晶状体超声乳化联合不同术式治疗闭角型青光眼合并白内障的效果比较

目的:探讨晶状体超声乳化联合不同术式治疗原发性闭角型青光眼(primary angle closure glaucoma,PACG)合并白内障的疗效及其对并发症的影响。方法:回顾性分析海南医学院第二附属医院2020年1月至2021年12月收治的88例PAGG合并白内障患者。行晶状体超声乳化(phacoemulsification,Phaco)联合房角分离术的患者为观察组(n=42);行Phaco联合小梁切除术的患者为对照组(n=46)。比较2组术前及术后6个月眼压、前房深度、前房角度变化及中文版视觉相关生存质量量表(the Chinese version Vision-Related Quality of Life Questionnaire-25,CVRQol-25)评分,并对2组进行疗效比较。结果:与术前相比,术后6个月2组眼压均显著降低(均P<0.05),前房深度和前房角度均显著增高(均P<0.05)。与对照组相比,观察组前房角度、前房深度均明显增大(均P<0.05);2组眼压对比差异无统计学意义(P>0.05)。观察组视力提高率为88.10%,稍高于对照组的78.26%,但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组手术相关并发症发生率为9.52%,相比对照组的26.09%显著降低(P<0.05)。术后6个月,观察组CVRQoL-25评分显著高于对照组(P<0.05)。结论:Phaco联合房角分离术治疗PAGG合并白内障能有效降低眼压,改善视力,相比Phaco联合小梁切除术并发症较少,且能改善患者视觉相关的生存质量。

雷珠单抗辅助视网膜激光光凝治疗糖尿病视网膜病变伴玻璃体积血的疗效及对患者视力和HbA1c、mAlb水平的影响

目的:探讨雷珠单抗辅助视网膜激光光凝治疗糖尿病视网膜病变(DR)伴玻璃体积血(VH)的疗效,以及对患者视力和糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量白蛋白(mAlb)水平的影响。方法:选取医院眼科收治的80例DR伴VH患者,采用抽签随机分为观察组和对照组,每组40例,对照组采用视网膜激光光凝术治疗,观察组在视网膜激光光凝术前注射雷珠单抗治疗。比较两组临床疗效,手术前后最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中心凹厚度(CMT)以及HbA1c和mAlb水平;比较两组术后并发症发生率及复发率。结果:观察组临床治疗总有效率为90.00%,显著高于对照组的70.00%,差异有统计学意义(x^(2)=5.001,P<0.05)。两组术后1个月、3个月及6个月时的BCVA均好于术前,且观察组好于对照组,差异有统计学意义(t=7.481,t=8.990,t=9.588;P<0.05)。两组术后1个月、3个月和6个月时的CMT均低于同组术前,术后3个月、6个月时的CMT低于术后1个月,且观察组术后1个月、3个月和6个月时的CMT均低于对照组术后同时段,差异有统计学意义(t=9.373,t=3.977,t=4.651;P<0.05)。两组术后6个月时的HbA1c、mAlb水平均低于术前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(t=3.374,t=2.049;P<0.05)。两组术后并发症发生率比较,差异无统计学意义。观察组术后复发率(2.50%)低于对照组(15.00%),差异有统计学意义(x^(2)=0.048,P<0.05)。结论:雷珠单抗辅助治疗DR伴VH临床疗效好,可显著提高患者术后视力,降低术后HbA1c和mAlb水平。

