辅助生殖技术供卵法规合理性的伦理学思考

供卵技术主要用于解决不孕不育问题,促进辅助生殖技术的发展,但同时引发一系列伦理法律问题。根据我国供卵的现状及已颁布的法律法规和章程等对供卵技术实施的风险、卵子来源、供/受者条件、增加近亲婚配危险、子代法律地位以及知情权与隐私权的冲突等伦理法律问题进行论述和分析,并认为在供卵技术实施过程中,既要做到供/受卵双方的知情同意,又要严防该技术的商业化。因此,我国应加强供卵技术的伦理规约与法律应对,使这类妇女实现生育愿望的同时,又完全遵循合理的伦理法律原则,保证供卵技术合理开展。

罕见地贫分析和检测研究进展

地贫基因检测技术是实现地贫精准检测的金标准,但临床上大多数仅针对常见基因型进行检测,容易造成罕见地贫基因型的漏诊或误诊。随着检测技术的发展,罕见地贫基因相关报道也越来越多,如何发现并鉴定罕见地贫是临床检测或诊治过程中面临的重要挑战。本文将介绍目前常用的罕见地贫基因检测方法,并对相关罕见型地贫的分析检测进行经验总结,以期为减少临床对罕见地贫的漏诊或误诊提供参考依据。

女性年龄对夫精宫腔内人工授精结局的影响

目的分析不同年龄组促排卵周期夫精宫腔内人工授精(IUI)的临床结局及其影响因素。方法回顾性分析2008年1月至2015年12月期间在海南医学院第一附属医院生殖中心进行促排卵周期IUI治疗的4 228个周期的临床资料,分析临床妊娠率、抱婴率、流产率与女性年龄的关系。结果 IUI临床妊娠率为14.5%(614/4 228),抱婴率为10.1%(429/4 228),流产率为15.5%(95/614);按照女性年龄分为21~25岁组、26~30岁组、31~35岁组、36~38岁组、39~40岁组、>40岁组,各组临床妊娠率依次分别为16.5%(40/242)、16.8%(262/1 559)、14.2%(224/1 578)、13.1%(59/451)、8.9%(18/203)、5.6%(11/195);其抱婴率依次分别为10.3%(25/242)、12.2%(190/1 559)、10.2%(161/1 578)、8.4%(38/451)、4.9%(10/203)、2.6%(5/195);其流产率依次分别为7.5%(3/40)、14.1%(37/262)、13.4%(30/224)、25.4%(15/59)、27.8%(5/18)、45.5%(5/11);各年龄组临床妊娠率、抱婴率、流产率比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);HCG日子宫内膜厚度平均(9.4±2.0)mm,各组的子宫内膜厚度比较差异无统计学意义(P>0.05);各组平均处理后前向运动精子数依次分别是(11.7±12.3)百万、(10.4±10.8)百万、(9.9±9.4)百万、(10.2±10.6)百万、(8.9±10.0)百万,各组比较差异均无统计学意义(P>0.05);各组的不孕年限依次分别为(3.5±1.5)年、(4.3±2.1)年、(5.2±2.7)年、(6.3±3.8)年、(6.3±4.6)年、(6.2±5.2)年;IUI次数依次分别为(1.4±0.6)次、(1.5±0.8)次、(1.6±0.8)次、(1.6±0.8)次、(1.6±0.9)次、(1.7±1.2)次;直径≥14 mm卵泡个数依次分别为(2.8±2.1)个、(2.7±2.1)个、(2.5±1.9)个、(2.5±1.8)个、(2.4±1.6)个、(2.3±1.4)个;不孕年限、IUI次数、直径≥14 mm的卵泡个数总体分布不全相同,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论年龄是影响AIH结局的重要因素,对于年龄较大的患者特别是>40岁者应慎重选择IUI,适当减少IUI次数。

