参附注射液辅助治疗对急性心肌梗死大鼠NOD样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1介导的细胞焦亡信号通路以及炎性因子水平的影响

目的探讨参附注射液辅助治疗对急性心肌梗死(AMI)大鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)介导的细胞焦亡信号通路以及炎性因子水平的影响。方法40只大鼠随机分为假手术组、模型组、倍他乐克组(0.9 mg/kg)和联合组(倍他乐克0.9 mg/kg联合参附注射液6 mL/kg),每组10只,连续灌胃3周。检测造模前、造模后和治疗3周时大鼠血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。造模后和治疗3周时,比较各组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)等心脏彩超参数以及心肌梗死面积。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及Western blot检测心肌梗死面积NLRP3、Caspase-1的mRNA及其蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组造模后和治疗3周时cTnI、CK-MB、IL-6、IL-1β、TNF-α、心肌梗死面积、NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,倍他乐克组和联合组治疗3周时cTnI、CK-MB、IL-6、IL-1β、TNF-α、心肌梗死面积、NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA表达量均降低,且联合组上述指标均低于倍他乐克组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参附注射液辅助治疗AMI能够进一步减轻心肌细胞损伤,缩小梗死面积,抑制炎症反应和细胞焦亡活性。

强化阿托伐他汀改善缺血性心力衰竭患者近期疗效及对铁死亡通路蛋白的影响

目的探讨强化阿托伐他汀对缺血性心力衰竭患者的近期疗效及对铁死亡信号通路相关蛋白表达的影响。方法选取2021年1月至2022年10月海南医学院第一附属医院诊断的缺血性心力衰竭患者124例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各62例。对照组采用常规药物和介入治疗,观察组在对照组的基础上强化应用阿托伐他汀治疗。比较2组患者主要不良心血管事件(MACE)发生率、心力衰竭指标、氧化应激指标、血脂指标和铁死亡通路蛋白水平。结果观察组MACE总发生率低于对照组[6.5%(4/62)比19.4%(12/62)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.593,P=0.032)。治疗1个月后,对照组左心室射血分数高于治疗前,B型脑钠肽低于治疗前;观察组左心室射血分数和超氧化物歧化酶均高于治疗前,B型脑钠肽和丙二醛均低于治疗前;观察组超氧化物歧化酶高于对照组,丙二醛低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗1个月后,观察组总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和脂蛋白a水平均低于治疗前,且观察组均低于对照组(均P<0.05)。治疗1个月后,观察组烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和谷胱甘肽水平以及谷胱甘肽过氧化物酶4、醌氧化还原酶1和溶质载体家族7成员11蛋白表达量均高于治疗前,且观察组均高于对照组;非血红素铁水平和NADPH氧化酶2蛋白表达量均低于治疗前,且观察组均低于对照组(均P<0.05)。结论强化应用阿托伐他汀治疗缺血性心力衰竭能够改善近期疗效,这可能与降血脂、抗氧化应激以及抑制铁死亡信号通路的活性表达有关。

