建立检验医学系专业实验室进行实验教学改革的体会

海南医学院自成立检验医学系专业实验室以来,对实验教学进行改革尝试,把原来部分理论教学内容放在实验室上,创立交互氏教学模式,并收到良好的教学效果。同时对这种教学模式也提出一些建议。笔者对如何组织编写好实验报告,充分开放实验室,加强实验考核评分等方面也作了一些有益的探索。

细菌性阴道病的检测及其与生殖道支原体感染的关系

目的 调查研究细菌性阴道病合并支原体感染情况 ,为临床有关诊治提供依据。 方法 应用Amsel标准对 13 17例病人进行细菌性阴道病检测 ,采用快速支原体液体培养基对其中确诊的 3 5 3例细菌性阴道病患者和 15 0例健康体检者的阴道分泌物进行支原体培养。 结果 3 5 3例细菌性阴道病患者支原体感染阳性 2 19例 ,阳性率62 .0 4% ;15 0例健康体检者支原体感染阳性 17例 ,阳性率 11.3 3 % ,两者具有非常显著差异 (P <0 .0 1)。 结论 细菌性阴道病可能是支原体感染的诱因之一。细菌性阴道病合并支原体感染相当普遍 ,临床诊治时应该注意。

海南地区α-地中海贫血筛查方法探讨

目的:探讨血液常规参数分析、zeta链蛋白检测及高效液相色谱分析法在海南α-地中海贫血筛查中的临床价值。方法:收集平均红细胞体积(MCV)<80 fl,平均红细胞血红蛋白含量(MCH)<26 pg,红细胞体积分布宽度(RDW)正常或稍高的EDTA-K2抗凝全血标本共139例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测zeta链蛋白和HPLC法测定血红蛋白亚型HbA2含量,然后提取全血DNA,经PCR扩增后,琼脂糖凝胶电泳检测常见α-地贫缺失类型--SEA、-α3.7、-α4.2。结果:139例全血标本中zeta链蛋白阳性49例,48例为东南亚缺失型α-地贫,其中2例同时合并有左缺失或右缺失;阴性90例,4例为东南亚缺失型。Zeta链蛋白检测东南亚缺失型α-地贫的灵敏度为92.31%,特异度为98.85%,假阳性率为2.04%,假阴性率为4.44%,阳性预测值为97.96%,阴性预测值为95.56%。经HPLC检测HbA2≤2.5%标本共92例,确诊为α-地贫患者62例,占67.39%;HbA2>2.5%标本47例,4例为α-地贫,占8.51%。HbA2≤2.5%标本和HbA2>2.5%标本中α-地贫所占百分率差异比较有统计学意义。139例小细胞低色素性贫血患者中证实为α-地贫者66例,α-地贫检出率为47.48%,以--SEA/αα基因型为主,占34.53%;3种α-地贫缺失突变的基因频率为0.575 7,其中-α3.7、-α4.2和--SEA的等位基因频率分别为0.068 2,0.113 6和0.393 9。结论:血液学参数分析、zeta链蛋白检测及HPLC法均可作为海南地区α-地贫筛查的有效方法。

海南地区乙型肝炎基因型与YMDD自然突变的相关性

目的:了解海南地区未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者YMDD突变和乙型肝炎病毒基因型情况及两者之间的关系。方法:收集49例未使用抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测乙肝病毒表面标志物,PCR-反向点杂交方法测定HBV突变及基因型。结果:49例患者中,检出B型8例(16.33%),其中发生YMDD自然突变1例(12.5%);C型34例(69.39%),其中发生YMDD自然突变6例(17.65%),YMDD自然突变的发生率C基因型与B基因型相比差异无统计学意义(P>0.05);同时两基因型之间乙肝标志物的比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:海南地区慢性乙型肝炎患者中,优势基因型为C型。在未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者中存在YMDD变异株。