环状RNA KMT2E靶向miR-204-5p/MMP9轴对高糖条件下人晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的探究环状RNA KMT2E(circ KMT2E)对高糖(HG)诱导的人晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的影响及调控机制。方法收集自2018年12月至2020年11月在海南医学院第二附属医院眼科中心进行白内障手术的33例非糖尿病性白内障(DC)患者和33例DC患者的晶状体前囊膜,TUNEL法检测晶状体前囊膜上LEC凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测晶状体前囊膜中circ KMT2E、miR-204-5p和基质金属蛋白酶(MMP)9 mRNA表达水平,采用Pearson法分析circ KMT2E、miR-204-5p和MMP9 mRNA表达水平的相关性。取人晶状体上皮细胞系(HLE-B3),CCK-8法筛选最佳HG浓度及作用时间;将HLE-B3细胞分为对照组、HG组、沉默对照组、KMT2E沉默组、过表达对照组、KMT2E过表达组、KMT2E过表达+miR-NC组、KMT2E过表达+miR-204-5p模拟物组,转染后将HLE-B3细胞用HG处理24 h。RT-qPCR检测各组细胞中circ KMT2E、miR-204-5p和MMP9 mRNA表达水平,验证转染效果;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测细胞中MMP9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase)-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测circ KMT2E与miR-204-5p的靶向关系。结果与非DC患者相比,DC患者晶状体前囊膜中LEC凋亡、circ KMT2E、MMP9 mRNA表达水平显著升高,miR-204-5p水平显著降低(P<0.05);Pearson相关分析显示,DC患者晶状体前囊膜中circ KMT2E与miR-204-5p呈负相关,MMP9与miR-204-5p呈负相关,MMP9与circ KMT2E呈正相关。200 mmol/L葡萄糖作用24 h时可显著抑制HLE-B3细胞活力(P<0.05)。转染后,与对照组相比,HG组细胞中circ KMT2E、MMP9 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达显著升高,miR-204-5p水平、细胞活力、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);与HG组相比,KMT2E沉默组细胞中circ KMT2E、MMP9 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低,miR-204-5p水平、细胞活力、Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),KMT2E过表达组上述指标变化则表现出相反的作用(P<0.05);在过表达KMT2E的基础上,上调miR-204-5p,可降低MMP-9表达,明显逆转circ KMT2E过表达对HLE-B3细胞凋亡的影响。双荧光素酶报告基因检测结果显示,转染miR-204-5p mimic后,KMT2E-WT细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。结论沉默circ KMT2E可能通过靶向上调miR-204-5p,进而抑制MMP9的表达,减少HG诱导的人LEC凋亡。

长链非编码RNA-TUG1调控小梁网细胞内质网应激和炎症的小鼠实验研究

目的观察长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(Lnc-TUG1)对小梁网细胞内质网应激及其主要标志物的影响,并探讨Lnc-TUG1在小梁网功能障碍、细胞凋亡中所起的作用。方法选取C57BL/6J小鼠48只,随机数字表法分为两组,AAV2-Lnc-TUG1组(24只,24眼)单眼前房注射Lnc-TUG1过表达腺病毒,AAV2-GFP组(24只,24眼)单眼前房注射GFP腺病毒。在注射后的不同时间点,分别取AAV2-GFP组和AAV2-Lnc-TUG1组小鼠的前房角组织,用冰冻切片和免疫荧光染色法观察病毒荧光及内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;荧光原位杂交法观察Lnc-TUG1的表达和定位。用实时荧光定量PCR法检测炎症因子白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6以及内皮细胞白细胞黏附分子1(ELAM-1)在mRNA水平的表达;用TUNEL染色法观察小梁网细胞的凋亡情况;用超薄切片和透射电镜观察小梁网细胞的超微结构。在注射前及注射后3、7、10、13 d分别用回弹式眼压计测量小鼠的日间及夜间眼压。结果Lnc-TUG1过表达腺病毒在注射后24 h即可观察到注射眼小梁网内的病毒荧光,且AAV2-Lnc-TUG1组的小梁网Lnc-TUG1的表达明显高于AAV2-GFP组,差异有统计学意义(P<0.05)。在注射后3 d,AAV2-Lnc-TUG1组小梁网组织的IL-1α、IL-1β、IL-6、ELAM-1在mRNA水平的表达明显高于AAV2-GFP组,差异有统计学意义(P<0.05)。注射后7 d,与AAV2-GFP组比,AAV2-GFP组和AAV2-Lnc-TUG1组小梁网组织CHOP的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),且小梁网TUNEL阳性细胞数显著增加,小梁网细胞内可见明显扩张的粗面内质网。在注射后7、10、13 d,AAV2-Lnc-TUG1组日间眼压及夜间眼压均高于AAV2-GFP组,但仅术后7 d的差异有统计学意义(P<0.05)。结论单眼前房注射Lnc-TUG1过表达腺病毒可通过上调Lnc-TUG1的表达增加小鼠眼压,并促进小梁网细胞的内质网应激、炎症和细胞凋亡。