3种内膜准备方案对多次胚胎移植失败患者冻融胚胎移植结局的影响

目的分析自然周期、激素替代周期与降调节后激素替代周期内膜准备方案对多次胚胎移植失败患者冻融胚胎移植结局的影响。方法选取海南省妇幼保健院生殖医学中心与南京医科大学附属苏州医院生殖与遗传中心在2015年12月至2016年12月期间收治的、符合纳入标准的多次胚胎移植失败患者130例,根据内膜准备方案的不同,分为自然组(n=51)、替代组(n=32)、降调节组(n=47)。对样本做回顾性分析并对比患者年龄、解冻胚胎数、不孕年限、移植胚胎数、转化日内膜厚度、雌二醇水平等一般临床资料。在自然周期以及冻融胚胎移植中,对比三组转化日子宫内膜形态,记录并比较三组胚胎着床、早期流产等妊娠结局情况。结果三组患者年龄、解冻胚胎数、不孕年限、移植胚胎数、转化日内膜厚度、雌二醇水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。自然组在自然周期以及冻融胚胎移植中,子宫内膜形态均优于替代组和降调节组(χ~2值分别为11.99、14.88,均P<0.05)。降调节组的妊娠率、胚胎着床率达53.19%(25/47)、61.70%(29/47),均显著高于替代组和自然组(χ~2值分别为9.80、11.80,均P<0.05),但三组早期流产率无明显差异(χ~2=3.51,P>0.05)。结论降调节后激素替代周期能够有效提高多次胚胎移植失败患者的妊娠率和胚胎着床率。对于子宫内膜形态有缺陷或状态欠佳的患者,选择降调节后激素替代周期为佳。

供卵者BMI影响受卵IVF/ICSI-ET妊娠结局

目的探讨受卵IVF/ICSI-ET周期临床妊娠率的影响因素。方法回顾性分析海南医学院第一附属医院生殖中心2010年1月至2015年12月期间符合纳入标准的450例受卵IVF/ICSI-ET周期的临床资料,并根据供卵者年龄、供卵者体重指数(BMI)水平、受卵者年龄、受卵者BMI水平、受卵者内膜类型和授精方式进行分组,采用多因素逻辑回归分析法分析受卵者IVF/ICSI-ET周期临床妊娠率的影响因素。结果供卵者的年龄、受卵者可利用胚胎数和供卵者BMI均显著影响受卵者IVF/ICSI-ET周期的临床妊娠率(P<0.05),其中供卵者年龄是最主要的影响因素(P=0.000)。供卵者的年龄每增加1岁,受卵者的临床妊娠率将下降13.7%;受卵者可利用胚胎数(≤3个)每增加1个,受卵者的临床妊娠率将增加54.3%;供卵者的BMI每增加1kg/m^2,受卵者的临床妊娠率将下降5.5%。结论供卵者的年龄、受卵者可利用胚胎数和供卵者BMI是影响受卵者IVF/ICSI-ET周期临床妊娠率的因素。

封闭抗体水平与复发性流产相关性的Meta分析

目的系统评价封闭抗体水平与复发性流产的相关性。方法计算机检索Pub Med、EMbase、CNKI、CBM、Wan Fang Data和VIP数据库,搜集封闭抗体水平与复发性流产相关性的病例-对照研究,检索时限均从建库至2017年5月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入12个病例-对照研究,包括3 413例研究对象。Meta分析结果显示:封闭抗体阴性与复发性流产的发生具有相关性,其差异具有统计学意义[OR=6.10,95%CI(2.40,15.51),P=0.000 1]。结论当前证据表明,封闭抗体缺乏是复发性流产的危险因素之一。受纳入研究数量和质量的限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。