海南地区正常汉族人群对氧磷酶2基因多态性分布的研究

目的:探讨我国海南地区汉族人群对氧磷酶2(paraoxonase 2,PON2)基因多态性(148 Ala/Gly;311 Cys/Ser)的分布情况,为进一步研究PON2关联性疾病的发病机制奠定基础。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术对207名我国海南地区汉族正常人进行对氧磷酶2(148 Ala/Gly及311 Cys/Ser)基因多态性的分析。结果:我国海南地区汉族正常人群对氧磷酶2基因148、311位点存在多态性,其基因频率分别为GG0.116、GA0.237、AA0.647、CC0.111、CS0.411、SS0.478;与国外其他种族人群比较,海南汉族正常人基因型频率与台湾人、苏格兰人、英格兰人、俄罗斯人、加拿大人、非裔美国人、白种美国人、澳大利亚人在不同位点上存在明显差异(P均<0.05)。结论:我国海南地区汉族正常人群对氧磷酶2基因多态性分布不同于国外其他种族,呈现明显种族、地域性差异。

临床生物化学检验实验教学改革探索

针对当前我国高等医学院校临床生物化学检验(简称生化检验)实验教学中存在的问题,笔者进行了一系列关于实验教学体系、教学形式、教学内容、教学主体、学生科研能力培养、实验教学与见习、实习结合等改革措施,为增加学生学习主动性、积极性,提高实验教学质量,培养高素质的医学创新人才起了明显促进作用。

海南地区Zeta链蛋白检测在东南亚型α-地中海贫血筛查中的应用价值

目的以α-地中海贫血基因检测结果为标准,探讨Zeta链蛋白检测在α-地中海贫血东南亚缺失型临床筛查中的应用价值。方法随机收集634例EDTA-K2抗凝全血标本,采用酶联免疫法检测人外周血细胞中Zeta链蛋白,同时提取全血DNA,采用多重PCR结合电泳法检测标本α-地中海贫血基因。结果634例全血标本经酶联免疫法检测Zeta链蛋白阳性113例,阴性521例;Zeta链蛋白阳性标本中经基因检测全部确诊为α-地中海贫血东南亚缺失型,阴性中无α-地中海贫血东南亚缺失型。Zeta链蛋白检测α-地中海贫血东南亚缺失型灵敏度为100%,特异度为100%,假阳性率0%,假阴性率0%,阳性试验的预示值100%,阴性试验的预示值100%。结论酶联免疫法检测Zeta链蛋白是一种简便、快速检测α-地中海贫血东南亚缺失型的方法,可用于临床大规模筛查。

AMI病人心功能指标EF%与CK/CK-MB之间相关关系

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)病人溶栓治疗后CK/CK-MB与EF%的相关关系。方法:观察分析近2年来收治的AMI病人65例,除资料不全的病人(22例)外,依据治疗方法不同分为两组,溶栓组17例,未溶栓组26例,对比分析其治疗前、后CK/CK-MB峰值及治疗前、后峰值之差(△CK/CK-MB)与EF%的相关关系。结果:治疗前CK/CK-MB峰值、△CK峰值两组无显著性差异;△CK-MB峰值两组有显著性差异(P<0.05);治疗后溶栓组平均EF%值稍高于未溶栓组平均EF%值(P>0.05);溶栓组中治疗后CK/CK-MB峰值与EF%呈负相关关系;未溶栓组中治疗后CK/CK-MB峰值与EF%不呈相关关系。结论:溶栓治疗对冠脉再灌注和心功能的恢复优于未溶栓治疗对冠脉再灌注和心功能的恢复。

