拟南芥KCS12基因的克隆及其对长链脂肪酸代谢调控功能的初步分析

本课题从拟南芥中克隆了超长链脂肪酸代谢相关的功能基因At KCS12,转入酵母(INVSC1)表达系统中表达,检测酵母细胞中脂肪酸组成。脂肪酸组成结果分析表明,At KCS12使酵母中棕榈酸(16∶0)和硬脂酸(18∶0)的相对含量显著增加了,十八烯酸(18∶1)的相对含量显著减少了。这些结果共同提示,At KCS12表达的蛋白不能利用酵母中的脂肪酸作为催化底物合成超长链脂肪酸,或者At KCS12蛋白无酶活性。

拟南芥长链脂肪酰辅酶A合成酶基因(LACS1)的克隆及功能分析

长链脂肪酰辅酶A合成酶(LACS,EC6.2.1)催化脂肪酸生成脂肪酰辅酶A,进入脂肪酸的β-氧化途径。本课题从拟南芥中克隆了LACS家族成员At LACS1,构建表达载体,通过Li Ac转化法转入酵母表达系统中表达,气质色谱(GC-MS)检测酵母细胞中脂肪酸组成。结果表明,拟南芥LACS1基因全长为1 983 bp,编码一个含660个氨基酸的多肽。以含空载酵母细胞中脂肪酸组成为对照,过表达LACS1的酵母细胞中棕榈一烯酸(16:1)相对含量显著增加,硬脂酸(18:0)的相对含量显著减少。这些结果提示,At LACS1对脂肪酸代谢有一定的影响,能够活化游离的长链脂肪酸,尤其偏好C16和C18底物。

油棕(Elaeis guineensis Jacq.)中果皮3个生长时期酚类化合物含量变化分析

以油棕果为材料,分别提取3个生长时期(G1~G3)油棕中果皮酚类物质,采用高效液相色谱法分离,检测其中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、丁香酸、香草酸、阿魏酸、香豆素等成分和含量,并分析其变化规律。结果表明,所采用提取和分离方法可获得油棕中果皮中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、丁香酸、香草酸、阿魏酸、香豆素,并完全分离。油棕中果皮3个发育时期总酚类化合物含量分别为:677.6μg/10 g、1 384.1μg/10 g和1 456.2μg/10 g,表明随着油棕果实发育成熟,酚类物质含量也随之增加。可溶性游离形态(SFP)、不溶性结合形态(ISBP)和酯化形态(EFP)3种酚类化合物中ISBP和EFP的含量较为丰富;EFP呈现极显著升高趋势。7种酚酸物质中,香草酸、阿魏酸和香豆素的含量相当丰富,香草酸含量尤为凸显,3个不同发育时期的含量分别为185.9μg/10 g、959.4μg/10 g、1 009.7μg/10 g,各占总酚类化合物的27.4%、69.3%、69.3%。咖啡酸、丁香酸和香草酸随油棕中果皮发育成熟含量递增;而没食子酸、原儿茶酸和阿魏酸则呈递减趋势,其中阿魏酸最为显著。