外泌体转运miR-223改善创伤性脑损伤的作用和机制

目的探究外泌体(Exo)转运miR-223对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织损伤与小胶质细胞活化的影响及机制。方法通过脂质体法分别将miR-NC质粒、miR-223 mimic质粒转染至HEK293细胞,实时荧光定量PCR测定细胞中miR-223表达水平;提取转染后HEK293细胞Exo,通过透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析及Western blot对Exo进行鉴定,并采用实时荧光定量PCR测定Exo中miR-223表达水平;将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、NC-Exo组、miR-223-Exo组,每组10只。除假手术组外的3组大鼠均通过改良Feeney自由落体法制备TBI模型,NC-Exo组与miR-223-Exo组大鼠分别经尾静脉注射转染miR-NC质粒细胞来源的Exo、转染miR-223 mimic质粒细胞来源的Exo;2周后,苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠脑组织病理学变化,尼氏(Nissl)染色检测各组大鼠尼氏体改变与分布情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平,免疫荧光双染法观察各组大鼠脑组织内Nod样受体蛋白3(NLRP3)与离子钙接头蛋白(Iba-1)表达,Western blot测定各组大鼠脑组织内NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的蛋白表达水平。结果细胞转染后,与对照组和miR-NC组比较,miR-223组细胞中miR-223相对表达量显著增加(P<0.05);分离的颗粒物具有典型的Exo形态,粒径峰值大约处于120 nm,Exo标志蛋白CD9、CD63及CD81均明显高表达,且miR-223相对表达量显著增加(P<0.05)。与模型组比较,miR-223-Exo组大鼠脑组织损伤现象得到改善,尼氏体形态恢复且数目增加,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均降低(P<0.05),脑组织内NLRP3与Iba-1荧光染色强度减少(P<0.05),同时,脑组织内NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白相对表达量均下调(P<0.05)。结论Exo转运miR-223能够明显改善TBI大鼠脑组织损伤,抑制小胶质细胞激活,该作用可能与抑制NLRP3炎性小体活化相关。

老年癫痫患者认知功能与血清Bcl-2、IGF-1的相关性

目的探讨老年癫痫患者血清B细胞淋巴瘤/白血病(Bcl)-2、胰岛素样生长因子(IGF)-1水平变化及与患者认知功能的相关性。方法选取2016年7月至2017年4月该院收治的老年癫痫患者52例为观察组,另选取同时期在该院进行体检的健康者40例为对照组,应用蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)对两组的认知功能进行测评,应用酶联免疫吸附法检测血清Bcl-2与IGF-1的水平,对比两组认知功能及血清Bcl-2与IGF-1水平的差异,并分析Bcl-2与IGF-1与认知功能的相关性。结果观察组患者的执行能力、注意与集中力、语言、记忆力、MoCA总分显著低于对照组(P<0.05),两组定向力、命名、抽象思维评分对比差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者的血清Bcl-2水平显著高于对照组,血清IGF-1水平显著低于对照组(P<0.05);血清BCL-2与认知功能MoCA总分呈显著负相关,血清IGF-1与MoCA总分呈显著正相关(P<0.01)。结论老年癫痫患者的认知功能较正常人低,血清Bcl-2、IGF-1水平均与老年癫痫患者的认知功能存在密切相关性。

重度脑外伤患者血清铁蛋白水平与格拉斯哥昏迷评分和重症监护病房病死率的关系

目的探讨重度脑外伤患者血清铁蛋白水平与格拉斯哥昏迷评分(GCS)和ICU病死率的关系。方法选择在我院脑外科就诊的162例重度脑外伤患者,根据GCS分为轻症组76例,重症组86例;测定2组血清铁蛋白水平、GCS、TC、TG、HDL-C、LDL-C、纤维蛋白原(Fib)、糖化血红蛋白(HbA1c)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、空腹血糖(FPG)水平,同时记录2组患者ICU死亡情况。结果重症组血清铁蛋白、GCS、ICU病死率高于轻症组(P<0.05);重症组TC、TG、LDL-C水平高于轻症组,HDL-C水平低于轻症组(P<0.05);重症组Fib、HbA1c、hs-CRP、FPG水平高于轻症组(P<0.05);血清铁蛋白与GCS、ICU病死率、TC、TG、LDL-C、Fib、HbA1c、hs-CRP、FPG呈正相关(r=0.652,P=0.000;r=0.575,P=0.000;r=0.651,P=0.000;r=0.572,P=0.000;r=0.494,P=0.008;r=0.747,P=0.000;r=0.438,P=0.006;r=0.523,P=0.006;r=0.591,P=0.000),与HDL-C呈负相关(r=-0.483,P=0.008);logistic回归分析显示,血清铁蛋白、GCS、Fib、TC、FPG均为重度脑外伤发生ICU死亡的危险因素(P<0.05,P<0.01)。结论重度脑外伤患者血清铁蛋白水平升高,其与GCS及ICU病死率相关。