处理后前向运动精子总数对夫精宫腔内人工授精结局的影响

目的研究处理后前向运动精子总数(TPMSC)对促排卵周期夫精宫腔内人工授精(IUI)的临床结局的影响。方法回顾性分析行促排卵周期IUI治疗的4 179例患者的临床资料,分析临床妊娠率与处理后TPMSC的关系。结果所有患者的临床资料中TPMSC偶见活精至100×10~6。TPMSC<0.15×10~6有15例,有1例妊娠(IUI日精液处理后偶见活精);TPMSC>60×10~6有10例,均未妊娠。对TPMSC(0.15~60.00)×10~6的共4 154例病例进行分析。各组女性年龄、不孕年限、卵泡数、子宫内膜厚度的比较差异无统计学意义(P>0.05)。临床妊娠率为13.5%(576/4 154),最高的组为(5.00~<10.00)×10~6(16.0%),各组的临床妊娠率比较差异无统计学意义(P=0.133)。结论处理后TPMSC在(0.15~60.00)×10~6行IUI均可达到较好的妊娠率。

尼莫地平联合硫酸镁对中重度妊娠期高血压孕妇的临床研究

目的观察尼莫地平联合硫酸镁对中重度妊娠期高血压疾病孕妇血清和肽素、皮质醇的影响。方法选取中重度妊娠期高血压孕妇78例,随机分为试验组和对照组,各39例。对照组给予25%硫酸镁注射液60 m L+葡萄糖500m L,静脉滴注,每天1次;试验组在对照组的基础上给予尼莫地平片35 mg,每天2次,持续治疗至分娩。治疗前后收集血液标本测定血清和肽素、皮质醇、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)浓度,比较2组患者的临床疗效,记录2组孕产妇妊娠结局和药物不良发应发生情况。结果治疗后,对照组有效率为76. 92%(30例/39例),试验组为94. 87%(37例/39例),差异有统计学意义(P <0. 05)。试验组顺产率为61. 54%(24例/39例),对照组为38. 46%(15例/39例),差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗后,对照组和试验组血清皮质醇分别为(310. 36±30. 18),(281. 20±27. 45) nmol·L^(-1),血清和肽素分别为(1. 97±0. 61),(1. 48±0. 59)μg·L^(-1),血清ET-1分别为(73. 51±12. 26),(54. 17±11. 09) ng·L^(-1),血清NO分别为(714. 53±86. 67),(924. 55±102. 34)nmol·L^(-1),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。对照组并发症发生率为35. 90%(14例/39例),试验组为发生率12. 82%(5例/39例),差异有统计学意义(P <0. 05)。结论尼莫地平与硫酸镁联用有助于改善中重度妊娠期高血压孕妇的妊娠结局,降低血清和肽素、皮质醇浓度,改善血管内皮功能,安全性高。

肥胖型和瘦型PCOS与酶类抗氧化剂和内分泌代谢指标的相关性分析

目的研究肥胖型和瘦型多囊卵巢综合征(PCOS)与酶类抗氧化剂和内分泌代谢指标的相关性。方法采用随机法选取该院2014-2016年确诊为肥胖型PCOS患者50例作为肥胖型组、瘦型PCOS患者50例作为瘦型组,并分别检测和分析两组的酶类抗氧化剂(包括SOD、CAT、GPX、INS)以及各种内分泌代谢指标和其相关性。结果瘦型组的PRL、E1、FSH、INS、SOD以及血脂4项均低于肥胖型组(P<0.05);瘦型组和肥胖型组的T、FSH均与SOD呈正相关关系,瘦型组的SOD与INS呈正相关关系,CAT与TC呈正相关关系;肥胖型组的CAT与SHBG、E1、E2、PRL、INS以及血脂4项呈正相关关系,SOD与SHBG、E1、E2、PRL、TC、TG、HOMA呈正相关关系。结论 PCOS患者本身会存在酶类抗氧化应激反应,且这种反应与PCOS患者拥有的无排卵现象以及高雄激素血症有着密切的联系,而且肥胖型PCOS的这种反应同时还会出现在内分泌代谢方面,但是瘦型PCOS的这种反应仅仅与胰岛素抵抗有密切的联系。

