要原因为混淆品的存在及采收季节不符合要求。经基原鉴定,混淆品主要为夏至草;针对益母草错过采收期问题,对检验结果进行相关性分析,建立合理采收方案。结论:益母草总体质量状况评价为品质欠佳,建议对益母草进行规范化采收,并加强监管。

超高效液相色谱法分析淡豆豉配方颗粒中3种异黄酮

建立超高效液相色谱法同时测定淡豆豉配方颗粒中3种异黄酮(大豆苷元、黄豆黄素、染料木素)的含量。选择Eclipse Plus C18RRHD色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%乙酸溶液,梯度洗脱,流量为0.3mL/min,柱温为30℃,检测波长为260 nm。大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的质量浓度分别在18.41~184.14、0.48~4.82、30.65~306.46μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 9)。样品测定结果的相对标准偏差分别为1.80%、2.20%、1.71%(n=6),平均加标回收率分别为96.49%、100.93%、98.53%。该方法快速,准确、可靠,可为淡豆豉配方颗粒的质量控制提供参考。

菊花中农药残留检测方法研究及风险评估

目的 建立基于《GB 2763食品安全标准食品中农药最大残留限量》的菊花中部分常用农药限量标准转化方法。方法 对GB 2763中菊花(干)的指标进行梳理,并根据转化原则,确定拟转化指标为吡蚜酮、吡虫啉、啶酰菌胺和氟啶胺,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,建立菊花限量标准转化方法,并进行方法学验证。结果 4种农药在1~50 ng·mL^(-1)内线性关系良好,相关系数均为0.999 9,平均回收率为77.9%~95.5%,相对标准偏差(RSD)为1.7%~6.8%;结果样品总体检出率为60%,检出率最高的农药为吡虫啉;检出量最大的为吡虫啉(1 mg·kg^(-1)),结果均未超过GB 2763规定的最大残留限量。采用中药中农药残留风险评估系统对拟转化的4个农药限量值的慢性风险进行评价,结果氟啶胺的慢性风险商大于1,其余3个农药的慢性风险商均小于1,故氟啶胺暂不转化,仅对吡蚜酮、吡虫啉和啶酰菌胺进行转化。结论 对菊花中吡蚜酮、吡虫啉和啶酰菌胺3个指标限量标准进行转化,建立的限量标准转化方法操作简单,结果准确,对于规范菊花种植过程中农药的使用和药用安全有重大意义。

三叶青块根不同提取物抗胸腺萎缩药效研究

目的基于腹腔注射聚肌苷酸-聚胞苷酸(PolyI:C)建立小鼠胸腺萎缩模型,比较三叶青石油醚提取物(petroleum ether extract,PEE)、乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract,EAE)、正丁醇提取物(n-butanol extract,BE)和水提取物(water extract,WE)抗胸腺萎缩的药效作用,初步探讨其作用机制。方法100只ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组和4种提取物的低、高剂量组,共10组,每组10只。空白对照组、模型组同时给予同体积的纯化水,连续灌胃10 d。给药第9天开始,除空白对照组腹腔注射生理盐水外,其余组别均腹腔注射16 mg·kg^(-1)的PolyI:C溶液,连续2 d。取胸腺称重并计算脏器指数,取血进行白细胞分析及IL-2、TNF-α的检测,分析胸腺组织的苏木精-伊红染色结果,通过Western blotting检测TNF-α、p-NF-κB、NF-κB的表达。结果相较于模型组,提取物各组均可不同程度提升胸腺质量和胸腺指数,及皮质和髓质面积比值和髓质1 mm~2的胸腺小体数量,显著降低血浆中TNF-α水平,明显抑制NF-κB的磷酸化,降低TNF-α的蛋白表达,且在不同指标上的作用强度各有优劣。WE低剂量组、EAE低剂量组和PEE高剂量组外周血白细胞数、淋巴细胞绝对值和淋巴细胞百分率升高;WE低剂量组和BE高剂量组IL-2水平显著升高,这些作用表现尤为突出。结论三叶青块根4种提取物可不同程度改善胸腺萎缩和胸腺组织形态改变,调节造模后动物外周血白细胞失衡,可能与抑制PolyI:C诱导转录因子NF-κB的磷酸化、降低促炎因子的蛋白表达有关。