外泌体来源的miR-181a促进胶质瘤的血管生成

目的:探讨外泌体来源的miR-181a对胶质瘤血管生成和肿瘤进展的影响。方法:选用2017年8月至2019年12月海南医学院第二附属医院手术切除的83例胶质瘤和13例瘤旁组织标本,以及胶质瘤细胞U87、A172、U251、LN229、U373和小神经胶质细胞HM,用qPCR法检测瘤组织和细胞中miR-181a的表达水平。构建过表达或敲减miR-181a的U373细胞,分离和鉴定外泌体;用小管形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜血管实验观察外泌体来源的miR-181a对HUVEC小管和血管生成的影响。构建裸鼠U373细胞移植瘤模型,观察外泌体来源的miR-181a对血管生成及肿瘤生长的影响。结果:miR-181a在胶质瘤肿瘤组织和细胞中的表达水平明显高于瘤旁组织和HM细胞(均P<0.01)。外泌体来源的miR-181a可以明显促进HUVEC小管的形成和鸡胚尿绒毛囊膜的血管生成(均P<0.01)。裸鼠胶质细胞瘤体内实验发现,回输大量外泌体来源miR-181a的小鼠移植瘤进展更快(P<0.05)、肿瘤组织中血管生成数量显著增加(P<0.01)。结论:miR-181a在促进胶质瘤血管生成中发挥重要作用,可能成为胶质瘤诊断及治疗的潜在靶点。

浮动骨瓣减压术联合颅内压监测在颅脑手术的临床应用

目的:探究浮动骨瓣减压术联合颅内压监测在颅脑手术中的应用价值。方法:回顾性分析2019年3月至2020年8月本院收治的98例颅脑损伤患者的临床资料,根据手术方式分为观察组53例和对照组45例,观察组患者接受浮动骨瓣减压术+颅内压监测治疗,对照组接受标准去骨瓣减压术+颅内压监测治疗。比较两组患者甘露醇使用时间与使用量、ICU时间,不同时间点颅内压、格拉斯哥昏迷指数(GCS),术后并发症和预后情况。结果:术后两组患者颅内压、GCS评分的组间和时间差异均具有统计学意义(P<0.05),GCS评分交互差异有统计学意义(P<0.05);观察组和对照组各时间点的颅内压比较无明显差异(P>0.05),术后7d,观察组的GCS评分高于对照组(P<0.05)。术后,观察组的甘露醇使用量多于对照组(P<0.05),两组患者的甘露醇使用时间和ICU时间治疗时间无明显差异(P>0.05);观察组患者的电解质紊乱、肾功能异常和切口疝等并发症的发生率均低于对照组(P<0.05),其他并发症发生率无明显差异(P>0.05);术后6个月,观察组的平均治疗费用明显低于对照组(P<0.05),两组患者的预后良好率无明显差异(P>0.05)。结论:浮动骨瓣减压术联合颅内压监测可有效降低颅脑损伤患者颅内压,在改善患者预后方面,与标准去骨瓣减压术效果相当,可降低术后并发症发生率,避免颅骨的二次修复,从而减轻患者经济负担。

表达LAG-3抗体的溶瘤腺病毒对成胶质细胞瘤的抗瘤性

目的:探讨共表达淋巴细胞活化基因3(lymphocyte activation gene 3,LAG-3)抗体(LAG-3 antibody,aLAG)的溶瘤腺病毒对成胶质细胞瘤的抗肿瘤活性。方法:在溶瘤腺病毒Ad3的骨架中插入aLAG序列,获得重组溶瘤腺病毒Ad3-aLAG。应用WB法检测感染成胶质细胞瘤GL261细胞中aLAG的表达水平,MTT法检测重组溶瘤腺病毒对GL261细胞的杀伤能力,通过小鼠皮下移植瘤模型评估重组溶瘤腺病毒对成胶质细胞瘤的体内肿瘤生长的抑制效果,免疫组化染色法检测肿瘤浸润T细胞,并通过流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞分泌细胞因子TNF-α及IFN-γ的水平。结果:成功构建的重组溶瘤腺病毒可以有效表达aLAG(P<0.01),并且可以在体外杀伤GL261细胞(P<0.01)。小鼠皮下移植瘤模型实验结果显示,重组溶瘤腺病毒Ad3-aLAG较Ad3溶瘤腺病毒而言肿瘤抑制能力更强(P<0.01),并且可以有效增强移植瘤组织中CD3+T细胞的浸润(P<0.01)、增强浸润T细胞分泌IFN-γ的能力(P<0.01)。结论:Ad3-aLAG重组溶瘤腺病毒在体内外均显著抑制成胶质细胞瘤细胞的生长,同时增强体内的抗肿瘤免疫反应,有望为成胶质细胞瘤治疗提供一种新的方案。