微阵列比较基因组杂交技术诊断产前超声检查异常胎儿染色体变异的价值

目的探讨微阵列比较基因组杂交(a CGH)技术对产前超声检查异常胎儿染色体变异的诊断价值。方法选取2013年2月-2014年6月收治的16例产前超声异常孕妇,抽取的羊水样本经常规G显带染色体分析后应用aCGH技术进行染色体变异分析。结果 1~14号羊水样本a CGH分析未见143个疾病相关位点染色体拷贝数的增加/缺失(>100 Kb),全基因组筛查未见染色体拷贝数增加/缺失(>1 Mb);15号羊水样本的9号染色体9p13.3~9p21.11区域35.8 Mb拷贝数增加,该区域拷贝数增加与神经系统发育异常、自闭症等有关;16号羊水样本的2号染色体2p25.3~2p23.1区域30.7Mb拷贝数增加,该区域拷贝数增加与生长发育迟缓及其他结构畸形有关。结论利用a CGH技术可以快速地分析和鉴定染色体微缺失或微重复变异,与常规G显带染色体核型分析互为补充,有利于提高胎儿超声异常的产前诊断效率。

睾丸与附睾精子对梗阻性无精子症ICSI助孕结局的影响

目的比较睾丸精子与附睾精子对梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)患者行卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗结局的影响。方法收集2014年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心因梗阻性无精子症行ICSI助孕治疗患者的临床资料,共163个周期。根据精子来源分为两组,TESA组:采用睾丸精子抽吸术(testicular sperm aspiration,TESA)取精,共137个周期;PESA组:采用经皮附睾精子抽吸术(percutaneous epididymal sperm aspiration,PESA)取精,共26个周期。比较两组的正常受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、胚胎种植率、临床妊娠率、流产率及活产率之间有无差异。结果 TESA组的胚胎种植率、临床妊娠率及活产率高于PESA组,但差异均无统计学意义(P>0.05);TESA组的正常受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率及流产率均低于PESA组,但差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论对梗阻性无精子症患者,睾丸精子和附睾精子ICSI后可达到相似的助孕结局。

男性年龄对非男性不育夫妇IVF妊娠结局的影响

目的探讨男性年龄对非男性不育夫妇行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗妊娠结局有无影响。方法收集2015年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心因女方输卵管因素进行IVF助孕治疗且女方年龄小于35岁患者的临床资料,共658个周期。根据男方年龄分为4组:A组(<35岁)、B组(35~39岁)、C组(40~44岁)和D组(≥45岁),分别比较各组间的受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、种植率、临床妊娠率、流产率及活产率,分析各指标之间有无差异。结果 C组临床妊娠率均低于其它3组,差异有统计学意义(P<0.05),其它指标在各组间的差异均无统计学意义。结论在非男性不育夫妇中,男性年龄对辅助生殖技术临床妊娠率可能存在负面影响,但不影响最终的活产率。

双酚A对人早孕绒毛滋养细胞IGF-I及ADAM12表达的影响

目的探讨对人早孕绒毛滋养细胞采用不同浓度双酚A(BPA)干扰,对其胰岛素样生长因子I(IGF-I)及解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)表达的影响。方法取海南医学院妇产科门诊人流室一名自然妊娠早孕50 d孕妇的新鲜绒毛组织制备绒毛滋养细胞(孕妇知情同意,并经医院伦理委员会批准),配制4组含不同浓度BPA的培养液(A组:1×10^-4g/L,B组:1×10^-5g/L,C组:1×10^-6g/L,D组:1×10^-7g/L),并设培养基(E组:BPA 0 g/L)为对照组,进行滋养细胞培养,72 h后收取滋养细胞行实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)实验,检测不同浓度BPA条件下IGF-I、ADAM12 mRNA表达量的变化。结果各实验组中ADAM12、IGF-I mRNA的表达受BPA的影响,均有不同程度升高。当BPA浓度为1×10^-5g/L(B组)时,IGF-I mRNA的表达明显升高,是C组的3.18倍(P<0.01),是对照组E组的5.48倍(P<0.01);ADAM12 mRNA的表达量明显上升,是C组的4.19倍(P<0.01),是对照组E组的6.27倍(P<0.01)。结论 BPA对绒毛滋养细胞的IGF-I和ADAM12的mRNA表达有刺激升高的作用。

