医学微生物学双语教学的尝试与思考

为了探索适合于医学院校医学的双语教学模式,笔者结合医学微生物学的课程特点,总结了近年来医学微生物学双语教学实践活动,分析了进行双语教学的可行性,同时,针对目前双语教学中存在的问题,如师资、教材、教学模式和手段等方面,提出了具体的对策.

讨论式教学法在《医学微生物学》教学中的应用

目的探讨采用讨论式教学法进行《医学微生物学》各论教学的效果。方法采用讨论式教学法对2002级、2003级本科各专业学生进行教学，2001级本科各专业学生采用传统讲授法作为对照。通过理论考核和调查问卷相结合的形式，评价讨论式教学组和传统式教学组学生的教学效果及其差异。结果讨论式教学组学生在考试成绩、学习态度、自我评价等方面均优于传统教学组。结论讨论式教学法优于传统教学法。讨论式教学法有助于解决医学理论与临床实际分离的问题，有助于培养学生的自主学习能力、分析解决临床问题的能力以及创新能力。

海南岛斑点热立克次体病的血清学和病原学调查研究

斑点热群（ＳＦＧ）立克次体是立克次体属中最复杂的一群，分布在世界各地。１９８６年日本内田孝宏在四国地区分离出一株日本红斑热立克次体［１］，为ＳＦＧ的一个新种，而海南岛的自然景观与四国相似，是否也有日本红斑热立克次体感染存在？我们于１９９０年在海南岛各...

海南岛流行性出血热血清学调查

目的 :调查海南岛一般人群中流行性出血热 (EHF)的隐性感染率 ,以了解人群对 EHF的免疫力。方法 :应用 m IFA法分别对采自海南各地区一般人群血清 3 71份、不明热患者血清 3 5份进行流行性出血热 (EHF) Ig G抗体检测。结果 :一般人群血清中只有 1份阳性 (滴度 :1∶ 80 )。阳性率为0 .2 7% ,不明热患者血清中有 2份阳性 (滴度 :1∶ 2 0 )。阳性率为 5 .71 %。结论 :海南岛一般人群隐性感染率低 ,人群缺乏对 EHF的免疫力。海南岛是否存在 EHF的易感因素需要进一步研究。

海南岛斑点热和斑疹伤寒立克次体抗体检测报告

斑点热群(Spotted Fever Group,SFG)立克次体感染在中国北部已经证实,最近在中国南部西双版纳也有报告。冯慧敏等 1986年在海南通什地区作过血清学调查,发现当地居民1.5％斑点热群立克次体抗体阳性。内田孝宏 1986年在日本四国地区自患者血液分离出一株斑点热群立克次体,经美国德克萨斯大学医学院鉴定为斑点热群中一个新种。

海南5城市蟑螂种类组成及其体表带菌情况调查

为了解海南省蟑螂种类组成及其体表携带细菌情况,在具有代表性的海口、文昌、三亚、五指山和儋州等5市不同生境(工厂、住宅、农贸市场、饮食等特殊行业、商店杂货店,以及下水道口等)选267个调查点,放置ZA型盒诱捕蟑螂,将捕获的蟑螂带回实验室分类鉴定,用常规方法分离、鉴定其体表携带的细菌。共捕获2属5种441只蟑螂,其中美洲大蠊占75.3%。下水道口放置67个诱捕蟑螂盒,捕获61只蟑螂(阳性率为91.0%)。体表细菌检测170只蟑螂,其中有140只阳性(阳性率为82.4%),主要是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、葡萄球菌、志贺菌、变形杆菌和霉菌等7种。美洲大蠊为本地区优势种类。蟑螂体表携带多种细菌,下水道口是本地区防治蟑螂的重点。

人宫颈癌组织及癌旁正常组织蛋白质组的比较研究

目的:构建人宫颈癌组织及癌旁组织双向凝胶电泳图谱,筛选差异表达的蛋白质.方法:人宫颈癌组织及癌旁正常组织标本10例,应用固相pH梯度双向凝胶电泳后,Ima-geScanner扫描图像、ImageMaster2-DEElite4.01软件分析识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪得到相应的肽质指纹图谱,联网ExPASY网站查询相关数据库鉴定获得的差异蛋白质点.结果:癌组织和癌旁正常组织凝胶的平均蛋白质点数分别为1285±85和1063±76,凝胶上蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦方向的偏差是(1.78±0.18)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.89±0.21)mm;比较10例宫颈癌组织及癌旁正常组织的双向凝胶电泳图谱,未匹配总点数为156±18,对31个差异蛋白质点进行肽质指纹图分析,初步鉴定了8个与肿瘤基因、细胞周期调控、信号转导等有关的蛋白质.结论:建立了分辨率高且重复性较好的人宫颈癌组织与癌旁正常组织的双向凝胶电泳图谱,并成功鉴定出部分与宫颈癌癌变相关的差异表达的蛋白质,为筛选宫颈癌特异性的诊断分子标志物奠定了的基础.

