成骨细胞来源的外泌体介导微小RNA-494影响骨质疏松症大鼠骨代谢与骨重建平衡

目的探讨成骨细胞来源的外泌体(Exo)中微小RNA(miR)-494对骨质疏松症(OP)大鼠骨代谢与骨重建平衡的影响及其机制。方法从MC3T3-E1成骨细胞系中分离鉴定Exo,并将miR-494电转至Exo,Real-time PCR测定miR-494表达水平。40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-494模拟剂(miR-494)组和miR-494抑制剂组,每组10只。除对照组外,其余3组大鼠切除卵巢构建OP模型。模型制作成功后,miR-494组与miR-494抑制剂组分别接受含相应miRNA的Exo尾静脉注射,剂量为3×10^(9)个微粒。4周后,Micro-CT检测各组大鼠的骨参数,ELISA测定血清骨标志物,HE染色观察骨组织病理变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色检测破骨细胞数量,Western blotting测定骨重建相关蛋白及Toll样受体4(TLR4)相关通路蛋白表达水平。结果成功从MC3T3-E1细胞中分离得到典型杯状或圆形,直径约100 nm的Exo,其含有CD63、CD9、肿瘤易感性基因101(TSG101)、热休克蛋白70(HSP70)蛋白,且能被MC3T3-E1细胞摄取。经电转处理后,miR-494模拟剂和miR-494抑制剂的Exo中miR-494的相对表达量明显升高和降低(P<0.05)。与模型组相比,miR-494组大鼠骨参数降低,血清骨标志物骨钙蛋白(BGP)、TRACP、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)升高,骨保护蛋白(OPG)、Ⅰ型前胶原N端肽(PⅠNP)降低,骨小梁结构紊乱,破骨细胞增加,骨组织内骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(RUNX2)下调,核因子κB受体激活剂配体(RANKL)上调,TLR4、核因子κB(NF-κB)p65及髓样分化主要响应蛋白88(MyD88)上调(P<0.05)。而miR-494抑制剂组情况则相反,骨参数和OPG、PⅠNP升高,BGP、TRACP、CTX-Ⅰ降低,骨结构恢复正常,破骨细胞减少,骨组织内BMP-2、RUNX2上调,RANKL下调,TLR4、NF-κB p65及MyD88下调(均P<0.05)。结论Exo传递miR-494可加重OP大鼠骨代谢异常,并抑制骨重建平衡,推测其作用机制可能与调控TLR4通路有关。

高糖环境下成骨细胞PAD4表达和转录调控对成骨功能的影响

目的:探究高糖环境下成骨细胞中肽基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)表达和转录调控对成骨细胞的作用及其相关机制。方法:分别使用正常(2 g/L)和高糖(4 g/L)培养基培养hFOB1.19成骨细胞,分为正常组和高糖组;并在高糖环境下通过慢病毒将sh-PAD4和sh-NC转染至hFOB1.19成骨细胞,分为sh-PAD4组和sh-NC组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(western blotting)检测各组细胞PAD4、H3cit、NFAT2、OCN和ALP表达,染色质免疫共沉淀PCR技术(ChIP-qPCR)检测PAD4、H3cit、H3K27ac在NFAT2、OCN和ALP转录起始位点(TSS)的富集,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖水平,茜素红S染色法测定细胞矿化能力。结果:与正常组比较,高糖组PAD4、H3cit、NFAT2、OCN和ALP表达升高,PAD4、H3cit、H3K27ac在NFAT2、OCN和ALP TSS富集水平增加,细胞增殖水平和矿化能力升高(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-PAD4组PAD4、H3cit、NFAT2、OCN和ALP表达降低,PAD4、H3cit、H3K27ac在NFAT2、OCN和ALP TSS富集水平降低,细胞增殖水平和矿化能力降低(P<0.05)。结论:高糖环境下PAD4及其介导的H3cit表达增加,后者在NFAT2、OCN和ALP TSS富集,促进成骨相关基因表达、成骨细胞增殖和分化。

闭合复位弹性髓内钉与克氏针髓内固定治疗儿童前臂双骨折的临床疗效

儿童前臂双骨折是临床上较为常见的骨折类型之一,该骨折类型的好发年龄段为3~12岁,约占儿童骨折的3%~6%[1]。儿童不稳定的前臂双骨折一般需要手术治疗,常用的髓内固定材料有克氏针或者弹性髓内钉。两种术式各有优劣,为了探讨两者的差异,本研究回顾性分析2018年1月—2022年12月海南医学院第二附属医院。

唑来膦酸联合依降钙素对骨质疏松骨折患者术后骨痛及骨折愈合的影响

目的分析唑来膦酸联合依降钙素对骨质疏松骨折患者术后骨痛及骨折愈合的影响。方法选择2020年4月至2021年6月间收治于本院的100例骨质疏松骨折术后患者作为研究对象,对照组(50例)采用唑来膦酸5 mg治疗,试验组(50例)采用唑来膦酸5 mg联合依降钙素10 U治疗,评估2组患者的临床疗效、视觉模拟评分法(VAS)及Oswestry功能障碍指数(ODI),检测2组患者的骨密度及骨折愈合指标。结果治疗后,试验组患者的总有效率(96.00%)明显高于对照组(80.00%);试验组患者的股骨颈、腰椎的骨密度分别为(0.94±0.12)和(0.91±0.10)g·cm^(-3),对照组患者的股骨颈、腰椎的骨密度分别为(0.82±0.12)和(0.81±0.08)g·cm^(-3);试验组患者的血清碱性磷酸酶(ALP)、胰岛素样生长因子(IGF)、I型前胶原羧基端肽(PICP)和骨钙素(OC)水平分别为(5.47±0.81)%、(8.21±1.24)μg·L^(-1)、(143.77±6.68)mg·L^(-1)和(20.48±3.21)ng·mL^(-1),对照组患者的血清ALP、IGF、PICP和OC水平分别为(4.89±0.89)%、(5.99±1.56)μg·L^(-1)、(133.04±7.58)mg·L^(-1)和(18.43±3.26)ng·mL^(-1)。治疗后9个月,试验组和对照组患者的VAS评分分别为(0.33±0.17)和(0.41±0.10)分;试验组和对照组患者的ODI评分分别为(18.08±1.69)和(21.88±2.10)分。上述指标,试验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组患者的不良反应总发生率(6.00%)稍高于对照组(4.00%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论唑来膦酸联合依降钙素可有效缓解骨质疏松骨折患者术后骨痛及功能障碍情况,安全性较高,具有一定的临床应用价值。