病原生物学研究生管理评价体系的建设与实践——以海南医学院为例

对海南医学院病原生物学硕士研究生的培养模式进行了探讨,创建"文献阅读能力"的考核与"公开式文献抄读""五项基本实验操作技术"的达标考核、"有特色的学术报告""多学科交叉式开题"的审核把关以及"增配一名盲评专家"的中期考核等科研能力的培养考核考核体系,并进行实践。在不同的研究生阶段进行不同的考核与评价,培养研究生不仅掌握各种实验技术方法,而且具备独立思考、解决问题和设计研究课题的能力。

思政教育与素质培养并行的基础医学教育模式探索——以“病原生物学”课程为例

医学生作为未来的医务工作者,其医德水平的高低直接关系到将来为病患服务的质量和水平,思政教育和素质教育是高等医学教育的核心内容。“病原生物学”是基础医学的核心课程,是医学生的主干课程之一。结合“病原生物学”课程的特色,在教学过程中开展思政教育和素质培养并行的教育模式,将思政教育和素质培养融入教学的各环节,以达到在传授专业知识的同时落实立德树人的根本目标,亦可为基础医学教育的教学改革和发展提供切实可行的实践经验基础。

海南医学院在校大学生蠕形螨感染状况调查分析

目的了解大学生面部蠕形螨的感染情况,为大学生皮肤蠕形螨的预防提供指导性资料。方法选取海南医学院2009级272名大学生为调查对象,使用透明胶带粘贴法进行面部取样,通过显微镜镜下观察,查到蠕形螨即为阳性结果,记录数据并进行统计学分析。结果 272名调查对象中阳性者69名,总感染率为25.37%,感染者以轻度感染者为主,占总感染人数的92.70%(P<0.01);感染蠕形螨类型以毛囊蠕形螨为主,其感染率为56.52%(P<0.01);蠕形螨感染率与学生生源地、性别及皮肤损伤情况无关(P>0.05)。结论蠕形螨感染可能与大学生的个人卫生和生活习惯因素有关。

医学本科不同专业病原生物学的教学策略

随着医学院校的专业不断细化,高等医学教育教学理念和教学模式逐步改变。在病原生物学教学过程中,应针对不同专业采取不同的教学策略,同时构建以学习者为中心的自主学习应用体系,探索适合病原生物学和相应医学专业的教学模式,并为其他基础医学课程提供参考。

“病原生物学”线上线下混合式教学模式研究

充分利用现代信息技术和在线资源,基于在线精品课程和微信公众号,结合企业微信等直播平台,探索线上线下混合模式在病原生物学课程教学中的实际应用。同时结合现状和历史,优化教学内容,打破对病原生物学认知的局限性,注重医学生的思政教育和素质培养。线上线下混合式教学有力支撑了病原生物学课程教学工作的顺利进行,有效促进了教、学的有机融合,具有一定实效性和应用价值,可为高等医学院校基础医学课程的教学模式改革提供参考。

新医科背景下的医学微生物学实验教学改革

目的:探索培养素质高、创新能力强的实用型卓越医学人才的途径。方法:对医学微生物学实验教学准备进行改革。结果:在一定程度上激发学生的求知欲和学习兴趣、调动了学生学习的主动性和积极性、培养了学生的创新能力。结论:实验课教学准备在学生原始创新能力、综合分析问题能力具有重要作用,也是激发学生求知欲,提高学生学习兴趣的重要环节。