环孢素A对围着床胚胎的作用及在不明原因反复着床失败中的应用探索

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)中胚胎可能着床失败,但反复着床失败(recurrent implantation failure,RIF)特别是原因不明会给医生和患者带来极大的困扰.RIF只是一种对治疗经历的描述,作为诊断,目前尚未达成统一的标准.胚胎着床失败的原因源于胚胎、子宫内膜容受性和胚胎-子宫内膜同步等因素.如何改善胚胎因素成为当今关注的焦点.

一例世界首报涉及四种染色体嵌合体核型的产前诊断病例分析

46,XY,del(1)(q32q42)/47,XY,+15/46,XY,del(1)(q32q42),t(1;18)(p12;p11)/46,XY,该核型为国内、外文献未曾报道的新核型。嵌合体是一种极为罕见的异常染色体核型,它的形成可能是染色体不分离,染色体丢失,染色体复制以及在染色体断裂和变位重排的基础上产生的各种染色体数目和结构畸变,不分离或分配异常是发生在受精卵的早期卵裂过程中时,形成的各种染色体数目和结构畸变的嵌合体细胞核型个体[1]。本文为了鉴别此例复杂嵌合体是否为真性嵌合体,回顾性地分析该病例的羊水、脐血以及心腔血的核型结果。

高效液相色谱和血细胞分析技术诊断地中海贫血和异常血红蛋白病的价值比较

目的分析并比较高效液相色谱和血细胞分析技术诊断地中海贫血和异常血红蛋白病的价值。方法选取2017年1月-2018年5月463例地中海贫血及异常血红蛋白病患儿,分为α地中海贫血组(157例)、β地中海贫血组(206例)、αβ复合型地中海贫血组(100例)。比较高效液相色谱和血细胞分析技术的诊断准确率和满意度。结果高效液相色谱技术的诊断准确率和满意度高于血细胞分析技术(P<0.05)。结论高效液相色谱和血细胞分析技术对地中海贫血及异常血红蛋白病的诊断价值较高,但高效液相色谱技术的诊断准确率更高,临床效果更好。

博洛尼亚标准卵巢低反应者在促排卵体外受精/卵胞质内单精子注射周期中的卵巢反应性

目的了解博洛尼亚标准卵巢低反应者在促排卵体外受精/卵胞质内单精子注射(IVF/ICSI)周期中的卵巢反应性。方法本回顾性研究2011年1月—2016年12月期间于本院行常规促排卵IVF/ICSI,符合博洛尼亚标准的所有卵巢低反应(POR)患者,并分析这些患者在促排卵周期中出现POR的情况。结果年龄≥40岁且窦卵泡数(AFC)<5的患者在首次促排卵IVF/ICSI周期中低反应的发生率为98.7%(75/76),这些患者在后续促排卵周期中低反应的发生率明显下降。首次促排卵周期低反应且年龄≥40岁的患者,第二周期促排卵出现低反应的几率为67.2%(45/67)。首次促排卵周期低反应且AFC<5的患者,第二周期促排卵出现低反应的几率为69.5%(57/82)。两次大剂量促排卵周期(促性腺激素用量每日至少450 IU)均出现低反应的患者,再次促排卵发生低反应的几率为71.4%(10/14)。结论博洛尼亚标准中"预期的卵巢低反应者"在首次促排卵IVF/ICSI周期出现低反应的可能性极大,我们应该给予足够的重视,制定个性化的促排卵方案以改善患者的卵巢反应性。有过低反应史的博洛尼亚标准卵巢低反应者,也不应该放弃再次促排卵的机会,因为很大一部分患者在后续的促排卵周期中不再出现低反应。