尘螨变应原Der f1植物表达载体的构建及表达

目的:构建尘螨变应原Der f1植物表达载体并侵染烟草叶片表达。方法:从保存的含pET28a(+)-Der f1的甘油菌株中扩增Der f1基因,并克隆到质粒载体中,提取质粒,进行测序;以ClaⅠ、SalⅠ双酶切,将Der f1基因克隆到马铃薯X病毒(PVX)载体中,构建植物病毒表达载体;将PVX-Der f1转化脓杆菌,挑取Kan、Tet抗性阳性的菌株侵染烟草叶片进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定和分析。结果:经SDS-PAGE分析,有4株烟草叶片蛋白提取物在34Mr处有特异性蛋白条带;经Western blot进一步验证其变应原,结果显示,烟草叶片中获得的重组蛋白在34Mr处与阳性血清发生特异性结合,而与阴性血清并不发生结合。结论:成功构建了植物病毒表达载体PVX-Der f1并获得表达,为尘螨变应原Der f1的研究提供新思路。

亚马逊利什曼原虫无鞭毛体的体外培养及其抗原性分析

目的建立亚马逊利什曼原虫无鞭毛体体外培养方法,并用间接免疫荧光法分析其抗原特异性。方法小鼠皮损组织处获得的无鞭毛体(Al)、由前鞭毛体转化来的无鞭毛体(Ap)、J774.G8巨噬细胞来源的无鞭毛体(Aj)置于改良后的Schneider’sDrosophila培养基,pH4.6、33℃条件下培养,取培养物光镜下观察并用间接免疫荧光法分析。结果三种不同来源无鞭毛体体外培养物光镜检查形态相似,均与纯培养获得的无鞭毛体一样。与无鞭毛体特异性蛋白P-8和P-4特异性单克隆抗体进行间接免疫荧光分析显示,三种不同来源的无鞭毛体均出现阳性,且浓度与部位相似。而前鞭毛体与抗P-8单克隆抗体(mAb)染色呈弱阳性反应,与抗P-4单克隆抗体呈阴性反应。相反,GP-46/M-2McAb与前鞭毛体染色呈强阳性反应,与无鞭毛体仅呈弱阳性反应。结论在33℃条件下,用改良的Schneider’sDrosophila培养基进行无鞭毛体体外培养获得成功。用阶段特异性单克隆抗体,进行间接免疫荧光分析法可鉴定亚马逊利什曼原虫的无鞭毛体。

应用PCR技术检测斑点热群立克次体特异性DNA

作者对不明热患者血液，立克次体细胞培养物，疫区的微小牛蜱，野鼠脾脏等标本，应用Ｒｒ．１９０．７０ｐ和Ｒｒ．１９０．６０２ｎ引物对，进行ＰＣＲ扩增，检测斑点热群立克次体特异性ＤＮＡ。检测结果１．２０份不明热患者或疑似立克次体病患者血液标本，检出阳性结果的有７份（７／２０阳性）。２．２７份不明热患者或疑似立克次体病患者血液标本的细胞分离培养物，检出阳性结果的有１４份（１４／２７阳性）。３．７组微小牛蜱有２组检出阳性结果（２／７阳性）。４．４７组野鼠脾脏８组检出阳性（８／４７阳性）。

RT-PCR检测亚马孙利什曼原虫P-4和GP-46基因表达

目的证明亚马孙利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的基因表达水平。方法用RNA分离试剂盒,分别提取3种不同来源的无鞭毛体(由小鼠模型皮损组织获得的无鞭毛体、由前鞭毛体培养转化而来的无鞭毛体,以及来自J774.G8巨噬细胞株的无鞭毛体)的总RNA,以及前鞭毛体总RNA,然后用SuperScripⅡ逆转录聚合酶将其逆转录为cD-NA,再经PCR扩增无鞭毛体特异核酸酶(P-4)和前鞭毛体特异膜糖蛋白(GP-46)的特异片段,经1.5%琼脂糖凝胶电泳分析。结果3种不同来源的无鞭毛体均观察到P-4特异性条带(273bp),且密度相似,但在前鞭毛体中未观察到;在前鞭毛体中观察到高表达的GP-46特异性条带(325bp),但在3种无鞭毛体中弱表达。结论由前鞭毛体转化的无鞭毛体能高水平表达亚马孙利什曼原虫无鞭毛体P-4特异基因,可为其生物化学及免疫学研究提供无鞭毛体来源。