骨髓间充质干细胞来源外泌体对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体(Exo)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化的影响,并初步阐明其作用机制。方法:从BMSCs中分离提取Exo,采用透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析仪和Western blotting法对Exo进行分析鉴定。将40只SD大鼠分为对照组、模型组、BMSCs-Exo组和BMSCs-Exo+铁死亡激活剂(Erastin)组,每组10只。除对照组外,其余3组大鼠均皮下注射ISO建立心肌纤维化模型,BMSCs-Exo组和BMSCs-Exo+Erastin组大鼠尾静脉注射BMSCs-Exo,且BMSCs-Exo+Erastin组大鼠再腹腔注射Erastin。4周后,超声心动图检测各组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD), HE染色观察各组大鼠心肌组织病理形态表现,Masson染色观察各组大鼠心肌组织纤维化程度,免疫组织化学染色检测各组大鼠心肌组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)阳性表达率,比色法测定各组大鼠心肌组织中铁离子(Fe^(2+))水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 (ACSL4)、铁蛋白重链1 (FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)和溶质载体家族7成员11 (SLC7A11)蛋白表达水平。结果:从BMSCs中分离的颗粒物具有典型的脂质双分子层,粒径大多分布在波长100 nm处,CD63、CD9、肿瘤易感基因101 (TSG101)和热休克蛋白70 (HSP70)蛋白均高表达,由此判定为Exo。与对照组比较,模型组大鼠LVEF和LVFS明显降低(P<0.05),LVEDD和LVESD明显升高(P<0.05),心肌细胞排列紊乱,部分细胞核皱缩和坏死,胶原容积分数(CVF)明显升高(P<0.05),α-SMA、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ阳性表达率明显升高(P<0.05),心肌组织中Fe^(2+)水平明显升高(P<0.05),ACSL4蛋白表达水平明显升高(P<0.05),FTH1、GPX4和SLC7A11蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,BMSCs-Exo组大鼠LVEF和LVFS明显升高(P<0.05),LVEDD和LVESD明显降低(P<0.05),心肌组织损伤明显减轻,CVF明显降低(P<0.05),α-SMA、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ阳性表达率明显降低(P<0.05),心肌组织中Fe^(2+)水平明显降低(P<0.05),ACSL4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),FTH1、GPX4和SLC7A11蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与BMSCs-Exo组比较,BMSCs-Exo+Erastin组大鼠LVEF和LVFS明显降低(P<0.05)、LVEDD和LVESD明显升高(P<0.05),心肌细胞出现水肿和坏死,CVF明显升高(P<0.05),α-SMA、COL-Ⅰ及COL-Ⅲ阳性表达率明显升高(P<0.05),心肌组织中Fe^(2+)水平明显升高(P<0.05),ACSL4蛋白表达水平明显升高(P<0.05),FTH1、GPX4和SLC7A11蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:BMSCs来源Exo能够改善ISO诱导的大鼠心肌纤维化,该机制可能与抑制铁死亡有关。

稳定型心绞痛患者血清核因子E2相关因子2和激活素A表达与冠状动脉侧支循环形成的相关性研究

目的探究稳定型心绞痛患者血清核因子E2相关因子2(NRF2)和激活素A表达与冠状动脉侧支循环形成的相关性。方法收集海南医学院第一附属医院2021年1月到2023年4月期间住院治疗的80例稳定型心绞痛患者,经造影检查冠状动脉为慢性完全闭塞(CTO)患者作为研究对象,参照Rentrop分级分为侧支循环形成的不良组(n=34)、良好组(n=46)。采用ELISA法检测血清NRF2与激活素A表达水平,Gensisi评分与患者血清NRF2、激活素A表达水平的关系用Spearman法分析,ROC曲线分析血清NRF2、激活素A水平对患者侧支循环形成不良的预测价值。结果不良组血清NRF2、激活素A表达水平及Gensini评分均显著高于良好组[(2.28±0.42)ng/ml比(1.46±0.37)ng/ml、(583.67±61.25)pg/ml比(472.12±54.26)pg/ml、(45.36±5.81)分比(28.49±4.33)分,t=9.251、8.605、14.889,P<0.05];患者血清NRF2、激活素A表达水平与Gensini评分均呈正相关性(均P<0.05);血清NRF2、激活素A联合预测患者冠状动脉侧支循环形成不良的曲线下面积(AUC)为0.974,优于血清NRF2、激活素A各自单独诊断(Z二者联合-NRF2=2.345、Z二者联合-激活素A=2.639,P=0.019、P=0.008)。结论稳定型心绞痛患者血清NRF2、激活素A表达水平显著升高,且与冠状动脉狭窄严重程度呈正相关性,两者联合对患者冠状动脉侧支循环形成不良具有更高的预测价值。

