液相色谱-质谱法测定孕妇尿液中3种残留的氯霉素类抗生素

目的建立液相色谱-质谱法测定孕妇尿液中3种残留的氯霉素类抗生素,并进行方法学验证。方法尿液利用Oasis HLB固相萃取小柱进行净化和富集,液相分离采用SHISEIDO MG-C_(18)(100 mm×3.0 mm,3.0μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,选择离子监测模式检测[M-H]-:氯霉素m/z 320.8、氟苯尼考m/z 355.8、甲砜霉素m/z 353.8、甲苯磺丁脲(内标)m/z 268.9。结果尿液中3种残留的氯霉素类抗生素在5~500 ng/mL范围内呈良好的线性关系(均r>0.999);批内和批间的精密度及准确度良好(RSD<8.9%,∣相对误差(RE)∣<9.3%);提取回收率为71.4%~108.5%,稳定性良好(∣RE∣<11.8%);几乎没有残留;稀释不影响测定的精密度和准确度。共检测了18份不同孕期(孕早期、孕中期和孕晚期)孕妇的尿样,大部分样品能检测到氯霉素(但浓度低于最低定量限5 ng/mL),其中少量样品能测出氟苯尼考,完全没有检测到甲砜霉素残留。结论该方法操作简便、重现性好,适用于尿液中3种氯霉素类抗生素的测定,可为氯霉素类抗生素的残留与孕妇不良妊娠结局的相关性研究提供方法学基础。

基于网络药理学的慈丹胶囊抗肝癌作用机制探讨

目的构建慈丹胶囊活性成分-作用靶点网络和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,对靶点涉及的功能和通路进行分析,探讨慈丹胶囊抗肝癌的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)挖掘慈丹胶囊中的主要活性成分。利用药物靶点分析平台(STITCH)、GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据系统(OMIM)预测和筛选慈丹胶囊活性成分对应靶点中与肝细胞癌相关的靶点。采用Cytoscape 3.8.2软件构建活性成分-作用靶点网络,采用String数据库和Cytoscape 3.8.2软件获得PPI网络。采用注视、可视化和集成发现数据库(DAVID)对靶点进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果筛选得到慈丹胶囊活性成分18个,共得到97个可能与肝细胞癌相关的作用靶点,活性成分-作用靶点网络分析显示慈丹胶囊具有多成分、多靶点的作用特点。构建的PPI网络涉及88个节点和467条边。GO富集分析结果表明,慈丹胶囊抗肝癌作用的靶点主要涉及细胞过程、生物调控、代谢过程、对化学刺激的反应等生物学过程。KEGG富集分析结果显示,慈丹胶囊抗肝癌作用的靶点主要涉及TNF、PI3K-AKT、MAPK等信号通路。结论慈丹胶囊抗肝癌作用具有多成分、多靶点、多通路的特点,其可能通过调节TNF、PI3K-AKT、MAPK等信号通路发挥作用。

CALB2介导的肿瘤微环境免疫细胞浸润在肝癌复发中的作用机制分析

目的 利用生物信息学技术筛选与肝癌复发相关的核心基因及信号通路,为探索肝癌复发的分子机制提供理论依据。方法 从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达汇编(GEO)数据库下载肝癌相关数据集,利用edgeR算法筛选差异表达基因。对差异表达基因进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建确定肝癌复发相关核心基因。选择核心基因后,应用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)-logistic回归分析构建肝癌复发预测模型。应用单样本基因集富集分析(ssGSEA)、使用表达数据估计恶性肿瘤组织中的基质细胞和免疫细胞(ESTIMATE)及微环境细胞种群计数器(MCP)方法评估免疫浸润细胞。结果 共筛选出343个肝癌复发相关差异表达基因。GO及KEGG富集分析结果表明,差异表达基因主要富集于前脑发育、化学突触传递的调节等生物过程及神经激活配体-受体相互作用等信号通路。PPI分析筛选出12个核心基因。通过对12个核心基因进行LASSO-logistic 回归分析,确定的独立风险评分模型为风险评分=22.1-生长抑素(SST)表达值×0.21-多巴胺 D2 受体(DRD2)表达值×1.94-钙结合蛋白 2(CALB2)表达值×1.153。该风险评分模型显示出较好的预测能力,AUC值为0.683。CALB2在肿瘤组织中低表达,与复发性肝癌患者肿瘤微环境中的免疫细胞浸润呈正相关。结论 肝癌复发风险评分模型可以提供较好的复发预测能力,其中的核心基因CALB2可以在肝癌复发中发挥关键作用。

替诺福韦导致肾损伤高危因素的分析

目的分析替诺福韦在慢性乙型肝炎(CHB)人群中导致肾损伤的高危因素,以期指导临床合理使用该药物。方法利用Rbase医院合理用药内网系统,检索出2017年5月23日至2020年9月30日在海军军医大学(第二军医大学)第三附属医院安亭院区服用富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)片的CHB患者共1278例。按照纳入和排除标准获得197例CHB患者的临床资料,包括对照组(143例)和肾损伤组(54例)。比较两组患者的年龄、性别、合并症(高血压、糖尿病)、基线估算肾小球滤过率(eGFR)、BMI,采用单因素和多因素logistic回归模型分析探讨TDF导致CHB患者肾损伤的高危因素。结果肾损伤组年龄、合并高血压比例均高于对照组,基线eGFR低于对照组(P均<0.01)。单因素logistic分析显示,年龄、高血压、基线eGFR与TDF导致肾损伤有关(P均<0.01);多因素logistic分析显示,年龄大(OR=1.98,P=0.002)、高血压(OR=3.94,P=0.001)、基线eGFR低(OR=0.93,P<0.001)是TDF导致肾损伤的独立危险因素,其中年龄≥60岁的CHB患者服用TDF后发生肾损伤的风险是年龄<40岁CHB患者的5.62倍(OR=5.62,P=0.001)。结论肾功能损害是TDF常见不良反应之一,年龄≥60岁、合并高血压、基线eGFR偏低的CHB患者服用TDF后更容易发生肾损伤。