海洋药物特色的药物分析课程教学改革与实践

药物分析课程是药学专业的主干课程,在药学研究与开发中占有重要的地位。为了适应高等学校特色专业人才培养的要求,结合海南地区海洋药物资源丰富的优势,从而开展以海洋药物为特色的药物分析课程改革与实践。优化教学内容,提升学生对海洋药物的认知,掌握常用海洋药物的分析方法,等成为本课程教育改革的重要内容。

池塘封闭循环水养殖废水脱氮的试验研究

确定封闭循环水养殖池塘系统对养殖水体的脱氮能力。循环净水系统主要有生物合成固氮、污泥吸附分离脱氮、光化学脱氮、微生物脱氮、物理脱氮等环节，采用海洋监测国家标准方法对系统中的南美白对虾（Penaeus vannamei）养殖水体进行跟踪监测。结果表明：系统对养殖水体中硝酸盐氮、亚硝酸盐氮和氨氮的去除率分别为10．37％-27．35％、22．45％-44．74％和22．00％-79．53％，脱氮解毒效果较好。

泰国产方斑东风螺养殖群体遗传多样性的RAPD分析

用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对泰国产方斑东风螺养殖群体的遗传多样性进行检测,从100个随机引物中筛选出21个引物对方斑东风螺的DNA进行扩增,结果表明：21个引物共检测到222条清晰且重复性好的条带,每个引物可扩增出4～16条带,分子量在200～2200bp之间,其中多态位点为156个,占70.27%;群体的Shannon多样性指数为0.2818,Nei基因多样性指数为0.2491;个体间最大遗传距离为0.291,最小遗传距离为0.066。通过与其他贝类遗传多样性的研究结果比较,可初步判断泰国产方斑东风螺养殖群体的遗传多样性比较丰富。

虾青素通过线粒体抑制高糖诱导的HBZY-1细胞凋亡

为了探究虾青素是否能有效改善高糖诱导的HBZY-1细胞的凋亡及其抗凋亡的机制,本研究采用CCK8法测定了正常糖和高糖环境下,不同浓度的虾青素对HBZY-1细胞活力的影响,并运用相关试剂盒测试了细胞死活比例和细胞凋亡的变化,在光镜下观察了HBZY-1细胞形态的变化,使用JC-1探针在荧光显微镜下观察了HBZY-1细胞线粒体膜电位的变化,运用Western Blot技术检测了HBZY-1细胞中促细胞凋亡蛋白bax和抑制细胞凋亡蛋白bcl-2的表达水平,运用caspase 3/7活细胞荧光实时法检测了HBZY-1细胞中的caspase 3/7活性.结果表明:虾青素可有效逆转高糖引起的细胞活力降低,能抑制高糖引起的HBZY-1细胞凋亡和细胞形态异常,并能改善线粒体膜电位和影响参与调控HBZY-1细胞的凋亡相关蛋白.由此认为:虾青素可以通过影响线粒体膜电位来改善高糖引起的肾小球系膜细胞凋亡,其有可能成为改善糖尿病肾病的潜在药物.

基于磁化原位离子液体分散液液微萃取测定天然椰子水中菊酯农药的含量

本研究建立了新型的超声辅助-Fe_3O_4磁性纳米粒子磁化-原位离子液体分散液液微萃取(UA-MISDLLME)法并结合高效液相色谱测定了天然椰子水中三种拟除虫菊酯农药的残留量.研究显示:萃取效率的影响因素包括离子液体的种类、离子液体的体积、离子交换剂的体积、Fe_3O_4磁性纳米粒子的用量、洗脱剂的种类以及超声时间等;三种拟除虫菊酯农药在0. 5～50 mg L^(-1)范围内呈现出良好的线性关系,相关系数为0. 999 4～0. 999 9,加标回收率为84. 8%～100. 6%,检测限为0. 034～0. 053 mg·L^(-1).结果表明,本方法适合于天然椰子水中三种菊酯农药残留量的检测,该方法中的超声辅助以及磁化原位交换反应简化和加快了样品前处理过程,并且绿色溶剂-离子液体种类的选择范围被进一步拓宽.