前沿管理干预流程图在脑外伤多重耐药菌感染控制中的应用

目的探讨前沿管理干预流程图在脑外伤多重耐药菌(MDRO)医院感染控制中的应用。方法 2016年6月至2017年6月对脑外伤患者制定前沿管理干预流程图(实施后组),并与2015年6月至2016年5月未实施前沿管理干预流程图(实施后组)进行比较,比较前沿管理干预实施前后脑外伤患者医院感染发生率、MDRO感染率、护士MDRO防控知识知晓率、护士手卫生执行率、抗菌药物使用率及患者对护理服务质量的满意率。结果实施后组患者医院感染发生率、MDRO感染率、抗菌药物使用率低于实施前组(均P<0.05),实施后组护士MDRO防控知识知晓率、护士手卫生执行率高于实施前组(均P<0.05)。实施后组患者对护理服务质量、健康宣教、基础护理、护士态度、消毒隔离等方面满意率高于实施前组(均P<0.05)。结论前沿管理干预流程图对病房MDRO感染的防控起到很好的指导作用,并可以提高护士MDRO的防控知识及手卫生执行知识水平。

高血压脑出血术后颅内感染病原菌分布及相关因子表达

目的探讨高血压脑出血术后并发颅内感染患者病原菌分布,并对其血清炎症因子和氧化应激指标的表达情况予以分析。方法以2016年2月-2018年2月海南医学院第二附属医院神经外科收治的高血压脑出血患者200例为研究对象,将所有患者根据术后是否并发颅内感染分为感染组64例与非感染组136例。采集感染组患者的脑脊液标本进行病原菌培养以及鉴定,并分别采集感染组与非感染组患者血液标本检测其血清炎症因子和氧化应激指标水平。同时,分析不同感染程度颅内感染患者血清炎症因子、氧化应激指标水平,并分析高血压脑出血术后并发颅内感染严重程度与血清炎症因子、氧化应激指标水平的相关性。结果感染组64例患者脑脊液分离出病原菌80株,革兰阴性菌占32.50%、革兰阳性菌占47.50%、其他占20.00%;感染组患者血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、血管紧张素Ⅱ(angiotensin II,Ang-Ⅱ)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平均高于非感染组患者(P<0.05);轻度感染、中度感染、重度感染患者的血清CRP、PCT、Ang-Ⅱ、MDA水平均呈逐渐升高趋势,各组间对比的差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析可得:高血压脑出血术后并发颅内感染严重程度与血清CRP、PCT、Ang-Ⅱ、MDA水平均呈正相关(P<0.05)。结论高血压脑出血术后并发颅内感染患者病原菌以革兰阳性菌和革兰阴性菌为主,并发颅内感染患者炎症因子与氧化应激指标水平明显升高,且各项指标与感染严重程度密切相关。

肺癌脑转移瘤多发患者开放手术治疗的效果及生存分析

目的分析肺癌脑转移瘤多发患者开放手术治疗的效果及生存情况。方法将2013年4月至2014年3月我院收治的72例肺癌脑转移瘤多发患者纳入本次研究。患者在完成脑转移瘤切除术后行全脑放疗、化疗,有40例患者行肺部肿瘤切除术,32例未开展肺部肿瘤切除术。分析患者生存期和生存率。结果所有患者的生存期为7. 12～53. 14个月,中位生存期为(24. 32±5. 32)个月,1年、2年、3年生存率分别为83. 33%(60/72)、48. 61%(35/72)、16. 67(12/72)。接受肺叶切除术和未接受肺叶切除术者的生存时间分别是(21. 45±2. 75)个月、(22. 38±2. 81)个月,无显著差异(P> 0. 05),接受肺叶切除术者的1年、2年、3年生存率分别为90. 00%(36/40)、50. 00%(20/40)、17. 50%(7/40),未接受肺叶切除术者的1年、2年、3年生存率分别为75. 00%(24/32)、46. 88%(15/32)、15. 63%(5/32),无明显差异(P> 0. 05)。结论肺癌脑转移瘤多发患者通过开放手术切除脑转移瘤,效果良好,是否切除肺部肿瘤并不会影响患者生存期。