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二次分层离心纯化成年大鼠背根节神经元的方法
1
作者
赵久红
董栩
+6 位作者
张显芳
张海英
谭晓红
张全鹏
黄奕弟
马志健
易西南
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期436-440,共5页
目的:建立一种长时程的有效获得高度纯化成年大鼠背根节(dorsal root ganglions,DRG)神经元的方法。方法:将SD大鼠的DRG剥膜、消化制成单细胞悬液,牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)分层离心去除大部分非神经元细胞后接种于多聚...
目的:建立一种长时程的有效获得高度纯化成年大鼠背根节(dorsal root ganglions,DRG)神经元的方法。方法:将SD大鼠的DRG剥膜、消化制成单细胞悬液,牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)分层离心去除大部分非神经元细胞后接种于多聚赖氨酸处理的盖玻片上;培养1 d后,胰酶消化再次制成细胞悬液,BSA二次分层离心,再次接种于多聚赖氨酸处理的盖玻片上。BSA二次分层离心后的神经元为实验一(T1组)、单次离心的神经元为实验组二(T2组)、未经离心处理的神经元为对照组(C组)。各组除离心次数外,其余各方法相同。相差显微镜下观察上述各组培养神经元,结合βtubulinⅢ免疫荧光组化染色及MTT分析检测神经元纯化效果及细胞活力。结果:培养3 d后,T1组神经元比例达88.43±6.13%,较T2组、C组显著增高,差别具有统计学意义(P<0.05);MTT的结果显示与T2组、C组比较,T1组神经元的相对活力略微下降,但无统计学差异(P>0.05)。结论:二次纯化法是一种简单有效的成年大鼠DRG神经元纯化方法。
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关键词
DRG
神经元培养
BSA
离心
纯化
大鼠
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职称材料
题名
二次分层离心纯化成年大鼠背根节神经元的方法
1
作者
赵久红
董栩
张显芳
张海英
谭晓红
张全鹏
黄奕弟
马志健
易西南
机构
海南医学院
人体解剖学教研室
海南医学院神经科学研究所
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期436-440,共5页
基金
国家自然科学基金资助(81130158
81460196)
+1 种基金
海南省自然科学基金(814299)
海南省的教育厅科研项目(Hjkj2013-32)
文摘
目的:建立一种长时程的有效获得高度纯化成年大鼠背根节(dorsal root ganglions,DRG)神经元的方法。方法:将SD大鼠的DRG剥膜、消化制成单细胞悬液,牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)分层离心去除大部分非神经元细胞后接种于多聚赖氨酸处理的盖玻片上;培养1 d后,胰酶消化再次制成细胞悬液,BSA二次分层离心,再次接种于多聚赖氨酸处理的盖玻片上。BSA二次分层离心后的神经元为实验一(T1组)、单次离心的神经元为实验组二(T2组)、未经离心处理的神经元为对照组(C组)。各组除离心次数外,其余各方法相同。相差显微镜下观察上述各组培养神经元,结合βtubulinⅢ免疫荧光组化染色及MTT分析检测神经元纯化效果及细胞活力。结果:培养3 d后,T1组神经元比例达88.43±6.13%,较T2组、C组显著增高,差别具有统计学意义(P<0.05);MTT的结果显示与T2组、C组比较,T1组神经元的相对活力略微下降,但无统计学差异(P>0.05)。结论:二次纯化法是一种简单有效的成年大鼠DRG神经元纯化方法。
关键词
DRG
神经元培养
BSA
离心
纯化
大鼠
Keywords
DRG
neurons culture
BSA
centrifugation
purification
rat
分类号
R338 [医药卫生—人体生理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
二次分层离心纯化成年大鼠背根节神经元的方法
赵久红
董栩
张显芳
张海英
谭晓红
张全鹏
黄奕弟
马志健
易西南
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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