成年斑马鱼病理标本全鱼石蜡制片与分析

以斑马鱼成鱼病理标本为材料,在传统石蜡制片方法的基础上,结合斑马鱼成鱼的结构特点,对切片质量有较大的影响因素,包括固定、脱钙、软化、透明、浸蜡、染色等制片环节进行了系列反复的研究,探讨出制备方法。结果显示,使用Dietrich's固定液固定整尾斑马鱼,脱钙后,将鱼体沿矢状面、冠状面、横断面切开进行脱水、透明及包埋,经Mollifex固定液软化后,对各截面进行切片,包埋的组织块能切出连续的蜡带,切片完整,经HE染色可清晰地观察到脑、肝、肾、心、肠道等器官的细胞和组织结构。

埃及伊蚊硫激肽及其受体基因的鉴定和基因敲低株的转录组变化

目的通过探究埃及伊蚊(Aedes aegypti)硫激肽(sulfakinin,SK)及其受体(sulfakinin receptor,SKR)功能,为研发以神经肽及其受体为靶点的新型杀虫剂奠定一定的实验基础及理论依据。方法通过生物信息学分析及规律间隔成簇短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CRISPRassociated protein9,Cas9)敲除技术对埃及伊蚊硫激肽及其受体基因的功能进行探究,然后利用RNA干扰技术抑制成蚊中硫激肽或其受体的表达,最后利用转录组测序技术筛选干扰组与对照组之间的差异表达基因并进行功能分析。结果生物信息学分析发现埃及伊蚊中仅存在1个硫激肽受体,此外在构建埃及伊蚊硫激肽及其受体基因突变株的过程中发现,G0代突变株中只有2%的蚊子突变形成嵌合体,其中大量雄性嵌合体死亡,只有14%的雌性嵌合体能够产卵,因此,最终没有产生有效的G1代突变体。转录组数据表明,与对照组相比,干扰硫激肽基因后蚊虫体内有181个基因表达出现显著差异,其中62个基因显著上调,119个基因显著下调。同时,干扰硫激肽受体后110个基因表达存在显著性差异,其中20个基因上调,90个基因下调。将2组数据进行交叉分析发现有46个基因在干扰硫激肽或其受体后表达量均发生显著变化,其中仅4个基因上调,其余42个基因均显著下调,并且差异表达基因主要富集在代谢通路、内分泌系统及消化系统。结论硫激肽及其受体基因有较高的保守性,可能主要参与调节埃及伊蚊能量代谢与消化功能,从而在调控昆虫生长发育过程中发挥重要作用。