曼氏迭宫绦虫annexinB8的生物信息学分析和基因克隆

目的通过生物信息学预测曼氏迭宫绦虫annexinB8(SmannexinB8)的生物学特征,及潜在功能和结构,并且进行基因克隆,为下一步SmannexinB8参与宿主免疫调节研究提供依据。方法通过NCBI的ORF finder工具对SmannexinB8的开放阅读框进行分析.利用ExPASy网站进行蛋白的物理化学参数、信号肽、跨膜螺旋、潜在分子生物学功能的预测,通过NCBI/BLAST。对蛋白保守功能域进行检测。不同物种的annexin序列从NCBI网站获取,并利用Vector NTI suit 8.0和TreeView软件进行分析。利用SWISS-MODEL网站和SPDBV 4.10软件分析SmannexinB8蛋白的三维空间结构。此外。对SmannexinB8基因进行扩增,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)。结果 SmannexinB8是一个全长基因,编码347个氨基酸。蛋白由4个典型的annexin重复结构域组成,序列当中没有信号肽,是一个稳定的可溶性蛋白分子。三维空间立体结构分析结果显示SmannexinB8是一个保守的蛋白。SmannexinB8与多房棘球绦虫、口膜壳绦虫、细粒棘球绦虫、华支睾吸虫以及人类的annexin基因的同源性分别是68%,67%。65%,46%和40%。分子进化分析显示SmannexinB8与绦虫属的亲源性最近,而与其他物种,如吸虫、哺乳动物亲源性较远。结论 SmannexinB8可能具有抑制磷脂酶A2的活性,促进细胞融合、参与调节免疫反应和离子通道形成的功能,可能在参与宿主免疫调节中起到关键性的作用。

曼氏迭宫绦虫cathepsin L样蛋白酶的生物信息学分析

目的通过生物信息学预测曼氏迭宫绦虫cathepsin L样蛋白酶(Smcathepsin L样蛋白酶)的生物学特征及其潜在功能和结构,为下一步Smcathepsin L样蛋白酶参与寄生虫和宿主相互作用过程研究提供依据。方法通过NCBI的ORF finder工具对Smcathepsin L样蛋白酶的开放阅读框(ORF)进行分析,利用Ex PASy网站进行蛋白的物理化学参数、信号肽、跨膜螺旋和潜在分子生物学功能的预测,通过NCBI/BLAST对蛋白保守功能域进行预测。从NCBI网站获取不同物种的cathepsin L样蛋白酶序列,并利用Vector NTI suit 8.0和Tree View软件进行分析。利用SWISS-MODEL网站和SPDBV4.10软件分析Smcathepsin L样蛋白酶的三维空间结构。结果 Smcathepsin L样蛋白酶是一个全长基因,编码336个氨基酸。蛋白由2个典型的cathepsin L样蛋白酶结构域组成,序列当中有信号肽,是一个稳定的可溶性蛋白分子。三维空间立体结构分析结果显示Smcathepsin L样蛋白酶是一个保守的蛋白。Smcathepsin L样蛋白酶编码氨基酸序列与细粒棘球绦虫、链状带绦虫、多房棘球绦虫和人的cathepsin L样蛋白酶基因的同源性分别是50%、50%、49%和46%。分子进化分析显示Smcathepsin L样蛋白酶与日本血吸虫、多房棘球绦虫和链状带绦虫亲源性更近,而与其他物种,例如原虫、线虫和哺乳动物亲源性较远。结论 Smcathepsin L样蛋白酶可能是一个潜在的分泌蛋白,该蛋白能在胞外发挥作用,即在寄生虫的消化、转移、入侵及宿主-寄生虫相互作用中起着重要的作用,是一个具有潜在研究价值的多功能分子。

数字摄像头和生物显微镜对显微图像定量分析的影响

目的探讨数字摄像头和生物显微镜对显微图像定量分析的影响情况。方法以物镜测微尺为研究标定,将不同数字摄像头安装同一生物显微镜(不同摄像头组)和同一数字摄像头安装不同生物显微镜(不同显微镜组)后对测微尺进行摄像,应用图像分析软件分别测试不同测微尺图像每微米所代表的像素值,并对测试结果进行分析比较。结果 CX31显微镜下DPIXEL200、DP520DC、MD20、YM310和DP26所摄取的测微尺图像每微米所代表的像素值分别为(2.398±0.011)、(5.217±0.019)、(4.770±0.012)、(4.764±0.020)和(4.437±0.023),差异有高度统计学意义(P<0.01);而CX31、CX41、B204TR和BK-FL4显微镜下DPIXEL200摄取的测微尺图像每微米所代表的像素值分别为(2.398±0.011)、(2.400±0.009)、(2.409±0.013)和(2.395±0.012),差异无统计学意义(P>0.05)。结论数字摄像头对显微图像定量分析影响明显,而生物显微镜则影响不明显。