单侧湿性年龄相关性黄斑变性患者患眼黄斑区GCIPL厚度变化及其与血清IL-8水平的关系

目的 探讨单侧湿性年龄相关性黄斑变性(wetAMD)患者患眼黄斑区神经节细胞-内丛状层(GCIPL)厚度变化及其与血清白细胞介素(IL)-8水平的关系。方法 选取单侧wetAMD患者(wetAMD组)120例,根据荧光素眼底血管造影和吲哚菁绿血管造影检查结果将其分为单侧典型脉络膜新生血管(tCNV)组(45例)以及单侧息肉样脉络膜血管病变(PCV)组(75例)。另选取门诊健康体检眼科检查正常者75例(75眼)作为正常对照组。收集3组受试者的一般资料,并检测研究眼GCIPL厚度参数和血清IL-8水平,比较3组间上述指标的差异。分析GCIPL厚度与血清IL-8水平和wetAMD的关系及其诊断价值。结果 wetAMD组的吸烟比例、伴糖尿病比例以及血清IL-8水平高于对照组,而wetAMD组GCIPL厚度的各测量值均小于正常对照组(均P<0.05)。tCNV组的年龄、吸烟比例、伴糖尿病比例以及血清IL-8水平高于PCV组,而tCNV组GCIPL厚度的各测量值均小于PCV组(均P<0.05)。wetAMD患者患眼GCIPL厚度的各测量值均与血清IL-8水平呈显著负相关(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟、糖尿病、平均GCIPL厚度值降低和血清IL-8水平升高是wetAMD发病的危险因素;糖尿病、平均GCIPL厚度值降低和血清IL-8水平升高是wetAMD患者发生tCNV的危险因素(均P<0.05)。平均GCIPL厚度诊断wetAMD的受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.775(95%CI:0.710~0.832),当临界值取75.60μm时,敏感度为63.33%,特异度为81.33%。平均GCIPL厚度诊断tCNV的AUC为0.765(95%CI:0.678~0.837),当临界值取70.20μm时,敏感度为64.44%,特异度为82.62%。结论 wetAMD患者患眼GCIPL厚度值异常降低,且与血清IL-8水平升高有关,其对诊断wetAMD和tCNV具有一定辅助价值。

舒洛地特对大鼠糖尿病视网膜病变的修复及MAPK通路的调节作用

目的 探讨舒洛地特对大鼠糖尿病视网膜病变的修复及MAPK通路的调节作用。方法 72只大鼠随机分为正常对照组、糖尿病视网膜病变组、舒洛地特低、中、高剂量组及盐酸二甲双胍组,12只/组;除正常对照组外,其余大鼠均腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病视网膜病变大鼠模型;舒洛地特低、中、高剂量组分别灌胃给予10 mg/kg、 20 mg/kg、40 mg/kg舒洛地特,盐酸二甲双胍组给予200 mg/kg盐酸二甲双胍,1次/d,给药12周。检测大鼠空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平,以及血清晚期糖基化终末产物(AGEs)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-1β水平,以及视网膜组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、葡萄糖转运蛋白3(GLUT-3)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;Western blotting及免疫组织化学检查视网膜p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)水平;HE染色法检查视网膜病理学变化及神经节细胞计数。结果 与糖尿病视网膜病变组比较,舒洛地特各剂量组大鼠FBG及HbA1c水平、血清AGEs、IL-6、IL-1β水平、视网膜组织GLUT-1、GLUT-3、MDA水平,p38 MAPK、p-p38 MAPK/p38 MAPK水平及免疫组织化学积分吸光度均显著降低(P<0.05),视网膜组织SOD水平及神经节细胞数均显著升高(P<0.05)。结论 舒洛地特能够调节糖尿病视网膜病变大鼠血糖水平及视网膜组织糖代谢,修复视网膜病理损伤,其机制可能与调节MAPK通路有关。

早产视网膜病变患儿脉络膜厚度与最佳矫正视力的研究

目的探讨早产视网膜病变(ROP)患儿脉络膜厚度与最佳矫正视力(BCVA)的相关性。方法选取我院收治的198例早产儿为研究对象,研究组(患ROP)118例,对照组(未患ROP)80例。比较两组一般资料、脉络膜厚度及视力相关指标,分析脉络膜厚度与BCVA的相关性。结果研究组孕周(<32 w)、出生体质量(≤1500 g)、有呼吸窘迫、有酸中毒、呼吸机使用时间(>5 d)、有感染的比例均高于对照组,出生胎龄低于对照组(P<0.05);研究组患儿的BCVA(0.25±0.29)较对照组(0.08±0.21)差(P<0.05);与对照组相比,研究组患儿的黄斑中心凹下脉络膜厚度(SFCT)及距离黄斑中心凹上方(S)、下方(I)、颞侧(T)、鼻侧(N)1 mm和3 mm处的脉络膜厚度均降低(P<0.05);Pearson法分析结果显示患儿的BCVA与SFCT、S1、I1、T1、N1、S3、I3、T3、N3、SE均呈正相关(P<0.05)。结论ROP患儿的脉络膜厚度及BCVA均较健康早产儿低,且脉络膜厚度与BCVA之间密切相关。

