海南省西部地区莱姆病血清学调查

目的了解海南省西部地区关节炎或神经性疾病患者的莱姆病感染状况。方法在东方市收集莱姆病疑似病例血清400份,儋州市收集莱姆病疑似病例血清500份,均为关节炎或神经性疾病患者。采用间接免疫荧光法(IFA)对血清标本进行莱姆病抗体初筛检测;并采用免疫印迹法(WB)对IFA检测阳性的血清标本进行确诊实验。结果IFA方法检测血清样本900份,35份阳性,阳性率为3.89%。应用WB法对上述35份IFA阳性血清样本进行检测,结果15份阳性,阳性率为1.67%。不同年龄人群均有莱姆病螺旋体感染,其中,≤20岁阳性率最高,为11.76%(4/34),差异有统计学意义(χ^2=24.108,P<0.001);莱姆病螺旋体感染在性别和症状间差异无统计学意义(χ^2=0.001,P=0.975;χ^2=0.011,P=0.917)。结论证实了海南省西部地区人群中存在莱姆病,建议当地医生在诊治关节炎和神经性疾病患者时,应排除莱姆病的可能。

原发性皮肤隐球菌病一例

本文报道一例原发性皮肤隐球菌病,患者因右前臂红肿,皮肤破溃入院。脓液涂片见大量酵母样真菌孢子,菌体外周有荚膜包绕。真菌培养取乳白色菌落进行飞行时间质谱鉴定为新生隐球菌。抗感染治疗后行游离植皮手术,出院后继续口服氟康唑,60天后皮损基本愈合。

海南省2311例关节炎症状患者的莱姆病抗体血清学研究

目的探讨海南省关节炎症状患者的莱姆病感染状况,为莱姆病的防控提供依据。方法采用抽样调查方法,2013至2018年在海南省8个市(县)(海口市、三亚市、儋州市、东方市、文昌市、琼海市、琼中县、五指山市)的医疗机构,对其进行抽样调查,收集2 311例关节炎症状就诊的患者血清标本,并对临床资料进行描述性研究。采用间接免疫荧光法(IFA)对血清标本进行莱姆病抗体初筛检测,并采用免疫印迹法(WB)对IFA检测阳性的血清标本进行确诊实验。采用χ^(2)检验进行统计分析。结果 IFA方法检测血清样本2 311份,166份阳性,阳性率7.18%。进一步用 WB方法确认,62份阳性, 莱姆病抗体阳性率为2.68%(62/2 311)。海南省不同地区关节炎症状患者的莱姆病抗体阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=40.636,P<0.001),琼中县阳性率最高,为8.81%(14/159);儋州市阳性率次之,为5.62%(5/89);东方市阳性率最低,为0.51%(2/394)。莱姆病血清抗体阳性率男性及女性分别是2.79%(33/1 182)和2.57%(29/1 129);各年龄组间的抗体阳性率在1.74%~3.64%,在性别和年龄间差异无统计学意义(χ^(2)=0.110,P=0.740;χ^(2)=1.938,P=0.747)。结论海南省8个市(县)均存在伯氏疏螺旋体感染导致的关节炎症状患者,但莱姆病抗体阳性率各市(县)存在差异,以琼中县最高。

新型冠状病毒实时荧光RT-PCR检测的性能验证

目的对实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸进行方法学评价.方法依据ISO15189和CNAS-GL039性能评价文件及厂家声明,对本法精密度、准确度、检测下限、特异性和抗干扰能力进行验证.结果RT-PCR试剂检测SARS-CoV-2核酸结果的精密度均小于允许变异度,准确性和重复性的符合率均为100%,检测下限为1.0×103 copies/mL,内源性抗干扰能力CV<5%,与感染部位相同或感染症状相似的其他病原体等无交叉反应.结论RT-PCR检测方法灵敏度高,重复性好,抗干扰力强,检测下限和特异性均符合要求,可用于临床检测.

检出同时携带blaIMP-45和armA的多重耐药假单胞菌及其基因环境解析

目的探讨多重耐药假单胞菌属细菌对碳青霉烯类和氨基糖苷类两类抗生素耐药的分子机制。方法2012年6月至2013年3月,海南省三亚市人民医院检验科收集到6株产碳青霉烯酶铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌,来自该医院4个不同的病区。VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪和16S rDNA扩增测序比对鉴定核实细菌种属。E-test法测定菌株对临床常用抗生素最低抑菌浓度。Carba NP法检测菌株是否产碳青霉烯酶。PCR扩增和测序比对明确碳青霉烯酶和氨基糖苷类甲基化酶的基因亚型。PCR和重叠PCR(overlap PCR)扩增Ⅰ型整合子及重要耐药基因侧翼基因环境,测序并拼接PCR产物明确耐药基因座位排列。SpeI酶切后脉冲场凝胶电泳(SpeI-PFGE)判断菌株之间亲缘关系,S1酶切后脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)进一步明确菌株间携带质粒的大小及其关联。结果6株耐碳青霉烯类抗生素的假单胞菌属细菌,其中有3株为恶臭假单胞菌,3株为铜绿假单胞菌,且均为Carba NP试验阳性,产B组碳青霉烯酶。PCR进一步确证携带blaIMP-45,介导对除氨曲南外所有的β-内酰胺类药物耐药,且同时携带16s rRNA甲基化酶armA基因,介导对所有的氨基糖苷类药物耐药。基因环境的研究显示blaIMP-45和armA共同定位于Tn1548相关区域。SpeI-PFGE电泳表明除2株铜绿假单胞菌外,其他菌株彼此之间都不是近缘的克隆。S1-PFGE电泳结果表明这些菌株都携带大质粒(300~600 kb),质粒的大小并不完全一致。结论在我院内检出同时携带blaIMP-45和armA的铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌,这些耐药基因在不同菌株之间的播散可能涉及质粒的接合转移及含耐药基因的可移动元件在不同种间的水平转移。