海南黄灯笼椒辣椒素合成酶基因克隆及表达研究

辣椒素是辣椒果实最重要的品质性状,在食品、医药和工业上都具有重要应用前景,其含量高低决定辣椒辣度大小。辣椒素合成酶(CS)被认为是调控辣椒素合成过程关键酶,此研究根据Genbank已经报道的辣椒素合成酶csy1基因序列设计引物,通过RT-PCR法从黄灯笼椒中克隆了一片段csy-h。序列分析表明,csy-h长750bp,与数据库报道的csy1基因同源性高达98%以上,蛋白质同源性达100%。表达证实,csy-h在辣椒果实胎座组织表达,且随果实发育表达量先增加后下降。研究CS活性和辣椒素含量发现,随着果实发育,胎座组织CS活性和果实辣椒素、二氢辣椒素含量均呈先上升后下降趋势,前者最高峰值出现在花后35天,后者峰值出现在花后42天。上述结果暗示,csy1基因表达量决定CS活性,后者决定辣椒素和二氢辣椒素的含量。

柱色谱分离纯化五倍子没食子酸

目的:优化筛选分离纯化五倍子没食子酸的最优树脂及其工艺参数。方法:以五倍子水提取液为原料,比较NKA-2、LS303、HZ816、HP-20、XAD-16、HPD700、HPD500、S-8、AB-8、D101、D301 11种树脂对五倍子没食子酸的静态吸附与解吸效果,筛选最优树脂。采用单因素试验、正交试验与验证性试验,优化最优树脂动态吸附与解吸五倍子没食子酸的工艺参数。结果:NKA-2树脂为最优树脂,静态吸附量与解吸率分别达到94.856 mg/g和89.64%;当主要考虑没食子酸纯度时,其最优动态吸附与解吸工艺参数是:上样质量浓度7 mg/m L,上样体积7BV,上样流速2 BV/h,洗脱剂乙醇体积分数70%,洗脱体积2.5 BV,洗脱流速3 BV/h,所获五倍子没食子酸的纯度、得率分别为90.97%和78.84%;当主要考虑没食子酸得率时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度5 mg/mL,上样体积5 BV,流速3 BV/h,洗脱剂乙醇体积分数70%,洗脱体积2.5 BV,洗脱流速2 BV/h,所获五倍子没食子酸的得率、纯度分别为85.04%和87.10%。结论:NKA-2大孔吸附树脂是一种可应用于五倍子没食子酸分离纯化的较好树脂。