基于混合式教学的《病原生物学》课程思政探索与实践

如何有效实现高校思政课与专业课的融合,是当前我国高等教育的热点话题。混合式教学作为一种新的教学模式,已逐渐成为高校教学的新常态。基于混合式教学开展课程思政,既是专业课程教学的内在动力需求,也是实现全程全方位育人的必要举措。该文致力于将《病原生物学》课程思政和混合式教学相结合,协调处理好教学内容的"减法"与课程思政和教学效果的"加法"的关系,使《病原生物学》课程与思想政治理论课形成"协同效应",这对于提高教学质量、加强教学改革、真正实现"全课程育人"具有重要学术价值,同时,为相关学科的课程思政改革提供借鉴。

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中HIF-1α和HSP70的表达及其意义

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和热休克蛋白70(HSP70)在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中的表达,阐明两者在妊高征患者胎盘组织中表达的临床意义。方法:收集妊高征患者胎盘组织22例(妊高征组)和正常孕妇胎盘组织18例(对组照),采用免疫组织化学法检测2组孕妇胎盘组织中HIF-1α和HSP70的表达情况,分析两者阳性表达率在妊高征患者和正常孕妇胎盘组织中的差异及其在妊高征患者胎盘组织中的关系。结果:妊高征组患者和对照组正常孕妇胎盘组织中HIF-1α阳性表达率分别为81.8%和38.9%,妊高征组患者胎盘组织中HIF-1α阳性表达率明显高于对照组(χ2=7.785,P=0.005);妊高征组患者和对照组正常孕妇胎盘组织中HSP70阳性表达率分别为90.9%和55.6%,妊高征组患者胎盘组织中HSP70阳性表达率明显高于对照组(χ2=6.599,P=0.010)。妊高征组患者中18例HIF-1α阳性表达的胎盘组织全部HSP70表达阳性(100.0%),而4例HIF-1α阴性表达的胎盘组织有2例HSP70表达阴性(50.0%),两者表达存在明显的正相关关系(r=0.671,P=0.001)。结论:妊高征患者胎盘组织中HIF-1α和HSP70呈高表达,且两者的表达呈正相关关系。

乳腺癌组织中热休克蛋白70和p53表达及相关性

目的探讨热休克蛋白(HSP)70和p53在乳腺癌组织中的表达及其相关关系。方法采用免疫组化技术检测24例乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中HSP70与p53的表达情况。结果与癌旁正常乳腺组织相比,乳腺癌组织HSP70与p53的阳性率显著升高(P<0.05),与TNM分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与年龄和肿瘤的大小无关(P>0.05);同时HSP70与p53的表达呈正相关(r=0.516,P=0.013)。结论 HSP70与p53在乳腺癌组织呈高表达且关系密切,在乳腺癌的发生发展中起到一定作用。

胸水中腺癌细胞和反应性间皮细胞的形态结构定量判别分析

目的:定量揭示胸水中腺癌细胞(adenocarcinoma cell,ACC)的形态结构特征,筛选对ACC诊断分类有重要价值的尺寸和形状参数。方法:取胸水涂片中764个ACC(44例)和709个反应性间皮细胞(reactive mesothelial cell,RMC;39例),用计算机图像分析技术测试细胞和细胞核的尺寸和形状参数;其中尺寸参数包含面积(A)、长轴(dmaj)、短轴(dmin)、平均直径()、周长(C),形状参数包括规化形状因子(RFF)、形状不规则指数(FII)、核浆比(Rnp),对测试结果进行独立样本t检验和逐步判别分析。结果:与RMC相比,ACC的尺寸参数、FII、Rn p明显增大,而RFF明显减小(P<0.05)。逐步判别分析显示,dm a j,c、dm a j,n、An、Dn、Cn、FIIc进入判别函数,其符合率为75.9%。结论:形态结构参数dmaj,c、dmaj,n、An、n、Cn、FIIc对于胸水ACC的判别研究可能有价值。