天然产物中齐墩果酸和熊果酸提取和分析方法研究进展

对不同天然产物中熊果酸和齐墩果酸的提取纯化方法及分析方法进行综述,并比较了各方法的优缺点。

褐藻素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞纤维化病变的缓解作用

为了探讨褐藻素(fucoxanthin,FX)是否对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞的纤维化病变有缓解作用,同时也为了探究其作用机制,本研究通过Western Blot方法,检测了细胞外基质的主要成分—纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和四型胶原(collagen IV,Col IV)的表达;利用免疫荧光方法观察了细胞中FN的含量;采用罗丹明标记鬼笔环肽对细胞骨架进行染色,观察了细胞骨架的变化;使用相关试剂盒检测了细胞内活性氧的变化、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的酶活性以及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量;利用Western blot方法观察了细胞炎症相关因子ICAM-1和TGF-β1的表达.结果表明:在高糖刺激下的肾小球系膜细胞中蛋白FN和Col IV的含量显著升高,细胞呈现肥大状态;FX的处理在一定程度上可缓解上述病理现象,FX处理后高糖诱导升高的活性氧和MDA含量显著降低,而高糖诱导的下调的SOD活性被显著升高;高糖下显著升高的炎症因子—细胞间黏附分子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的蛋白水平同样被FX逆转.由此认为:FX可以减少高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞的细胞外基质成分的积累,而且可以缓解细胞肥大现象,其机制可能与细胞内氧化应激减轻和炎症因子表达减少有关.研究提示:褐藻素对糖尿病肾病具有一定的保护效应.

封闭循环水集约化养殖池塘的生态设计与性能研究

在分析传统池塘养殖和工厂化养殖生态系统结构与功能缺陷的基础上,运用生态补偿和环境补偿原理对传统养殖池塘的结构、功能与过程进行了生态设计,并在实际生产条件下对新型封闭循环水集约化水产养殖池塘进行了性能测试。结果表明,封闭循环水集约化水产养殖池塘的结构有利于垂直混合增氧、集污和引污,具有持续高效地分离污染物的净水功能,水环境稳定利于水产动物生长,长期运行并不造成硝态氮、氨氮等的积累,可不洗塘、不肥水、不换水、不排水,达到废水零排放,对于传统池塘养殖生产方式转变和产业可持续发展具有重大意义。

抗菌肽Lc-NKlysin-1a抗氧化活性及其稳定性

为研究海洋抗菌肽Lc-NKlysin-1a的抗氧化活性,通过分光光度法测定Lc-NKlysin-1a对DPPH自由基、羟基自由基的清除作用和还原力,以及不同因素对DPPH自由基清除率的影响,并通过MTT法研究其对H_2O_2诱导293FT细胞损伤的保护作用。结果表明:Lc-NKlysin-1a不仅具有还原力,而且对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,对DPPH自由基清除的IC_(50)为0.6396mg/mL;在不同温度、pH、盐浓度、食品辅料和金属离子影响下,Lc-NKlysin-1a对DPPH自由基的清除作用稳定;在浓度为(1～100)μg/mL时,Lc-NKlysin-1a对293FT细胞几乎无毒性,在用(1～100)μg/mL Lc-NKlysin-1a和400μmol/L的H_2O_2同时处理293FT细胞时,细胞存活率均大于400μmol/L的H_2O_2处理的细胞存活率,且用100μg/mL Lc-NKlysin-1a和H_2O_2同时处理细胞时,存活率比用H_2O_2单独处理时高出20%。Lc-NKlysin-1a在(1～100)μg/mL时对H_2O_2诱导的细胞损伤具有保护作用。研究结果为Lc-NK-lysin-1a在食品、化妆品、保健品和医药等领域的应用提供了一定的理论依据。

氯化壳聚糖季铵盐纳米粒对树突状细胞的转染效率研究

目的探讨不同修饰度氯化壳聚糖季铵盐纳米粒对小鼠骨髓来源树突状细胞转染效率的影响,为以壳聚糖纳米粒为佐剂的树突状细胞生物免疫疫苗研究提供理论依据。方法采用卤代法修饰合成不同修饰度的氯化壳聚糖季铵盐;离子交联法制备不同修饰度的氯化壳聚糖季铵盐/p EGFP-C1纳米粒;激光粒度仪测粒径和Zate电位,酶保护实验评价纳米粒质量。用改良Insba法,体外分离培养树突状细胞,用不同修饰度的氯化壳聚糖季铵盐纳米粒做体外转染实验,验证其细胞毒性和转染效率。结果纳米粒粒径:(220±15)nm,Zeta电位:(29±5)m V,包封率99.8%,氯化壳聚糖季铵盐纳米粒对树突状细胞体外转染效率比壳聚糖纳米粒提高了10%。结论氯化壳聚糖季铵盐纳米粒能有效提高p EGFP-C1质粒在树突状细胞中的转染效率。