晶状体后囊切开术治疗原发性闭角型青光眼疗效观察

目的探讨晶状体后囊切开术治疗原发性闭角型青光眼的临床疗效。方法选取本院2015年2月至2016年2月接诊的100例(127眼)原发性闭角型青光眼患者为研究对象。按照随机数表法将入选患者分为观察组和对照组,每组各50例。观察组患者采用晶状体后囊切开术治疗,对照组患者采用激光周边虹膜切开术治疗。观察并比较两组患者手术前后前房深度、眼压、视力及术后并发症发生情况。结果观察组患者术后前房深度和视力均显著高于对照组(P<0.05),眼压和术后并发症发生率均显著低于对照组(P<0.05)。结论晶状体后囊切开术能够提高原发性闭角型青光眼患者的视力,改善眼压,疗效显著,且并发症少。

超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼伴白内障老年患者的效果

目的探讨超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的老年患者的临床疗效。方法回顾性分析青光眼合并白内障的老年患者的临床资料,根据治疗方式的不同将患者分为观察组和对照组。观察组采用超声乳化联合小梁切除手术方式,对照组采用单纯小梁切除术。对比两组的临床治疗效果,分析比较两组手术前后视力、眼压和前房深度的变化,对比两组术后并发症的发生率。结果观察组治疗有效率显著高于对照组(91. 04%vs 75. 41%;χ2=5. 691,P=0. 017)。观察组术后眼压显著低于对照组,前房深度显著大于对照组,术后视力显著优于对照组,差异均具有统计学意义(均P<0. 05)。两组患者术后各出现1例角膜水肿和1例低眼压,差异无统计学意义(χ2=0. 009,P=0. 924)。两组均未发生后囊破裂等严重并发症。结论运用超声乳化联合小梁切除术对老年患者青光眼伴白内障的眼压、视力有明显改善作用,优于单纯小梁切除术,是一种安全有效的手术方式。

小切口水平空间劈核术与超声乳化术治疗老年性白内障的效果对比

目的比较改良式小切口水平空间劈核术与超声乳化术治疗老年性白内障的临床效果。方法回顾性选择老年性白内障患者202例(202只眼),随机分为两组,A组101例[101只眼,行改良式小切口水平空间劈核+眼内人工晶体植入(IOL)],B组101例(101只眼,行超声乳化+IOL)。比较两组手术时间、并发症、术前及术后不同时段裸眼视力(UCVA)、角膜散光、角膜内皮细胞密度和丢失率。结果两组间手术时间、并发症、术前及术后不同时段裸眼视力(UCVA)和角膜散光均无统计学差异(P>0.05)。组内术后1 d,1 w,1个月角膜散光与术前有统计学差异(P<0.05),术后3个月较术前无显著差异(P>0.05)。两组术前角膜内皮细胞密度无显著差异(P>0.05),术后不同时段较术前显著减少(P<0.05)。晶状体核Ⅳ~Ⅴ级:两组术后不同时段角膜内皮细胞密度和丢失率均有显著性差异(P<0.05)。结论改良式小切口水平空间劈核术依据前房空间的特点,利用细小的角平台系线镊行夹劈核和娩核一体化,减少对角膜内皮细胞的损伤,适用于硬核老年性白内障,是一种安全、有效且经济的手术方法。

羟糖甘滴眼液联合维生素A棕榈酸酯凝胶治疗视网膜脱离术后干眼症的疗效观察

目的观察羟糖甘滴眼液联合维生素A棕榈酸酯凝胶治疗视网膜脱离术后干眼症的疗效。方法选取2017年3月至2019年12月海南医学院第二附属医院收治的82例(125眼)视网膜脱离术后干眼症患者进行前瞻性研究,按照简单随机化方法将患者分对照组(n=41,61眼)和观察组(n=41,64眼),对照组患者给予羟糖甘滴眼液,观察组患者在此基础上给予维生素A棕榈酸酯凝胶。比较两组患者的临床疗效、基础泪液分泌试验(SIt)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(FL)、眼表疾病指数量表评分(OSDI)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Toll样受体4(TLR4)、过氧化脂质(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(TAC)、丙二醛(MDA)水平,采用Spearman相关性分析评价以上各指标与临床疗效的相关性。结果治疗后,观察组患者的总有效率、SIt、BUT、SOD、TAC分别为95.31%、(8.16±0.67) mm、(9.72±1.35) s、(0.16±0.04) mmol/L、(10.36±1.44) kU/L,高于对照组的80.33%、(6.95±0.73) mm、(7.08±1.12) s、(0.12±0.03) mmol/L、(7.25±1.12) kU/L,FL、OSDI评分、IL-1β、TNF-α、TLR4、LPO、MDA分别为(1.18±0.39) s、(6.59±1.12)分、(22.68±9.55) ng/L、(28.19±7.41) ng/L、(0.78±0.19)ng/L、(1.05±0.25)μmol/L、(1.69±0.32) U/L,低于对照组的(3.07±0.42) s、(12.88±2.67)分、(50.74±13.29) ng/L、(56.08±10.52) ng/L、(1.68±0.25) ng/L、(1.49±0.30)μmol/L、(3.72±0.58) U/L,差异均具有统计学意义(P<0.05);IL-1β(r=-0.382)、TNF-α(r=-0.497)、TLR4(r=-0.611)、LPO(r=-0.536)、MDA(r=-0.477)均与疗效呈负相关,SOD(r=0.515)、TAC(r=0.602)均与疗效呈正相关(P<0.05)。结论羟糖甘滴眼液联合维生素A棕榈酸酯凝胶治疗视网膜脱离术后干眼症,能有效缓解患者临床症状,提高泪膜稳定性,改善炎症反应和氧化应激,疗效显著。

