2014—2021年海南省临床分离细菌的分布及其耐药性分析

目的了解2014—2021年海南省临床标本中常见分离细菌的分布及耐药情况变迁,为海南省医疗机构临床抗菌药物的合理应用提供依据。方法按照全国细菌耐药监测网技术方案分析参考折点和药物种类,利用WHONET 5.6软件对海南省32家全国细菌耐药监测网成员单位上报的数据进行分析。结果2014—2021年海南省临床分离菌株中,革兰阳性菌占首位的为金黄色葡萄球菌,革兰阴性菌占首位的为大肠埃希菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率呈现稳中有降的趋势,其对不同抗菌药物的耐药率分别为阿米卡星2.1%~22.6%、庆大霉素8.7%~27.6%、红霉素70.6%~84.3%、克林霉素46.3%~60.5%和利福平9.5%~18.5%,分别高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌对应的耐药率(阿米卡星0.3%~2.3%、庆大霉素2.9%~6.2%、红霉素33.8%~45.1%、克林霉素16.1%~24.9%和利福平2.8%~6.1%)。耐万古霉素粪肠球菌和屎肠球菌检出率均呈下降的趋势;耐青霉素肺炎链球菌和耐亚胺培南铜绿假单胞菌的检出率均呈现下降的趋势;鲍曼不动杆菌对常规抗菌药物的耐药率呈现上升的趋势,尤其对头孢哌酮钠舒巴坦钠的耐药率增长最快(4.5%~35.0%);类鼻疽伯克霍尔德菌对常规抗菌药物的耐药率较低。结论2014—2021年海南省细菌谱的分布与国家监测的数据呈现不尽相同的特点,革兰阳性菌占首位的为金黄色葡萄球菌;革兰阴性菌对碳青霉烯类抗菌药物均有一定范围的耐药率;类鼻疽伯克霍尔德菌对常规抗菌药物呈现较高的敏感率。

海南某三甲医院2018—2020年血培养分离细菌分布及耐药性变迁

目的了解海南某三甲医院血培养近三年分离细菌分布情况及其对临床常用抗菌药物的耐药性及敏感性。方法回顾性分析海南省人民医院2018年1月1日—2020年12月31日门急诊及住院患者血液标本细菌分离情况及其药物敏感试验结果,药物敏感试验采用最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)法,依据2020年美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判定试验结果。采用WHONET 5.6软件统计药敏结果。结果 2018—2020年血液标本共分离出2 488株非重复菌株,其中革兰阴性菌(1 378株,55.4%),革兰阳性菌(1 110株,44.6%)。排前5位的细菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌(606株,24.4%)、大肠埃希菌(458株,18.4%)、肺炎克雷伯菌(245株,9.9%)、金黄色葡萄球菌(182株,7.3%)、铜绿假单胞菌(139株,5.6%)。2018—2020年,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为16.7%、20.0%、16.9%,30.8%、35.8%、37.8%。未检出耐万古霉素、替考拉宁、替加环素的葡萄球菌。肠球菌属中的粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率均低于屎肠球菌。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感(敏感率>90.0%)。鲍曼不动杆菌的耐药情况较严重且对碳青霉烯类药物的耐药率逐年递增。结论该院近3年血液标本主要分离菌以革兰阴性菌为主,分离菌构成及排序无明显波动。分离菌对常用抗菌药物均有不同程度的耐药且耐药性呈总体上升趋势,应加强细菌耐药性监测,合理使用抗菌药物。

1例类鼻疽脓毒症患者的全程个体化药学监护

目的为类鼻疽脓毒症(MS)抗菌药物治疗方案的调整、不良反应的识别和个体化药学监护提供参考。方法临床药师利用血药浓度和基因检测全程参与1例MS患者强化期和根除期治疗过程。通过测定β-内酰胺类和复方磺胺甲噁唑(TMP/SMZ)血药浓度并计算其药代动力学与药效学(PK/PD)参数,结合文献对MS抗菌药物治疗方案进行调整;同时通过高通量测序检测药物相关基因多态性,对药物不良反应的发生原因进行分析并进行处理。结果临床药师利用血药浓度和基因检测手段,提出了亚胺培南西司他丁钠(IMP)给药剂量调整建议,分析了多种药物不良反应的发生原因;通过测定β-内酰胺类药物和TMP/SMZ血药浓度计算PK/PD靶标,通过查询指南和文献为临床医生解释类鼻疽患者脓毒症期和非脓毒症期状态下的达标情况;利用血药浓度和基因检测分析MS患者神经毒性与IMP cmin的相关性,并发现肾毒性与TMP/SMZ的cmax无关,而与患者饮水量相关。经全程抗菌药物治疗后,患者病情好转出院,不良反应得到有效处理。结论临床药师基于抗菌药物血药浓度和基因检测结果解读情况协助临床医生制定MS治疗方案,并为患者提供全程用药监护,提高了临床药物治疗的安全性和有效性。