不孕症诊断指南

不孕症是1种低生育力状态,严重危害育龄期女性的生殖健康,指1对配偶未采取避孕措施,有规律性生活至少12个月未能获得临床妊娠。广义的不孕症包括不能妊娠和不能获得活产两个方面,本指南仅包括不能妊娠的相关内容。本指南是由中华医学会妇产科学分会妇科内分泌学组参考WHO、美国生殖医学学会(ASRM)、英国国家卫生和临床医疗优选研究所(NICE)的相关指南,并结合我国临床实践现状,经全国各级医疗机构专家函审最终制定,适用于全国各级各类医疗机构妇产科及男科执业医师对不孕症的诊断。

环孢素A改善滋养细胞轻度受损小鼠囊胚的着床

目的探讨环孢素A(cyclosporin A,CsA)是否可以改善滋养细胞轻度受损的小鼠胚胎的着床。方法①将30只ICR小鼠腹腔注射CsA 5 mg/kg,采用化学发光法检测注射后1 h、3 h、4 h、6 h、8 h、10 h、13 h、14 h、16 h、20 h鼠体内CsA血药浓度变化情况;②将36只小鼠随机分为对照组和实验组,实验组腹腔注射CsA 5 mg/kg,对照组相同体质量下注射同等剂量橄榄油,根据Gardner评分结合实验需要将移植胚胎分为A、B、C三类,分类后胚胎分别移植至两组小鼠子宫,于交配后(days postcoitum,dpc)5.5 d时采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠胚胎着床率及着床部位白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)mRNA的表达情况。结果①小鼠体内CsA血药浓度在给药后6~10 h达到高峰;②B类胚胎在实验组小鼠中着床率[73.9%(34/46)]高于对照组[50.0%(23/46),P=0.018];③两组小鼠着床部位LIF mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论CsA给药剂量为5 mg/kg时,CsA可以改善滋养细胞形态上存在轻度受损的小鼠胚胎的着床;CsA可能成为提高IVF成功率的潜在药物。

人巨细胞病毒感染与不明原因反复胚胎种植失败患者Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的关系

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与不明原因反复胚胎种植失败(RIF)患者辅助性T细胞(Th)1/Th2、Th17/调节性T细胞(Treg)型细胞因子表达水平的关系。方法选择2018年1月-2020年1月海南现代妇女儿童医院生殖医学科收治接受IVF-ET助孕的不明原因RIF患者100例作为RIF组,均采用酶联免疫试验法测定HCMV-IgM、HCMV-IgG抗体情况,实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定外周血单个核细胞Th17、Treg相关细胞因子ROR-γt、Foxp3 mRNA表达,采血应用酶联免疫法测定白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,计算IFN-γ/IL-10、IL-17/TGF-β1比值,与同期收治移植后成功妊娠女性30例(成功组)进行对照,比较两组上述参数的差别;RIF组按是否发生HCMV感染分为感染组与非感染组,比较感染组与非感染组Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的差异,探究HCMV感染与RIF患者Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的关系。结果RIF组HCMV阳性率29.00%高于成功组3.33%(P<0.05);RIF组外周血单个核细胞ROR-γt高于成功组,血IL-17、IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、IL-17/TGF-β1比值高于成功组(P<0.05),Foxp3 mRNA及TGF-β1低于成功组(P<0.05);感染组ROR-γt mRNA、IL-17、IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、IL-17/TGF-β1比值高于非感染组(P<0.05),Foxp3 mRNA、IL-10和TGF-β1低于非感染组(P<0.05);HCMV阳性率与Th1/Th2、Th17/Treg均呈正相关(r=0.595、0.640,P<0.05)。结论不明原因RIF患者HCMV活动性感染率较高,伴HCMV感染患者Th1/Th2、Th17/Treg比值更高,向Th1、Th17免疫漂移更明显,整体免疫抑制程度更高,可能是造成胚胎移植排斥的重要原因。