海口市大学生宿舍尘螨孳生情况的调查

目的:调查海口市大学生宿舍螨类孳生情况。方珐:采集学生宿舍床尘、枕尘、桌面尘、地板尘和门楣窗楣尘,光镜下观察。结果:共采集尘样2 676份,尘螨检出率为43．80％;其中床尘、枕尘、桌面尘、地板尘和门楣窗楣尘的检出率依次为52_39％、54．55％、18．40％、24．80％和14．80％,具有显著性差异(P<0．01);男、女生宿舍尘螨检出率依次为44．79％和42．58％(P>0．05);从1楼至6楼的学生宿舍采集的尘样中,螨的检出率依次为51．21％、48．03％、43．56％、41．23％、36．56％和33．88％,具有显著性差异(P<0．01);4人间和6人间宿舍尘螨检出率分别为44．07％和43．59％(P>0．05);1995年以前,2000年以前和2000年以后建成的学生宿舍尘螨检出率依次为45．40％、42．27％和43．96％ (P>0．05);农业院校、医学院校、师范院校和综合性大学尘螨检出率依次为43．65％、44．08％、45．40％和41．51％(P>0．05)。鉴定出螨种15种,其中前12种属于无气门目。结论:学生宿舍确有螨类孳生, 且以枕尘和床尘为适宜场所,有随楼层增高孳生率呈递减趋势。热带氏无爪螨为本地区的优势螨种。

方格星虫多糖抗菌活性的初步研究

目的研究方格星虫多糖的抗菌活性。方法以方格星虫体壁作为试验材料,经沸水抽提、乙醇沉淀和sevage法去蛋白后得到粗多糖,再经G-50葡聚糖凝胶柱层析纯化。采用硫酸-苯酚法测定多糖的含量,以含不同浓度的方格星虫多糖(50,37.5,25,12.5mg/ml)培养基,分别接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草杆菌培养12、24、36、48h,观察并记录其生长情况。结果不同方格星虫多糖浓度(25～50mg/ml)对三种试验菌的生长均有抑制作用,浓度越高抗菌活性越强。结论方格星虫多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌埃希菌、枯草杆菌有明显的抗菌活性。

上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平的变化

目的:探讨上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平.方法:用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,流式细胞仪检测特异性细胞因子表达水平.结果:上皮性卵巢癌患者Thl型细胞因子IL-2,IFN-γ表达水平依次为(9.47±3.56)ng/L,(10.12±2.51)ng/L,而正常对照组依次为(12.20±2.48)ng/L,(13.38±2.89)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);而Th2型细胞因子IL-4,IL-10表达水平依次为(4.56±0.78)ng/L,(5.26±2.27)ng/L,而正常对照组依次为(1.24±0.39)ng/L,(1.46±0.52)ng/L,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:卵巢癌患者Thl/Th2失调,Th1型反应弱,Th2型反应优,可使肿瘤细胞发生免疫逃逸.

生物薄片法对不育患者血清抗精子抗体分析及其临床应用

目的 了解不育患者血清抗精子抗体 (AsAb)的类型及其吸附精子部位的分布情况 ,探讨AsAb定位检测在体外受精筛选中的临床应用。方法 采用德国欧蒙公司生产的生物薄片试剂盒 (间接免疫荧光法 )对来我院就诊的 16 78例不育患者血清进行AsAB检测。结果 AsAb总阳性率为 7.6 3% ;其中IgM占 4 2 .2 % ,IgG占 4 6 .1% ,两者同时存在的占 8.6 % ,IgA占 3.1% ;抗头部的(包括抗头尾部和抗头体尾部 )占 6 2 .5 % ,抗体部的未见 ,抗尾部的占 36 .7% ,抗体尾部的占 0 .8%。IgM类抗头部的 (包括抗头尾部 )占 84 .6 % ,IgG类抗尾部的占 6 5 .7% ,IgA类抗头部的占 10 0 %。结论 血清AsAb类型以IgM和IgG为主 ,吸附部位以抗头部为主 ,IgM以抗头部为主 ,而IgG以抗尾部为主 ,AsAb定位检测对体外受精治疗者的筛选有独特的价值。

