转基因水牛人FSHβ基因突变的研究

目的:检测转基因水牛人FSHβcDNA序列基因。方法:分离提取转基因水牛外周血DNA,PCR扩增,T-A克隆测序,DNAclub软件分析。结果:水牛基因组整合人FSHβcDNA序列并发生一位点缺失C44(无意义链)或G347(有意义链),突变位于人FSHβ-Seatbelt结构域。结论:转基因水牛整合人FSHβcDNA序列发生点缺失,导致阅读框架发生移码,其功能有待进一步研究。

转基因杂交水牛染色体核型分析

目的:分析转基因水牛(“海医一号”)染色体核型。方法:取水牛耳源静脉血,按人类外周血染色体标本制备方法进行。结果:水牛染色体核型为２ｎ＝４９(４９,ＸＸ)。结论:转基因杂交水牛核型变化与常规杂交育种相同。

奶水牛乳腺表达人FSHβ基因的载体构建

目的:构建奶水牛乳腺表达人FSHβ基因载体。方法:利用限制性内切酶和T4DNA连接酶方法将转基因构件(水牛β酪蛋白启动子、hFSHβ、SV40PolyA)插入pLXIN载体中,通过转化大肠杆菌,筛选阳性克隆。结果:通过酶切鉴定及测序分析表明pLXIN插入转基因构件。结论:奶水牛乳腺表达人FSHβ基因的载体为:pLXIN-hFSHβ。

18S rRNA基因siRNA表达质粒的构建和鉴定

目的:构建和鉴定水牛18SrRNA干扰真核表达载体,为进一步研究18SrRNA功能奠定基础。方法:人工设计合成水牛18SrRNA-sh565干扰序列,经基因重组定向克隆插入到真核表达载体pGPH1/GFP/Neo,随机挑选2个克隆菌提取质粒并进行酶切和测序鉴定。结果:质粒酶切和测序结果显示,siRNA寡核苷酸按正确方向和序列插入质粒。结论:成功构建pGPH1/GFP/Neo-buffalo-18S rRNA-sh565干扰表达质粒。

大整数精确运算的数据结构与基选择

由于大整数超出了程序设计语言整数类型的值集范围,所以设计良好的数据结构与合适的基成为大整数精确运算系统的重要基础。研究了其选择依据并在PC机上通过实验结果验证了其合理性。

一个新的人乳源性生物活性肽cDNA克隆与测序分析

目的:分离、克隆人乳汁中新的生物活性肽。方法:从人初乳中提取总RNA,反转录获得cDNA,SMARTPCR扩增cDNA片段,克隆于pGEM-TEasy载体中,进行测序分析。结果:克隆一个新的cDNA并编码42个氨基酸的多肽,与人催乳素样糖蛋白部分同源,加入国际基因库,编号为:GenbankAF160979。结论:人初乳中存在核酸RNA,所克隆的新cDNA可能具有催乳素样功能。

奶水牛β-酪蛋白启动子的克隆及其序列分析

目的:克隆水牛乳腺β-酪蛋白启动子。方法:分离提取水牛乳腺组织DNA,PCR扩增目的片段,T-A克隆,核酸自动测序。结果:所克隆的DNA片段包含CAAT、TATA信号区,孕酮调节区等,100%同源于黑白花奶牛β酪蛋白启动子序列。结论:所克隆DNA片段是奶水牛β-酪蛋白基因上游调控序列。

一个新的胎肝发育相关因子cDNA的克隆与序列分析

目的:从胎肝cDNA文库中,分离胎肝发育相关新cDNA。方法:分离纯化胎肝组织RNA,构建cDNA文库、T-A克隆、核酸自动测序及生物信息学分析。结果:分离克隆一个新的cDNA片段,编码71个氨基酸多肽,并且与肝脏生长/分化因子9部分同源。申请加入国际基因库,登录号为:GenbankAF157027。结论:该新cDNA(GenbankAF157027)编码的多肽可能调控肝脏的发育。

miR-29b微RNA定位序列的素数组合规律

目的:探讨miR-29b微RNA定位序列的编码机制。方法:按照碱基堆积力和微RNA非编码性质,对碱基进行四进制数字编码:AUGC/0123;并且运用公式:Nmod4^n=R对微RNA序列进行模数运算和结构分析。结果:发现miR-29b微RNA的定位序列-aguguu具有素数组合规律。结论:微RNA细胞内分子邮编可能按照素数组合规律编码。