尘螨变应原Derf1植物表达产物诱导哮喘小鼠免疫耐受的研究

目的:采用尘螨变应原组分Derf1植物表达产物免疫治疗哮喘小鼠,了解其诱导哮喘小鼠免疫耐受的效果及机制。方法:将BALB/c小鼠分为正常组、哮喘组和治疗组,治疗组在致敏后分别给予尘螨变应原Derf1原核表达产物(rDE)和烟草叶片中的表达产物(rDP)免疫治疗,处死小鼠,取支气管肺泡灌洗液(BALF)、血清和肺组织,分别进行细胞学、螨特异性抗体、细胞因子和组织病理学检查,观察这些指标的变化。结果:哮喘组和治疗组BALF中细胞总数明显增多,中性和嗜酸性粒细胞超过50%;rDE和rDP治疗后,小鼠BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞减少;哮喘组和治疗组小鼠螨特异性IgE、IgG和IL-4水平升高,IFN-γ水平下降(P<0.01);rDE和rDP治疗后,IgE、IgG和IL-4水平下降,IFN-γ水平上升(P<0.01-0.05),以rDP疗效更好;哮喘组小鼠支气管、细支气管和小血管周围可见明显炎性细胞浸润,rDE和rDP治疗后,炎症减轻,以rDP改变更为明显。结论:尘螨变应原Derf1植物表达产物较原核表达产物能更有效地减轻螨性哮喘小鼠的气道炎症,诱导免疫耐受形成。

丙型肝炎病毒多细胞毒性T淋巴细胞表位DNA疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

本研究通过构建含有两个丙型肝炎病毒（HCV）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位（Core133-142和El315-322）的多HCVCTL表位DNA疫苗，用其免疫小鼠，研究其引起的特异性CTL应答，以明确由多个HCVCTL表位基因编码直接连接构成的多CTL表位DNA疫苗，其各个HCVCTL表位是否能独立表达，引起各自相应的特异性CTL应答，且多个CTL的联合作用能否能增强总体的CTL杀伤效应，为构建有效安全的多CTL表位DNA疫苗提供理论基础。

环氧合酶-2在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨COX-2的表达与卵巢癌生物学关系。方法:采用免疫组化SP法,分别测定12例正常卵巢组织、16例良性卵巢肿瘤、70例卵巢癌组织中COX-2的表达。结果:70例卵巢癌组织中COX-2阳性表达62例,明显高于正常卵巢组织,COX-2与临床分期、及淋巴结转移均有一定关系,与病理类型无关。结论:COX-2与卵巢癌的发生、发展及转移有关,可作为观察卵巢癌进展的重要指标。

不同配比的注射用头孢呋辛钠/他唑巴坦钠的体外抑菌作用考察

目的:观察不同配比的注射用头孢呋辛钠/他唑巴坦钠(CEF/TAZ)的体外抑菌效果,为寻找CEF与TAZ的最佳配比提供试验依据。方法:采用琼脂二倍稀释法,考察不同质量配比(1:1、2:1、4:1、8:1)的CEF/TAZ复方制剂对湖南长沙地区2009年6月-2011年6月的319株临床分离菌的体外抑菌效果,以50%最低抑菌浓度(MIC50)、MIC90及MIC抑菌范围为指标,并与单组分CEF、TAZ和阳性对照头孢噻肟钠/舒巴坦钠(CTX/SBT)、头孢曲松钠(CTRX)/SBT的抑菌效果进行比较。结果:对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌,无论其是否产β-内酰胺酶,4种配比的CEF/TAZ的抑菌效果均相对强于单组分和阳性对照,其中以CEF/TAZ(4:1、8:1)最明显;对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的细菌,CEF/TAZ(2:1、4:1)表现出较CEF/TAZ(1:1、8:1)、单组分和阳性对照更强的抑菌效果;对不产ESBLs的细菌,除CEF/TAZ(1:1)抗大肠埃希菌稍差外,其余3种配比的CEF/TAZ的抑菌效果均强于单组分和阳性对照。结论:CEF/TAZ以2:1、4:1质量配比时,对产与不产β-内酰胺酶或ESBLs的菌株均有较好的抑菌效果。