海口市大园路两所私立幼儿园儿童蛲虫感染情况调查

目的了解海口市大园路私立幼儿园儿童感染蛲虫的情况。方法采用透明胶纸粘贴法。结果儿童蛲虫总感染率为42.86%,幼儿园、性别、年龄、籍贯的感染率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两所幼儿园蛲虫感染者中均以虫卵数≤5个/视野的儿童为主(P<0.05)。结论两所幼儿园蛲虫感染情况较严重,私立幼儿园园方应采取针对性防治措施。

人体寄生虫学实验教学中手机应用的探索

在人体寄生虫学实验课教学中,教师经常遇到难以及时质控学生的学习状况和完全杜绝学生抄袭作业等问题。利用手机QQ和微信构建实验课堂学生学习质控和互动平台以及作业质控平台,以期及时解决这些问题,同时广泛分享学习内容,促进师生、生生互动,最终提高教学质量。

胸水中腺癌细胞和反应性间皮细胞的计算机判别

目的:探讨胸水中腺癌细胞(ACC)和反应性间皮细胞(RMC)的计算机判别方法 ,为胸水中ACC计算机诊断奠定基础。方法:取胸水涂片中764个ACC(44例)和709个RMC(39例),用计算机图像分析技术分别测试细胞的色度学和形态结构参数,随机选取约80%细胞作为训练组,剩余的20%细胞为测试组,对训练组的测试结果进行逐步判别分析并建立判别函数,用测试组评价函数的判别效果。结果:逐步判别分析显示,RP、BP、Rn、Bn、dmaj,c、dmin,c、An、Dn、Cn进入判别函数,符合率为84.5%,其判别效果明显优于单独基于色度学和形态结构参数所建立的判别函数(P<0.05)。结论:结合色度学和形态结构参数所建立的判别函数判别效果好,为胸水中腺癌细胞的计算机定量诊断提供了分析路径。

NAC对日本血吸虫病小鼠肝组织中iNOS、NO、GSH和GSH-PX的影响

目的:了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对日本血吸虫病小鼠肝组织中诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)及谷光甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的影响。方法:将小鼠随机分为正常组、模型组、预防a、b组和治疗a、b组,在感染同时给预防a、b组、感染后第6周给治疗a、b组分别以200 mg/kg和400 mg/kg NAC两种剂量灌胃,2次/d。正常组、模型组和预防组分别在第42天、56天时,治疗组在第56天时处死小鼠,取血清和肝脏,观察各组血清和肝组织中NO、GSH的含量及GSH-PX的活性、肝组织中iNOS的活性。结果:日本血吸虫肝病小鼠血清中NO的变化趋势和GSH与肝组织中的变化趋势不一致。预防a组和预防b组肝组织中iNOS活性和NO水平均介于正常组和模型组之间(P<0.05)。预防a组和治疗a组肝组织和血清中GSH水平均低于正常组和模型组(P<0.05)。NAC调节肝组织中iNOS、NO和GSH-PX等指标所达到的水平只与NAC的剂量有关(P<0.05),而与NAC的作用时间及NAC的剂量和作用时间的交互作用均没有关系(P>0.05)。NAC调节肝组织和血清中GSH的水平与NAC的剂量、作用时间和交互作用均有关(P<0.05)。结论:日本血吸虫病时,血清中NO和GSH等指标不能反映肝组织中含量。NAC可以改善日本血吸虫病小鼠肝组织内NO的含量i、NOS和GSH-PX活性。这可能是小剂量NAC减缓日本血吸虫病肝脏病变的早期效果最好的机制之一。但肝组织内NO的含量i、NOS和GSH-PX活性具有一个临界值。

