PD-1抗体调节糖尿病大鼠CD8^(+)T细胞和Treg平衡促进糖尿病足溃疡愈合的疗效研究

目的:探讨PD-1抗体治疗糖尿病大鼠足溃疡的疗效及其作用机制。方法:将30只6~8周龄健康Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只,三组大鼠足部人为造成溃疡创口。采用流式细胞术计数三组大鼠脾脏中CD8^(+)T细胞和调节性T细胞;Image J对创口照片进行分析计算伤口愈合率;HE染色和组织病理学分析溃疡创口处皮肤愈合情况;ELISA测定大鼠足部溃疡创口组织中TNF-α和IL-1β的水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠CD8^(+)T细胞计数明显下调,Treg细胞计数明显升高(P<0.05);模型组大鼠足部溃疡创口愈合不佳,没有形成完整的新生表皮组织和肉芽组织,未见胶原沉积;模型组大鼠创口处组织中TNF-α和IL-1β的水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,治疗组大鼠CD8^(+)T细胞计数明显回升,Treg细胞计数明显回落(P<0.05);治疗组大鼠足部溃疡创口愈合良好,有较为完整的新生表皮组织、肉芽组织和一定的胶原沉积;治疗组大鼠创口处组织中TNF-α和IL-1β的水平明显降低(P<0.05)。结论:应用人源化PD-1抗体治疗糖尿病大鼠足溃疡具有明显的疗效。

cTnI、AST及CK在鉴别诊断大鼠骨骼肌与心肌损伤应用价值的比较

目的:探讨心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)在鉴别诊断大鼠骨骼肌与心肌损伤应用价值。方法:选取32只SD大鼠随机分为四组,心肌损伤组,单次背部皮下注射异丙肾上腺素;骨骼肌损伤组,单次单侧胫骨肌注射布比卡因;联合损伤组,单次单侧胫骨肌注射布比卡因及背部皮下异丙肾上腺素。正常对照组,不给予任何药物。予给药后24h,检测血清AST,CK及cTnI,常规HE染色观察骨骼肌和心肌受损情况。结果:心肌损伤组和联合损伤组血清cTnI均显著高于正常对照组和骨骼肌损伤组,差异具有统计学意义(P<0.01),而联合损伤组和心肌损伤组AST与骨骼肌损伤组比较,差异无统计学意义(P>0.05),心肌损伤组CK与骨骼肌损伤组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:cTnI在鉴别大鼠心肌及骨骼肌损伤上较AST、CK有较高的敏感性,并且在一定程度上能够降低误诊及漏诊率。

科罗索酸的抗肿瘤作用及其对CAM和YSM血管生成的影响

目的探究科罗索酸(corosolic acid,CRA)的抗肿瘤作用及其对鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)和卵黄囊膜(yolk sac membrane,YSM)血管生成的影响。方法 MTT法检测CRA对肺癌细胞A549增殖的影响。将生物发光标记的人肺癌细胞A549接种到裸小鼠体内,建立生物发光标记的裸小鼠荷瘤模型,采用IVIS小动物活体成像系统检测小鼠体内肿瘤生长情况。采用鸡胚孵化实验,观察CRA对CAM和YSM血管生成的影响。结果 CRA对A549增殖抑制的IC_(50)值为26.8μg/mL。荷瘤动物试验结果表明:CRA对A549实体瘤有显著的抑制生长作用(P<0.01)。在鸡胚孵化实验中,CRA可明显降低CAM和YSM血管生成。结论 CRA对A549具有一定的治疗作用,其作用机制可能与抑制肿瘤组织中血管生成有关。

cTnI、AST及CK在鉴别诊断大鼠骨骼肌与心肌损伤应用价值的比较

目的探讨心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnI)在鉴别诊断大鼠骨骼肌与心肌损伤应用价值。方法 32只SD大鼠随机分为4组:心肌损伤组,单次背部皮下注射异丙肾上腺素;骨骼肌损伤组,单次单侧胫骨肌注射布比卡因;联合损伤组,单次单侧胫骨肌注射布比卡因及背部皮下异丙肾上腺素;正常对照组,不给予任何药物。予给药后24h,检测血清AST,CK及cTnI,常规HE染色观察骨骼肌和心肌受损情况。结果心肌损伤组和联合损伤组血清cTnI均显著高于正常对照组和骨骼肌损伤组(P<0.01),而联合损伤组和心肌损伤组AST与骨骼肌损伤组无明显差异(P>0.05),心肌损伤组CK与骨骼肌损伤组无明显差异(P>0.05)。结论cTnI在鉴别大鼠心肌及骨骼肌损伤上较AST、CK有较高的敏感性,并且在一定程度上能够降低误诊及漏诊率。

大鼠门静脉高压形成过程中血浆内毒素水平与肠道iNOS的表达

在肝硬化形成过程中常伴随着门静脉高压（portalhy—pertension，PHT）的形成，其血流动力变化过程中肠道高动力循环的形成是PHT维持和发展的重要条件。各种因素如内毒素，内皮素-1（endothelin-1，ET-1）等通过刺激血管舒张剂如NO等可引起肠道血管扩张而使门脉血流增加。

大鼠肝窦内皮细胞扫描电镜制样方法的改良

目的:改良大鼠肝窦内皮细胞扫描电镜制样方法,以期得到优质图像。方法:采用红细胞裂解液去除红细胞,然后样本划痕制作断裂面的方法制备电镜样本。结果:改良法可清晰观察肝窦内皮细胞的窗孔。结论:通过裂解红细胞和样本划痕的方法制备样本,可以获得优质肝窦内皮细胞扫描电镜图像。

ELISA法检测食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价

目的:酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价。方法:利用双抗体夹心ELISA法,对rhCNB多肽的方法学灵敏度、线性范围、精密度与准确度和回收率进行方法学验证。结果:该方法特异性高,在0.195~12.5 ng/ml的线性范围内,线性关系良好,标准曲线方程为Y=15.1X-0.26,R^2=0.996 8,定量下限(LLOQ)为0.195 ng/ml;该方法的批内精密度CV分别为3.55%、1.39%和4.71%;批间精密度CV分别为1.59%、3.2%和3.8%,均<5%,准确度在91.9%~108.8%之间,方法回收率在88.5%~108.3%之间,<110%,说明该ELISA方法的准确度较高。符合验证要求。结论:双抗体夹心ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好,可用于生物样品中rhCNB多肽的定量检测。