哮喘患者血清抗体水平与居室尘螨抗原浓度的季节变化

目的探讨哮喘患者血清抗体水平与室内尘螨抗原浓度的季节变化规律。方法选择螨性哮喘患者36例作为病例组(男性21例,女性15例),平均年龄为(43.49±3.26)岁;选择健康体检合格者20人作为对照组(男性11人,女性9人),平均年龄为(42.85±2.74)岁。分别于2005年9月(秋季)、12月(冬季)和2006年3月(春季)、6月(夏季),采集病例组室内积尘,同步采集病例组晨起空腹静脉血;对照组尘样、血清于2005年9月(秋季)进行采集。采用ELISA法检测积尘中尘螨抗原DerP1浓度水平和血清中总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2、s-IgG3和s-IgG4水平。结果秋季病例组血清中总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4水平以及室内积尘中抗原DerP1浓度水平均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。不同季节病例组血清中总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4水平以及室内积尘中抗原DerP1浓度水平间比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。病例组室内尘埃中尘螨抗原DerP1浓度呈季节变化,以冬、春季较高,夏、秋季较低。病例组血清中总IgE、s-IgE及s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4水平亦呈季节变化,总IgE、s-IgE、s-IgG4水平以冬、春季较高,夏、秋季较低;s-IgG1、s-IgG2以冬、春季较低,夏、秋季较高。结论哮喘患者血清中总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4和室内尘螨抗原DerP1浓度均呈季节变化,s-IgG1水平的变化与尘螨抗原DerP1浓度的变化趋势相反,而s-IgG4水平的变化与尘螨抗原DerP1浓度的变化趋势一致。

HPLC与基因检测联合应用对地贫诊断的临床价值

目的探讨高效液相色谱法(HPLC)和基因检测诊断地中海贫血的临床价值。方法收集平均红细胞体积(M CV)<80 fl,平均红细胞血红蛋白含量(M CH)<26 pg的EDTA-K2抗凝的血常规标本共174例份,用HPLC方法测定血红蛋白亚型HbA2含量,对地贫进行非基因检测;提取全血DNA,经PCR方法扩增后,采用琼脂糖凝胶电泳对疑似α-地贫患者标本常见缺失类型-S-EA、-3α.7、-4α.2进行检测,采用反向点杂交(RDB)法对疑似β-地贫患者标本常见突变类型CD 41-42M,-28M,IV S-II-654M,CD 71-72M等进行基因检测。结果174例中HbA2正常27例,异常147例,106例HbA2≤2.5%,疑似α-地贫,41例HbA2≥3.5%,疑似β-地贫,对疑似α-地贫和β-地贫的患者标本分别进行基因检测,其中α-地贫66例,34例正常(未见检测的三种缺失),5例诊断不明未检出。结论采用HPLC和基因检测法对诊断α-地贫检出率差异具有显著性,对诊断β-地贫具有很高的符合率。HbA2的异常程度与是否地贫并无相关性。HPLC适用于β-地贫产前诊断和遗传病咨询,α-地贫则需进行基因检测提高诊断的准确率。

对氧磷酶生物学特性及临床研究进展

对氧磷酶（PON）是一类催化水解磷酸酯键的芳香酯酶，它可降解有机磷酸酯、芳香羧酸酯及氨基甲酸酯等。对氧磷酶基因家族拥有PON1、PON2和PON3三个成员，它们有相似的结构及酶活性。近年来研究发现，PON与动脉粥样硬化及2型糖尿病发病机制密切相关。随着分子生物学的进展，对PON在疾病发病机制领域的研究更加深入，现就近年来的研究进展综述如下。

肝癌的VEGF及其受体的研究进展

研究肝癌的血管生成与转移的关系,对控制肿瘤的生物学行为至关重要。本文简要综述了血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)的研究进展,重点综述了VEGF和VEGFR与肝癌转移和术后复发关系的研究进展。

海口市大园路两所私立幼儿园儿童蛲虫感染情况调查

目的了解海口市大园路私立幼儿园儿童感染蛲虫的情况。方法采用透明胶纸粘贴法。结果儿童蛲虫总感染率为42.86%,幼儿园、性别、年龄、籍贯的感染率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两所幼儿园蛲虫感染者中均以虫卵数≤5个/视野的儿童为主(P<0.05)。结论两所幼儿园蛲虫感染情况较严重,私立幼儿园园方应采取针对性防治措施。