芒果新病害露水斑病病菌9种单剂间复配增效配比筛选

为了给芒果新病害露水斑病防治提供药剂复配依据,采用Horsfall法,对初筛获得的9种单剂进行了室内复配筛选。结果表明,在本次测试的33个组合198个配比中,毒力比率大于1.2的配比有26个。其中,吡唑醚菌酯∶丙环唑以1∶4,咪酰胺∶多抗霉素B以2∶3的毒力比率约为2.0,增效最明显;其次是咪酰胺∶多抗霉素B以1∶4的配比,毒力比率为1.72;吡唑醚菌酯∶氟硅唑以1∶4,吡唑醚菊酯∶戊唑醇以2∶3,多抗霉素B∶氟硅唑以1∶4或3∶2,溴菌腈∶丙环唑以3∶2,多抗霉素B∶溴菌腈以2∶3,吡唑醚菌酯∶丙环唑以2∶3配比时,毒力比率介于1.51~1.63之间,也有较好的增效作用。可见,吡唑醚菌酯和丙环唑以1∶4、咪酰胺和多抗霉素B以2∶3的配比应用潜力较大,值得进一步研究。

咪鲜胺和吡唑醚菌酯对杧果炭疽病菌的复配作用研究

为筛选对杧果胶孢炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides具有较好防治效果的药剂复配增效配方,采用菌丝生长速率法和Wadley法测定咪鲜胺和吡唑醚菌酯对胶孢炭疽病菌的室内抑菌效果及不同复配比的作用。结果表明,咪鲜胺和吡唑醚菌酯对胶孢炭疽菌的抑菌效果较好,EC_(50)值分别为0.055 9和0.055 8mg/L。二者复配获得6个增效配比,其中以咪鲜胺和吡唑醚菌酯配比为2∶8的增效系数最大,为6.564,EC_(50)值最小,为0.008 5mg/L。

查尔酮对11种杧果病害病原菌的抑菌活性测定

利用生长速率法测定杧果炭疽病、蒂腐病、畸形病等病原菌对查尔酮的敏感性,并以杧果胶孢炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides对代森锰锌和三唑酮的敏感性作为参照。结果表明,查尔酮对供试病原菌均具有明显抑菌效果,其中查尔酮对杧果小穴壳蒂腐病病原菌菌株PZ5(Botryosphaeria dothidea)的EC50最小,为4.958 5mg/L,对杧果畸形病病原菌菌株MMD27(Fusarium proliferatum)的EC50最大,为148.688 6mg/L。查尔酮对杧果胶孢炭疽菌的抑制效果要比代森锰锌强,但比三唑酮的抑制效果稍弱。

杧果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B克隆与敲除载体构建

为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与杧果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides致病力的关系,本试验以杧果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白保守结构域进行分析,并借助In-Fusion HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1 077bp、1 020bp,编码区有内含子(57bp)1个,推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13kDa,等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌C.gloeosporioides(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性为99%;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与杧果炭疽病菌的侵入、定殖和致病性有关。

芒果胶孢炭疽菌漆酶lac1与致病力的相关性分析

为了明确芒果炭疽病病菌(Colletotrichum gloeosporioides)漆酶与该菌侵染相关致病因子之间的关系,本文以愈创木酚为底物筛选获得的高产漆酶菌株A2为材料,测定了漆酶粗提液对芒果炭疽病病菌致病力的影响,并通过半定量RT-PCR法,分析了在不同侵染时段漆酶基因lac1和其他酶基因的表达。结果表明,漆酶粗提液单独不能致病,但能促进该病原菌在寄主中的扩展;在侵染过程中,lac1表达与黑色素合成酶(thd和scd)基因表达相关性更高,与细胞壁降解酶(ecg和pel)基因表达也有一定相关性,但不及前者高。芒果胶孢炭疽菌分泌的漆酶有助于该菌在侵染芒果过程中的扩展,且对侵染相关致病因子黑色素合成酶和细胞壁降解酶基因的表达有一定影响。初步推测,漆酶lac1除了能通过降解芒果组织中的酚类物质、促进病原菌的扩展之外,也可以通过干扰与致病力相关的黑色素合成和细胞壁降解酶的产生来影响芒果胶孢炭疽菌致病力。