敲低MKL1通过激活自噬流抑制心肌成纤维细胞活化与纤维化表型的作用研究

目的探究敲低巨核细胞白血病因子1(MKL1)对心肌成纤维细胞(CFs)活化与纤维化表型的影响及作用机制。方法选取人CFs,敲低CFs中MKL1表达,检测敲低效果;将CFs分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、shNC+AngⅡ组、shMKL1+AngⅡ组,shNC+AngⅡ组与shMKL1+AngⅡ组分别转染shRNA NC、shRNA MKL1,AngⅡ组、shNC+AngⅡ组及shMKL1+AngⅡ组CFs再使用AngⅡ刺激建立心肌纤维化模型;处理结束后,检测各组CFs增殖活性,测定各组CFs细胞培养上清液中Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)水平,观察各组CFs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,检测各组CFs中α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达水平。观察各组CFs自噬流,检测各组CFs中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白比值、Beclin1蛋白表达水平。结果转染shMKL1的CFs中MKL1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均低于未转染的CFs和转染shNC的CFs(P<0.05);与对照组比较,AngⅡ组同一时间下CFs增殖活性升高(P<0.05),上清液中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ水平升高(P<0.05),CFs中α-SMA荧光染色强度增加,α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白相对表达量上调(P<0.05),自噬溶酶体与自噬体减少,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白比值下降(P<0.05),Beclin1蛋白相对表达量下调(P<0.05);与AngⅡ组、shNC+AngⅡ组比较,shMKL1+AngⅡ组同一时间下CFs增殖活性降低(P<0.05),上清液中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ降低(P<0.05),CFs中α-SMA荧光染色强度减弱,α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白相对表达量下调(P<0.05),CFs中自噬溶酶体与自噬体增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白比值升高(P<0.05),Beclin1蛋白相对表达量上调(P<0.05)。结论敲低MKL1能够抑制CFs活化与心肌纤维化表型,该作用可能与激活细胞内阻滞的自噬流有关。

全反式维甲酸减轻内质网应激反应改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化与心肌重构

目的全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导下大鼠心肌纤维化和心肌重构的影响及作用机制。方法将大鼠按随机数表法分为4组:对照组、ISO组、ATRA+ISO组、4-PBA(4-苯基丁酸,4-phenylbutyric acid)+ISO组,每组10只;ATRA+ISO组和4-PBA+ISO组预先分别通过腹腔注射ATRA与4-PBA,然后再通过背部皮下注射ISO进行诱导。心脏超声检测各组大鼠左心室舒张末期内径(left ventricular internal diameter in diastole,LVIDd)、左心室收缩末期内径(left ventricular internal diameter in systole,LVIDs)、左心室的射血分数(ejection fraction,EF)及短轴缩短率(fractional shortening,FS),称量各组大鼠体重、全心质量及左心室质量,计算全心质量指数(heart mass index,HMI)与左心室质量指数(left ventricle mass index,LVMI)。ELISA测定各组大鼠血清N端B型利钠肽原(N terminal pro B type natriuretic peptide,NT-proBNP)含量。HE染色和Masson染色观察各组大鼠心肌组织病理学变化与胶原纤维化程度。蛋白质印迹检测心肌组织中G蛋白偶联受体78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homology protein,CHOP)、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α(phosphorylated eukaryotic translation initiation factor 2α,p-eIF2α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、胶原蛋白Collagen-Ⅰ及Collagen-Ⅲ的蛋白表达。结果与对照组比较,ISO组大鼠EF和FS显著降低(P<0.05),LVIDd、LVIDs、HMI及LVMI显著升高(P<0.05),血清NTproBNP含量显著增加(P<0.05),心肌组织病理损伤明显,胶原纤维面积显著增加(P<0.05),心肌组织中GRP78、CHOP、PERK、p-eIF2α、TGF-β1、α-SMA、Collagen-Ⅰ及Collagen-Ⅲ蛋白表达均显著上调(P<0.05);与ISO组比较,ATRA+ISO组和4-PBA+ISO组的大鼠EF和FS显著升高(P<0.05),LVIDd、LVIDs、HMI及LVMI显著降低(P<0.05),血清NT-proBNP含量显著减少(P<0.05),心肌组织损伤程度明显减轻,胶原纤维面积显著减小(P<0.05),心肌组织中GRP78、CHOP、PERK、p-eIF2α、TGF-β1、α-SMA、Collagen-Ⅰ及Collagen-Ⅲ蛋白表达均显著下调(P<0.05)。结论ATRA能够减轻ISO诱导的大鼠心肌损伤及其纤维化,抑制心肌重构,改善心功能,该作用与其抑制内质网应激反应有关。