一种基于液相基因芯片技术对甲型和乙型流感病毒分型检测方法的建立

目的建立能够对甲型流感病毒(influenza virus A,INFA)和乙型流感病毒(influenza virus B,INFB)进行区分的液相基因芯片技术,为甲型和乙型流感病毒的分型提供一种高通量、高灵敏度的检测和鉴定方法。方法从NCBI的Gen Bank下载具有代表性的流感病毒基因组序列,利用生物信息学软件Bio Edit进行序列比对,分别设计针对INFA和INFB的简并引物和特异性探针,将设计好的引物和探针与Gen Bank中所有的基因序列进行比对,以验证其特异性。经探针合成、悬浮液相芯片制备和检测条件的优化获得用于甲型和乙型流感病毒分型的液相基因芯片。结果所检测INFA和INFB均可获得特异性杂交信号,非特异性杂交信号不明显,将2种病毒混合,模拟混合病毒感染也可以得到相应的特异性杂交信号。灵敏度评估结果表明INFA的检测灵敏度为1~10空斑形成单位(plaque forming unit,pfu),而INFB为10~100 pfu。将本方法用于检测11份临床样本,其结果与荧光定量分型逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测方法的结果一致。结论本研究初步建立了INFA和INFB的液相基因芯片检测技术,可用于流感病毒的初步筛查和鉴定,并且可以进行混合感染样本的检测,为流感病毒的分型和鉴定提供了一种新的手段。

全细胞色度学分析在鉴别胸水腺癌细胞和间皮细胞中的作用

目的定量观察和分析胸水涂片中腺癌细胞的细胞浆、细胞核和全细胞的色度学特征,筛选对判别ACC和反应性间皮细胞有参考价值的色度学参数。方法胸水离心后取沉淀物涂片、然后进行巴氏染色;在数码显微镜下拍摄图像,用计算机图像分析技术测量其中的764个ACC(44例)和709个RMC(39例)的色度学参数,包括细胞浆、细胞核和全细胞的红、绿、蓝三基色,并对测试结果进行判别分析,比较基于三种色度学参数所建立函数的判别效果。结果与RMC相比,ACC的细胞浆、细胞核和全细胞红、绿、蓝三基色明显减小(P<0.05)。基于以上三种色度学参数所建立函数的判别符合率分别为68.7%、59.4%和74.7%,其中基于全细胞色度学参数所建立的函数判别符合率明显高于基于细胞浆和细胞核色度学参数所建立函数的(P<0.05)。结论在胸水ACC的定量判别分析中,全细胞的色度学参数比细胞浆和细胞核可能更具有参考价值。

N-乙酰半胱氨酸对日本血吸虫病小鼠肝组织中丙二醛和超氧化物歧化酶的影响

将90只小鼠随机分为健康对照组（18只）、感染对照组（18只）、长期服药组1（18只）、长期服药组2（18只）、短期服药组1（9只）和短期服药组2（9只）,共6组。除正常对照组外,余各组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴30条。于感染的同时给长期服药组1和长期服药组2小鼠分别灌胃200 mg/kg、400 mg/kg N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）（溶于0.2 ml蒸馏水）,2次/d,共56 d;短期服药组1和短期服药组2小鼠在感染的第42天开始分别灌胃200 mg/kg、400 mg/kg NAC（溶于0.2 ml蒸馏水）,2次/d,共14 d。正常对照组和感染对照组小鼠于感染同时灌胃0.2 ml生理盐水,2次/d,共56 d。正常对照组、感染对照组、长期服药组1和长期服药组2小鼠分别在感染后第42天和56天各处死9只;短期服药组1和短期服药组2于感染后第56天全部处死。观察各组小鼠肝组织中日本血吸虫单个虫卵肉芽肿个数和面积、血清和肝组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果表明,小鼠肝组织中炎症细胞浸润程度为＂＋＂级单个虫卵肉芽肿个数以长期服药组1最少,平均为3.04±0.25个,其次为短期服药组1,平均为4.87±0.19个。长期服药组2小鼠肝组织中MDA的水平（9.2~9.3 nmol/mg）显著低于长期服药组1（12.15~12.20 nmol/mg）（P〈0.05）。长期服药组1和短期服药组1小鼠肝组织SOD活性处在同一水平[170.00~190.00U/（g.pro）]（P〉0.05）,长期服药组2小鼠第42天也处于这一水平（P〉0.05）,但第56天与短期服药组2在同一水平（P〉0.05）。因此,NAC可减缓日本血吸虫病小鼠肝组织中单个虫卵肉芽肿形成,调节日本血吸虫病小鼠肝组织内MDA含量和SOD活性。