年龄相关性白内障早期手术的效果

目的探讨年龄相关性白内障不同时期超声乳化手术效果。方法按照白内障核分级标准将选取的白内障患者分为早期(ES)组:均为Ⅱ~Ⅲ级核白内障患者,共76例(92眼);晚期(LP)组:均为Ⅳ~Ⅴ级核白内障,共74例(90眼)。分析ES组和LP组的视力情况、眼压改善情况、泪液分泌试验(SIt)和泪膜破裂时间(BUT)指标、手术并发症的差异性。结果ES组视力好转情况明显比LP组优(P<0.05)。ES组眼压情况明显比LP组优(P<0.05)。ES组SIt、BUT指标改善情况显著比LP组优(P<0.05)。术后,ES组和LP组患者均出现一定的继发效应,LP组继发效应发生率显著高于ES组(P<0.05)。结论白内障患者应选择在白内障未熟期,即早期,核硬度以2~3级核选择白内障超声乳化人工晶状体植入术效果较佳,手术安全,并发症少,视力恢复快,比4~5级硬核时进行手术效果更可靠。

康柏西普联合PRP治疗缺血型CRVO引起新生血管性青光眼的效果及对房水Klotho和Endothelin-1的影响

目的探讨康柏西普联合全视网膜光凝(PRP)治疗缺血型视网膜中央静脉阻塞(CRVO)引起新生血管性青光眼(NVG)的效果及对房水Klotho和Endothelin-1的影响。方法选取2019年12月—2020年12月80例缺血型CRVO引起的NVG(80只眼),根据治疗方法不同分为对照组和研究组,每组40例(40只眼)。对照组采用PRP治疗,研究组采用康柏西普联合PRP治疗。对比两组综合疗效、不良事件及复发情况。比较两组治疗前后眼压和最佳矫正视力(BCVA),房水Klotho、Endothelin-1、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板反应蛋白-1(TSP-1)、细胞色素C(CytC)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)水平,以及视网膜中央动脉舒张末期血流速度(EDV)、收缩期峰值血流速度(PSA)。结果研究组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗前、治疗后4和8周,两组眼压及房水Endothelin-1、VEGF、TSP-1、CytC水平呈降低趋势,BCVA、房水Klotho和Mfn1水平、视网膜中央动脉EDV和PSA呈升高趋势;且研究组治疗后4、8周上述指标降低和升高程度均优于对照组(P<0.05)。研究组不良事件发生率低于对照组(P<0.05)。两组复发率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用康柏西普联合PRP治疗缺血型CRVO引起NVG,能显著提高治疗效果,进一步提高患者视力水平,抑制新生血管生成,改善房水Klotho、Endothelin-1水平。

