沉默环指蛋白187对人高转移性肝癌细胞裸鼠移植瘤生长机制的研究

目的观察沉默环指蛋白(RNF)187基因的慢病毒载体对人高转移性肝癌细胞裸鼠中成瘤效应的影响。方法将靶向RNF187基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒(LV-shRNA-RNF187)和阴性对照慢病毒(LV-shRNA-NC)转染至高转移性肝癌细胞(MHCC97-H),并分别作为vshRNF187组和vshNC组,未转染MHCC97-H细胞作为空白对照(Control)组。将3组细胞系接种于裸鼠后观察裸鼠移植成瘤情况及移植瘤生长情况。4周后测量肿瘤的体积和重量,绘制移植瘤生长曲线。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测裸鼠移植瘤中RNF187的表达。计量资料进行t检验分析,计数资料组间分析采用χ^(2)检验。结果3组裸鼠接种癌细胞后均有肿瘤形成。vshRNF187组裸鼠的肿瘤体积[(746±154)mm],明显低于vshNC组和Control组[(1502±315)、(1590±418)mm],差异有统计学意义(t=5.885、5.083,P<0.01)。vshRNF187组裸鼠瘤体重量[(0.79±0.13)g],低于vshNC组和Control组[(1.57±0.32)、(1.63±0.41)g],差异有统计学意义(t=5.618、4.926,P<0.01)。vshRNF187组瘤组织中RNF187 mRNA的表达量(0.39±0.06)明显低于vshNC组和Control组(1.03±0.06、1.02±0.07,t=21.192、1.623,P<0.01),vshRNF187组瘤组织中RNF187蛋白的表达量(0.365±0.049)明显低于vshNC组和Control组(1.018±0.123、1.168±0.137,t=13.663、14.798,P<0.01),差异均有统计学意义。结论沉默RNF187基因能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。