QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA方法的建立

目的:建立QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA的方法,并探讨其方法的稳定性、灵敏性与可靠性。方法:通过prime5.0设计出SRY与β-globin的TapMan探针,并对其QPCR反应体系进行优化。结果:分别得到了SRY与β-globin的引物及探针的反应最适浓度比,建立了其最佳QPCR反应体系,并得出所需外周血的最少量。结论:成功建立了QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA的方法,该方法将可用于无创性相关产前诊断。

IVF-ET术后产前诊断发现双胎之一畸形行减胎术探讨

目的探讨IVF-ET术后双胎之一畸形减胎术。方法收集就诊于本中心2018年1月至2018年10月期间4例IVFET术后双胎之一畸形减胎术患者的临床资料并进行回顾性分析。结果 4例患者均为一次减胎成功。新生儿均为活产,现均体健。结论在双胎妊娠中期,实施经腹超声引导下对双胎妊娠进行减胎是一种较为安全、可靠的技术,也是提高我国人口质量的重要方式。

不同基因型地中海贫血胎儿的大脑中动脉血流特征

目的通过研究不同基因型地中海贫血胎儿的大脑中动脉血流特征表现,评估胎儿大脑中动脉血流峰值速度（MCV-PSV）在预测不同基因型地贫的临床应用价值。方法自11~14周开始,每月一次测量患病胎儿大脑中动脉血流峰值。结果 1重型α地贫MCV-PSV明显增高,与其他基因组相比均有非常显著性差异P〈0.01;2HbH病组MCV-PSV较重型α地贫低,比轻型α地贫及正常组均高。胎儿大脑中动脉血流对胎儿HbH病的预测：以轻度贫血〉1.29 MOM为指标,敏感性为66.67%（8/12）,特异性为94.44%（34/36）。结论 1MCA-PS预测胎儿重型α地贫无创伤,准确性高,敏感性100%,特异性94%,是产前筛查和诊断的有效途径之一;2 MCA-PS预测胎儿HbH病的敏感性为66.7%,特异性为94.4%;3重型β地贫胎儿MCA-PS无显著改变。

探讨锚定多重PCR联合二代测序法用于产前诊断β-地中海贫血中的可行性研究

目的探索与完善β-地中海贫血的无创产前检测技术,进一步探讨孕妇外周血浆游离胎儿DNA对胎儿β-地中海贫血无创性产前诊断的临床应用价值。方法从2015年1月至2017年3月在海南医学院第一附属医院产前诊断中心就诊的孕妇中,选取5例夫妇为不同的β-地中海贫血基因型的家系,经孕妇及其丈夫知情同意后签署知情同意书。在妊娠16w至22w时行羊膜腔穿刺术抽取羊水这一传统的有创产前诊断方法,运用PCR联合RBD技术检测出胎儿β-地贫基因型,将此项检测结果作为产前诊断β-地贫的金标准;采用EDTA K2抗凝采血管分别抽取夫妇双方的前臂外周血,运用锚定多重PCR联合二代测序等一系列技术操作,通过检测孕妇外周血血浆中游离胎儿DNA(circulation free fetal DNA,cff DNA)获得胎儿地贫基因型,将其与金标准作比对,比较二者的一致性,从而推论孕妇外周血血浆cff-DNA对诊断胎儿β地中海贫血的准确性和稳定性。运用锚定多重PCR(AMP)联合二代测序法这一无创性产前检测方法,经过对比计算得出胎儿是否存在与其父亲一致的β地中海贫血基因突变型,将其与金标准对比。结果 1.运用锚定多重PCR(AMP)联合二代测序法经对比计算得出5个家系中,有2个家系的胎儿存在与其父亲一致的β地中海贫血突变型,其余3个家系的胎儿不存在与父亲一致的β地中海贫血突变型。2.存在与其父亲一致的β地中海贫血突变型的2个胎儿,其羊水地贫基因型均遗传了来自其父亲的β地中海贫血基因突变型;而其余3个不存在与其父亲一致的β地中海贫血基因突变型的胎儿,其羊水地贫基因型均没有遗传来自其父亲的β地中海贫血基因突变型。结论目前胎儿地贫基因检测基于有创性手术获得胎儿DNA进行基因诊断,有一定的流产和宫内感染的风险。我们迫切需要找到安全、无创、准确、简便、早期诊断的方法,cff-DNA的发现开启了无创产前诊断的新篇章,且基于二代测序平台的NIPT技术无创产前诊断胎儿唐氏综合征已广泛应用于临床,其准确性可达99%,这为地贫无创产前诊断研究提供了新的思路。

胎儿颈项透明层(NT)自动定位及厚度测量的研究

研究目的探讨《超声图像胎儿颈项透明层(NT)定位及厚度测量软件》临床应用的可行性,规范早孕期NT检验的市场评价体系。研究对象随机选取2014年5月14日至2017年6月30日来我院产检的170例孕11+0w-孕13+6w怀孕女性NT测量超声图片(胎儿头臀径为45mm-83mm),每列图像包括有NT标记和无NT标记有NT标记的,作为对照组;无NT标记的使用"超声图像胎儿颈项透明层(NT)定位及厚度测量软件"进行软件自动识别测量,测量数据作为观察组。结果二者比较,观察组数据无明显统计学意义(P>0.05)。结论 "超声图像胎儿颈项透明层(NT)定位及厚度测量软件"测量结果与医师手动测量并无明显差异,有很好的临床应用价值,可提高测量效率及准确性。