miR-124-3p靶向调控KLF6基因表达对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA-124-3p(miR-124-3p)对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞增殖及凋亡的影响及其靶向调控Krüppel样因子6(Krüppel like factor 6,KLF6)的机制。方法按HLE-B3细胞处理方式的不同,将其分为HLE-B3组、HLE-B3+H2O2组、HLE-B3+H2O2+miR-NC组、HLE-B3+H2O2+miR-124-3p组、HLE-B3+H2O2+si-NC组、HLE-B3+H2O2+si-KLF6组、miR-124-3p+pcDNA3.1组、miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6组。利用MTT实验检测各组HLE-B3细胞增殖活性,流式细胞仪检测各组HLE-B3细胞凋亡。双荧光素酶报告基因实验验证miR-124-3p与KLF6的靶向关系。Western blot检测各组HLE-B3细胞中Cyclin D1、P21、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果H2O2可抑制人晶状体上皮HLE-B3细胞中miR-124-3p的表达(HLE-B3组0.79±0.07、HLE-B3+H2O2组0.31±0.03)(P<0.05),而明显促进KLF6的表达;miR-124-3p过表达或抑制KLF6表达可促进HLE-B3细胞增殖,抑制HLE-B3细胞凋亡(19.34±1.27、7.66±0.38;19.29±1.33、11.46±1.02),促进Cyclin D1(0.39±0.04、0.89±0.08;0.39±0.04、0.74±0.07)、Bcl-2表达(0.29±0.03、0.74±0.07;0.29±0.03、0.60±0.06),抑制P21(0.73±0.07、0.26±0.03;0.79±0.07、0.33±0.03)、Bax表达(0.86±0.08、0.37±0.03;0.86±0.08、0.51±0.05)。共转染miR-124-3p mimics与WT-KLF6可明显降低HLE-B3细胞的荧光素酶活性(0.27±0.03、0.98±0.08)(P<0.05);过表达KLF6可逆转miR-124-3p对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞HLE-B3细胞增殖及凋亡的作用。结论miR-124-3p可通过靶向调控KLF6表达进而促进H2O2诱导的人晶状体上皮细胞HLE-B3细胞增殖并抑制其凋亡。

miR-155-5p靶向SEP15基因在H2O2诱导的人晶状体上皮细胞损伤中的作用

目的探讨miR-155-5p靶向SEP15基因对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响及潜在机制。方法用含100μmol·L^-1 H2O2的培养液培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3建立H2O2损伤模型,根据处理和转染情况分为对照组、H2O2组、H2O2+anti-miR-NC组、H2O2+anti-miR-155-5p组、H2O2+pcDNA组、H2O2+pcDNA-SEP15组、miR-NC组、miR-155-5p组、H2O2+anti-miR-155-5p+si-NC组、H2O2+anti-miR-155-5p+si-SEP15组,Real-time PCR检测HLE-B3细胞中miR-155-5p和SEP15 mRNA的表达,Western blot测定SEP15、Bcl-2、Bax和Cleaved-caspase-3蛋白的表达,ELISA测定H2O2诱导后HLE-B3中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平,流式细胞术测定细胞凋亡率,Targetscan预测miR-155-5p与SEP15的结合关系,双荧光素酶检测验证miR-155-5p与SEP15的调控关系。结果H2O2组HLE-B3细胞中miR-155-5p、SEP15 mRNA、SEP15蛋白、MDA、SOD、GSH-Px含量及凋亡率与对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H2O2+anti-miR-155-5p组和H2O2+anti-pcDNA-SEP15组的细胞凋亡率分别为(12.69±1.28)%和(14.67±1.52)%,分别与H2O2+anti-miR-NC组的(25.68±2.34)%和H2O2+pcDNA组的(23.65±2.17)%相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Targetscan预测miR-155-5p与SEP15存在结合位点,双荧光素酶检测结果显示,miR-155-5p组野生型WT-SEP-15的萤火虫荧光素酶相对活性为0.39±0.03,较miR-NC组的1.02±0.09显著降低(P=0.000)。与H2O2+anti-miR-155-5p-si-NC组相比,H2O2+anti-miR-155-5p+si-SEP15组的SEP-15蛋白、Bcl-2蛋白、SOD活性和GSP-Px含量均显著降低,Bax蛋白、MDA含量及细胞凋亡率均显著升高(均为P<0.05)。结论miR-155-5p通过靶向SEP15基因以减轻H2O2对人晶状体上皮细胞HLE-B3的损伤并抑制细胞凋亡。