理性情绪行为干预对老年心绞痛合并睡眠障碍患者的影响

目的观察理性情绪行为干预对老年冠心病心绞痛合并睡眠障碍患者睡眠质量的效果。方法选择2021年1月~2022年12月我院的冠心病心绞痛合并睡眠障碍病例120例为观察样本,以随机数字表法划归为60例试验组、60例对照组,对照组按常规护理法施护,试验组于此基础之上引入理性情绪行为干预机制,对两组干预后的各观察指标进行比较。结果试验组患者的心理复原力评分、总体幸福感评分高于对照组,睡眠质量评分低于对照组(P<0.05)。结论在老年冠心病心绞痛合并睡眠障碍患者中引入理性情绪行为干预机制,利于其心理复原力、总体幸福感、睡眠质量的提升。

PNF模式下的呼吸训练对急性心肌梗死患者PCI后心肺功能和运动能力的影响

目的探讨本体感觉神经肌肉促进疗法(PNF)模式下的呼吸训练对急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)后心肺功能和运动能力的影响。方法选取2020年1月—2022年12月在该院治疗的PCI术后患者116例,使用随机数表法分为对照组与PNF组,每组58例。对照组予以常规呼吸训练,PNF组予以PNF模式下的呼吸训练,二组均干预14d。比较二组干预前和干预后左室射血分数(LVEF)、峰值摄氧量(VO_(2)Peak)、第一秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC比值、5次坐立试验(FTSST)和6min步行试验(6MWT)等评估数据。结果干预后,二组FEV1、VO_(2)Peak、和FEV1、FVC和FEV1/FVC水平治疗前相比增高(P<0.05),且PNF组FEV1、VO_(2)Peak、和FEV1、FVC和FEV1/FVC水平高于对照组(P<0.05)。相比对照组,PNF组干预后FTSST降低(P<0.05),6MWT增高(P<0.05)。结论相比常规呼吸训练,PNF模式下呼吸训练能够更好地改善AMI患者PCI术后心肺功能,提高其运动能力。

尼可地尔对急性冠脉综合征PCI患者IL-23/IL-17炎症轴的影响

分析采用经皮冠状动脉介入手术(PCI)的急性冠脉综合症患者服用尼可地尔对白细胞介素-23/白细胞介素-17(IL-23/IL-17)炎症轴产生的影响。方法 随机选取97例2020年1月-2021年12月进行PCI手术的患者,根据患者手术前后是否服用尼可地尔将其分成两组,对照组(n=42)患者不接受尼可地尔治疗,观察组(n=55)患者分手术前后服用尼可地尔,比较两组手术前及手术后24h、手术后72h IL-17、IL-23、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及辅助性T细胞(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平。结果 术前两组IL-17、IL-23水平无显著差异(P>0.05),术后24h、术后72h观察组IL-17、IL-23水平均低于对照组(P<0.05)。术前两组IL-6、IL-1β及TNF-α水平差异不具有统计学意义(P>0.05),术后24h与术后72h IL-6、IL-1β及TNF-α水平更低(P<0.05)。术前两组Th17、Treg、Th17/Treg差异不具有统计学意义(P>0.05),术后24h及术后72h观察组Th17及Th17/Treg低于对照组,Treg水平高于对照组(P<0.05)。结论 采用PCI的急性冠脉综合症患者手术前后服用尼可地尔可有效抑制炎症因子分泌,有助于减轻炎症反应,对于促进患者预后改善有重要意义。