罗布麻叶中肝毒性成分吡咯里西啶生物碱的含量分析及其初步风险评估

目的:对罗布麻叶中吡咯里西啶生物碱的含量进行测定,并根据测定结果进行肝毒性初步风险评估。方法:样品经过Qu ECh ERS法提取后,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定印美定、石松胺、印美定氮氧化物和石松胺氮氧化物的含量。结果:6批罗布麻叶样品中印美定、石松胺、印美定氮氧化物和石松胺氮氧化物的含量范围分别为10.5127.56、20.6642.54、40.5476.89和61.45164.23μg·kg^(-1)。含量超过一些国家或组织的规定,长期使用存在一定的安全风险。结论:本研究所建立的方法为罗布麻叶中肝毒性成分吡咯里西啶生物碱的质量控制和安全性评价提供了科学依据。

超高效液相色谱串联质谱法测定木贼中4种吡咯里西啶生物碱

建立超高效液相色谱–串联质谱法测定木贼中4种肝毒性吡咯里西啶生物碱(石松胺、石松胺氮氧化物、蓝蓟定氮氧化物和蓝蓟定)的含量。采用ACQUITY UPLC HSS T3型色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以甲酸–甲酸铵缓冲液(10 mmol/L甲酸溶液–2.5 mmol/L甲酸铵溶液)–酸化乙腈(95%乙腈水溶液,含10 mmol/L甲酸溶液–2.5 mmol/L甲酸铵溶液)(体积比为85∶15)为流动相,流量为0.30 mL/min,进样体积为1μL,电喷雾离子源,正离子多反应监测模式,以外标法计算含量。石松胺、石松胺氮氧化物、蓝蓟定氮氧化物和蓝蓟定在各自的质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,线性系数均不小于0.999,检测限分别为0.20、0.21、0.20、0.20 ng/mL。测定结果的相对标准偏差分别为2.5%、3.2%、3.4%、2.9%(n=6),平均加标回收率为91.9%-97.1%。该方法可为木贼中吡咯里西啶生物碱的质量控制和安全性评价提供科学依据。

赤小豆中吡咯里西啶生物碱氮氧化物含量测定及安全风险评估

目的 对赤小豆中吡咯里西啶生物碱氮氧化物的含量进行测定和风险评估。方法 采用超高效液相色谱-串联质谱法测定赤小豆中野百合碱氮氧化物、刺凌德草碱氮氧化物、印美定氮氧化物和石松胺氮氧化物的含量。色谱柱采用Acquity UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm, 1.7μm),流动相采用乙腈-0.1%甲酸溶液(体积比为10:90)恒流洗脱,流速为0.35 mL·min^(-1),进样量为2μL,ESI离子源,正离子MRM模式,以标准曲线法计算含量。根据含量测定结果,采用暴露限值法进行风险评估。结果 8批赤小豆中野百合碱氮氧化物、刺凌德草碱氮氧化物、印美定氮氧化物和石松胺氮氧化物的含量分别为17.54~31.67μg·kg^(-1)。风险评估显示,使用赤小豆产生的安全风险较低。结论 本研究可为赤小豆中吡咯里西啶生物碱的质量控制和安全性评价提供科学依据。

返魂草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的含量分析及风险评估

目的对返魂草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的含量进行测定,并根据测定结果进行初步的风险评估。方法建立超高效液相色谱-串联质谱测定夹可灵、夹可灵氮氧化物、夹可碱、夹克宁和夹可碱氮氧化物的含量。根据含量测定结果,采用暴露限值(margin of exposure,MOE)法进行风险评估。结果6批返魂草样品中夹可灵、夹可灵氮氧化物、夹可碱、夹克宁和夹可碱氮氧化物的含量范围分别为0.23~0.85、0.25~0.98、0.85~2.65、0.37~1.85和2.32~7.58μg/g。MOE值为2131~4845。结论本研究所建立的方法为返魂草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的质量控制和安全性评价提供了科学依据。

高效液相色谱法同时测定鱼腥草芩蓝合剂中7种成分

建立同时测定鱼腥草芩蓝合剂中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素含量的高效液相色谱法。选择Symmetry Shield RP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为210 nm,柱温为30℃,进样体积为5μL。绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素在各自的质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.20~0.30μg/mL,定量限为0.60~1.00μg/mL。样品加标平均回收率为98.17%~101.48%,测定结果的相对标准偏差为1.23%~1.76%(n=6)。该方法可为鱼腥草芩蓝合剂的质量控制提供参考。