糖尿病合并年龄相关性白内障与年龄相关性白内障术后并发症的对比分析

背景老龄化社会的到来使得国内年龄相关性白内障(ARC)的发病率升高。白内障是糖尿病常见的并发症,其中糖尿病合并ARC临床较多见,其临床表现与ARC相似,但发病较早、进展快。不同病因所致的老年白内障,如无手术禁忌证,多可行白内障手术治疗,但其术后的临床结局不尽相同。目的探讨糖尿病合并ARC与ARC患者术后并发症的发生状况,分析临床可采取的防治措施。方法对海南医学院第二附属医院2017年1-12月收治的182例(189眼)行白内障手术老年患者的临床资料进行回顾性分析,其中糖尿病合并ARC患者51例(53眼)作为观察组,ARC患者131例(136眼)作为对照组。比较两组术后1周并发症(角膜水肿、纤维性渗出、瞳孔后粘连、前房出血、黄斑水肿),术后1周、1个月、3个月矫正视力及预后情况。结果观察组术后1周并发症发生率〔56.9%(29/51)〕高于对照组〔18.3%(24/131)〕(P<0.05)。两组术后1周、1个月、3个月矫正视力情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1个月观察组3例(4眼,7.55%,4/53)切口愈合不良,对照组0例;两组术后1个月预后情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病合并ARC患者术后并发症发生率更高,应引起临床的高度重视,需采取积极措施合理控制术前血糖,选择合理的手术时机,尽可能减少术后并发症,以使患者获得更佳的预后。

miR-34a-5p对ARPE-19细胞TGF-β/Smad通路相关蛋白表达及细胞增殖、迁移和上皮-间质转化的影响

目的探讨miR-34a-5p对ARPE-19细胞TGF-β/Smad通路相关蛋白表达及细胞增殖、迁移和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法将ARPE-19细胞分为4组:对照组、转化生长因子(TGF)-β1组、miR-34a-5p过表达组与复合干预组,对照组与TGF-β1组采用Lipofectamine 2000转染试剂转染对照模拟物,miR-34a-5p过表达组与复合干预组转染miR-34a-5p模拟物,培养24 h后采用无血清培养基饥饿培养12 h,TGF-β1组与miR-34a-5p过表达组均添加10 mg·L^(-1)的TGF-β1,复合干预组添加10 mg·L^(-1)的TGF-β1与10μmol·L^(-1)的TGF-β通路激活剂SRI-011381,各组细胞继续培养24 h,测定细胞增殖、迁移与EMT。采用Western blot检测细胞TGF-β/Smad通路相关蛋白的表达水平,Ki67荧光染色检测细胞增殖情况,免疫荧光染色测定细胞EMT相关蛋白表达情况,划痕实验和Transwell实验测定细胞的迁移和侵袭能力。结果与对照组相比,TGF-β1组细胞内TGF-β受体(TGF-βR)1、TGF-βR2、磷酸化Smad2(p-Smad2)和p-Smad3的表达水平均增高(均为P<0.05)。与TGF-β1组相比,过表达miR-34a-5p能够明显逆转TGF-β1对TGF-β/Smad信号通路的激活作用。与miR-34a-5p过表达组相比,复合干预组细胞内TGF-β/Smad信号通路明显被激活。与TGF-β1组相比,miR-34a-5p过表达组细胞Ki67阳性率为(6.67±1.52)%,明显降低(P<0.05)。与miR-34a-5p过表达组相比,复合干预组细胞Ki67阳性率为(16.67±1.53)%,显著升高(P<0.05)。划痕实验和Transwell实验结果显示:与对照组相比,TGF-β1能够促进ARPE-19细胞迁移和侵袭。过表达miR-34a-5p能够明显抑制TGF-β1组ARPE-19细胞的迁移和侵袭能力。在复合干预组内,TGF-β通路激活剂SRI-011381能够明显逆转过表达miR-34a-5p对ARPE-19细胞迁移能力的抑制作用。免疫荧光染色结果显示:与对照组相比,TGF-β1能够明显提高ARPE-19细胞内α-SMA和纤维连接蛋白表达水平,并抑制钙黏蛋白E的表达。与TGF-β1组相比,过表达miR-34a-5p能够明显抑制ARPE-19细胞发生EMT。在复合干预组内,TGF-β通路激活剂SRI-011381能够缓解过表达miR-34a-5p对ARPE-19细胞EMT的抑制作用。结论miR-34a-5p通过靶向失活TGF-β/Smad信号通路抑制ARPE-19细胞的增殖、迁移与EMT。

