药用植物内生菌及其对道地药材影响的研究进展

对近年来药用植物内生菌的研究进展及其对中药材道地性的影响进行综述,以期为内生菌资源的利用和中药材的开发提供参考。

变性剂对橡胶籽中β-葡萄糖苷酶结构及酶活的影响

本文以橡胶籽蛋白溶液为原料,分离得到提取β-葡萄糖苷酶,研究了不同浓度的变性剂对β-葡萄糖苷酶酶活的影响,并通用激光粒径分析和分子荧光光谱分析等方法研究了变性剂对酶的空间结构的影响。结果表明:β-葡萄糖苷酶的酶活随变性剂浓度的增加大体上呈现下降趋势,温度的增加会加速下降的速度,通过对β-葡萄糖苷酶的空间结构分析发现尿素变性酶后,酶溶液的分子粒径变小,推断为β-葡萄糖苷酶的多聚体结构发生解聚。低浓度尿素在1 h时间内对β-葡萄糖苷酶有激活作用,酶活力明显提高,表明酶的空间结构变化与尿素浓度大小有关。通过分子荧光光谱分析发现随酶溶液中尿素浓度增加,荧光峰位红移,表明色氨酸残基不断暴露,蛋白质分子结构不断展开。本研究为进一步开发利用橡胶籽中β-葡萄糖苷酶提供了实验依据。

橡胶籽β-葡萄糖苷酶固定化酶学性质的研究

采用戊二醛交联的方法将来源于橡胶籽的β-葡萄糖苷酶固定到壳聚糖球上,对比研究了固定化酶和游离酶的酶学性质。固定化后的β-葡萄糖苷酶最适温度为65℃,比游离酶提高了10℃;固定化酶热稳定性相比于游离酶,在55～70℃范围内有所提高;固定化酶的最适pH为6.0,游离酶的pH为5.5;固定化酶与游离酶相比,其耐酸耐碱性有所提高;金属离子对固定化酶的抑制作用与游离酶相比有所改变;葡萄糖对固定化酶的影响相对于游离酶更为明显;以p-NPG为底物,固定化酶的Km为3.5 mmol/L,游离酶的Km为1.75 mmol/L;固定化酶在操作和贮藏方面的性质都有明显提高。固定化酶相对游离酶部分酶学性质得到显著提高和改善,有效拓宽了其使用范围,提高了其应用价值。

固定化橡胶籽β-葡萄糖苷酶的制球工艺研究

将从橡胶籽中提取的β-葡萄糖苷酶采用戊二醛交联吸附的方法固定到壳聚糖微球上,在单因素实验基础上,以壳聚糖浓度、乙酸浓度及凝结液配比为自变量,酶活回收率为响应值,采用响应面法对制球工艺进行优化。最优制球工艺为:2.5%壳聚糖、2%乙酸、NaOH浓度为7.5%、凝结液7.5%NaOH:95%乙醇(v/v)=1:1、静置时间为14 h,固定化酶酶活回收率为74.97%。