高效液相色谱–波长切换法同时测定独一味软胶囊中6种成分

建立高效液相色谱–波长切换法同时测定独一味软胶囊中山栀苷甲酯、绿原酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷和木犀草苷的方法。以Symmetry Shield RP18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈–0.3%磷酸水为流动相,检测波长分别为235 nm(山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯)、330 nm(绿原酸、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷)、360 nm(木犀草苷),流量为1 mL/min。山栀苷甲酯、绿原酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷和木犀草苷的进样量在各自的范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数不小于0.9990,测定结果的相对标准偏差为0.21%~0.69%(n=6),平均加标回收率为94.0%~101.1%。该方法简单、准确、重现性好,适用于独一味软胶囊的质量评价。

免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱法检测蜚蠊中的黄曲霉毒素

目的:建立检测蜚蠊中黄曲霉毒素B 1、B 2、G 1和G 2的免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱法。方法:样品经过70%甲醇溶液匀浆提取,用水稀释后经免疫亲和柱富集净化,经C 18色谱柱分离,以甲醇、乙腈和水为流动相,柱后光化学衍生,荧光检测器进行检测。结果:在优化的条件下,黄曲霉毒素B 1、B 2、G 1和G 2线性关系良好,检出限分别为0.04,0.08,0.03和0.08μg·kg^-1,平均加标回收率为82.0%~90.1%。结论:该方法快速、准确、灵敏度高,可用于蜚蠊黄曲霉毒素的检测。

HPLC波长切换法同时测定复方当归注射液中4种有效成分的含量

目的:建立HPLC波长切换技术同时测定复方当归注射液中羟基红花黄色素A、绿原酸、阿魏酸和咖啡酸含量的方法。方法:以Symmetry Shield RP18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,流速为0.8 mL/min,检测波长分别为327 nm(016.0 min,绿原酸),323 nm(16.022.5 min,咖啡酸),403 nm(22.530.0 min,羟基红花黄色素A),316 nm(30.050.0 min,阿魏酸);柱温为30℃,进样量为10μL。结果:羟基红花黄色素A、绿原酸、阿魏酸和咖啡酸线性关系良好,平均加样回收率分别为104.12%、99.44%、98.34%、102.70%,RSD分别为0.21%、0.39%、0.11%、0.49%。结论:该方法简单、准确、重现性好,适用于复方当归注射液的质量评价。

基于HPLC指纹图谱和多指标成分含量测定及化学模式分析的玉屏风丸的质量评价

目的:建立HPLC指纹图谱和多指标成分定量联合化学模式分析方法,并评价玉屏风丸质量。方法:采用Agilent Zorbax C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,检测波长为220、275、300 nm,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为1.2 mL·min(-1)。利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)建立玉屏风丸的HPLC指纹图谱,确定共有峰并进行相似度评价。对升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、毛蕊异黄酮、亥茅酚苷、槲皮素、芒柄花素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、苍术酮共计12个共有峰进行方法学验证和含量测定。基于共有峰面积的测定结果,采用化学模式分析(聚类分析和主成分分析)对10批次玉屏风丸的质量进行评价。结果:在玉屏风丸的HPLC指纹图谱中获得共有峰23个,指认出12个共有峰,10批玉屏风丸的相似度>0.95。12个已知成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9997),平均加标回收率范围95.7%~103.2%,RSD(n=9)<3.6%。10批次样品中12个共有峰的含量测定结果差异小。10批玉屏风丸在间距离为15时聚为2类,提取影响玉屏风丸质量评价的主成分3个,获得6个与原始变量关系最为密切的目标物。结论:本研究所建立的方法操作便捷、结果准确、重复性好。可用于玉屏风丸的质量控制,并为玉屏风丸的质量标准提高提供依据和参考。

HPLC-ELSD法测定天花粉配方颗粒中L-瓜氨酸的含量

目的:建立天花粉配方颗粒高效液相色谱-蒸发光散射法测定L-瓜氨酸的含量。方法:采用高效液相色谱法,以Inertsil ODS-SP柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,水为流动相,采用蒸发光散射检测器检测。检测波长为270 nm;流速为0.5 mL•min^-1,载气流速为3.0 L•min^-1,飘移管温度为115℃。结果:L-瓜氨酸的峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好,线性范围为0.05-1.00 mg•mL^-1,加标回收率为97.9%,相对标准偏差为1.0%。结论:该方法快速、简单、准确、重现性好,适用于天花粉配方颗粒中L-瓜氨酸的定量分析。