去甲斑蝥素对实验性过敏性结膜炎眼部炎症及Th1/Th2平衡的影响及机制

目的:探究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对实验性过敏性结膜炎(allergic conjunctivitis,AC)大鼠眼部炎症及Th1/Th2平衡的调节作用及其机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)法建立SD大鼠AC模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、NCTD低剂量组和NCTD高剂量组,除对照组外,其余各组均诱导AC模型,NCTD低、高剂量组分别按0.05mg·kg^(-1)·d^(-1)、0.1mg·kg^(-1)·d^(-1)给予NCTD灌胃,连续10d;大鼠OVA末次致敏后,观察眼部体征表现并评分,苏木精-伊红(HE)染色和高碘酸‐希夫(PAS)染色分别观察角膜与结膜组织病理学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-10及IFN-γ的含量,流式细胞术检测脾脏淋巴细胞内Th1、Th2细胞比例,实时荧光定量PCR检测结膜组织IL-4、IFN-γmRNA表达水平,免疫荧光染色检测角膜组织VEGF表达,蛋白质印迹(Western Blot)实验检测结膜组织VEGF、VEGFR2蛋白表达水平。结果:大鼠造模后出现结膜充血红肿,眼裂变小、流泪、分泌物增多等AC病理现象,炎症评分高于对照组(P<0.01),说明AC动物模型构建成功;经过NCTD低剂量组和NCTD高剂量组处理的大鼠,结膜充血红肿的现象明显缓解,流泪、分泌物均减少,炎症评分下降,角膜上皮细胞排列较为紧密,新生血管减少,结膜中杯状细胞数目有所增加,血清中IL-2、IFN-γ含量升高,IL-4、IL-5及IL-10含量降低,脾脏中Th1细胞比例和Th1/Th2比值均增加,Th2细胞比例则减少,结膜组织中IFN-γmRNA表达上调、IL-4 mRNA表达下调(P均<0.01);同时,角膜组织中VEGF阳性表达率减少,结膜组织中VEGF、VEGFR2蛋白表达均下调(P均<0.01);此外,NCTD高剂量的作用效果优于NCTD低剂量(P均<0.01)。结论:去甲斑蝥素能够缓解实验性过敏性结膜炎大鼠的病变进程,改善Th1/Th2细胞免疫失衡,其机制可能与抑制VEGF途径相关。

CERKL通过激活SIRT1/E2F1轴减轻蓝光导致的人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤

目的:探讨神经酰胺类似蛋白(CERKL)是否通过激活沉默信息调节因子1(SIRT1)/E2F转录因子1(E2F1)轴减轻蓝光导致的视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化应激损伤。方法:培养人视网膜色素上皮-19(ARPE-19)细胞,蓝光照射后观察细胞形态变化,PCR与蛋白免疫印迹法测定细胞CERKL的表达情况;分别采用siRNA-CERKL与pcDNA3.1-CERKL转染ARPE-19细胞,蓝光暴露处理后,采用MTT法测定细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡情况,分析氧化应激标志物的含量与SIRT1/E2F1轴的表达情况;随后转染siRNA-SIRT1至ARPE-19细胞,再次测定蓝光照射下细胞氧化应激损伤状况。结果:蓝光照射后,ARPE-19细胞逐渐收缩成圆球状,且出现空泡;蓝光照射导致CERKL表达水平升高(P<0.05),同时观察到细胞活力降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05),活性氧、丙二醛与8-羟基脱氧鸟苷含量升高(P<0.05);沉默CERKL会加剧此现象,而上调CERKL则能缓解此变化(P<0.05);上调CERKL同时激活了SIRT1表达,促进了E2F1的脱乙酰化(P<0.05),而沉默SIRT1能逆转上调CERKL对蓝光导致ARPE-19细胞氧化应激损伤的缓解作用(P<0.05)。结论:CERKL通过激活SIRT1表达,促进E2F1脱乙酰化,从而减轻蓝光诱发的ARPE-19细胞氧化应激损伤。

小切口白内障前房水平空间夹劈核技术疗效研究

目的:探讨小切口白内障前房水平空间夹劈核技术疗效研究。方法:将本院收治的110例单纯年龄性白内障患者按照患者自愿选择手术方法的不同分为对照组及实验组,对照组51例56眼行白内障超声乳化手术,实验组59例68眼行小切口白内障前房水平空间夹劈核方法,观察治疗前后视力、散光、中央角膜厚度和并发症相关性分析。结果:术前对照组和实验组视力均<0.5,术后1d、1个月和3个月与术前相比对照组和实验组视力均改善(P<0.05),但同一时间对照组和实验组相互比较相差较小(P>0.05);术前对照组和实验组角膜散光相差较小(P>0.05),对照组和实验组术后1d与术前比较相差较大(P<0.05),其余时间点无差异(P>0.05);对照组与实验组在术前、术后1d、术后1个月及3个月相比中央角膜厚度比较无意义(P>0.05),不同时间点比较,术后1d与术前相比中央角膜厚度比相差近较大(P<0.05),其余时间相差较小(P>0.05);与对照组比较,实验组术后不良事件的发生率减少,有统计学差异(8.82%vs 21.43%χ^2=5.257,P<0.05)。结论:小切口白内障前房水平空间夹劈核技术提高术后视觉功能,减少散光及并发症的发生,经济压力小,适合基层开展防音手术。