LILRB1和LILRB4在单核细胞分化急性髓系白血病诊断中的意义

目的:探讨LILRB1和LILRB4在单核细胞分化急性髓系白血病(M-AML)诊断中的意义。方法:通过直接荧光标记流式细胞术检测109例急性白血病患者白血病细胞LILRB1、LILRB4、CD64和CD14的表达。结果:LILRB1在M-AML、NM-AML和ALL患者中表达阳性率分别为81.6%(31/38)、0(0/49)、27.3%(6/22),差异有统计学意义(P<0.01),其中M-AML组的阳性率明显高于NM-AML组和ALL组,ALL组阳性率明显高于NM-AML组;LILRB4在M-AML组中的表达阳性率为81.6%(31/38),在NM-AML和ALL组中均不表达(0/49,0/22),差异有统计学意义(P<0.01);单独检测LILRB1、LILRB4诊断M-AML敏感性均为81.6%,联合检测的敏感性为86.8%,特异性均为100%,优于CD64(86.8%,61.2%)、CD14(31.6%,100%)。结论:LILRB1、LILRB4单独检测或联合检测对检出M-AML均具有极高的灵敏度和特异度,可作为诊断M-AML的新指标。

MBD2对Th2/Th17细胞平衡的调控及其在哮喘中的作用研究

目的:探究甲基CpG结合区域蛋白2(MBD2)在哮喘中的作用及其对Th2/Th17分化的影响。方法:在条件性敲除CD4+T细胞中MBD2表达的小鼠构建以中性粒细胞浸润为主的哮喘模型,并将小鼠分为4组:WT生理盐水组(A组)、WT哮喘组(B组)、CD4CreMBD2fl/fl生理盐水组(C组)、CD4CreMBD2fl/fl哮喘组(D组),每组10只。应用RT-PCR和Western blot实验检测MBD2在各组小鼠脾脏组织中的表达;使用乙酰胆碱(Mch)激发试验检测各组小鼠的气道高反应;收集小鼠肺泡灌洗液(BALF),使用血细胞计数法计算其中的细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞数量,ELISA法检测细胞因子IL-4与IL-17的表达,HE染色观察各组小鼠肺组织的病理学改变;免疫磁珠分选各组小鼠脾脏中的CD4+T细胞,流式细胞术、RT-PCR及ELISA分别检测Th2、Th17细胞比例及其相关细胞因子的表达水平;分离并培养小鼠na?ve CD4+T细胞,通过慢病毒载体以靶向沉默细胞中MBD2基因表达,流式细胞术检测其对na?ve CD4+T细胞Th2与Th17分化的影响。结果:与A、B组小鼠相比,C组与D组小鼠脾脏组织中MBD2的mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01);A组与C组小鼠肺组织结构正常,而B组小鼠肺组织中支气管黏膜充血水肿,管腔狭窄,黏膜上皮细胞出现大量坏死脱落,大量炎症细胞浸润,D组介于A组与B组之间;与A组小鼠相比,B组与D组小鼠的气道反应性显著增高(P<0.05),且BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、IL-4及IL-17均显著增加(P<0.05),C组中仅有嗜酸性粒细胞及IL-4明显增加(P<0.01);而与B组相比,D组小鼠中嗜酸性粒细胞及IL-4表达均明显增加(P<0.05)。在脾脏淋巴细胞中,B组与D组小鼠的Th2、Th17细胞比例、GATA3和RORγt mRNA及IL-4与IL-17表达水平均较A、C组小鼠显著增加(P<0.01),与B组相比,D组小鼠中以Th2细胞及相关细胞因子占主导地位(P<0.05);成功利用慢病毒载体沉默小鼠na?ve CD4+T细胞MBD2的表达,且沉默其表达后能显著促进Th2细胞的分化比例(P<0.05),而Th17细胞比例明显降低(P<0.05)。结论:敲除CD4+T细胞中MBD2基因表达可通过促进Th2细胞及IL-4细胞因子表达,而抑制Th17细胞及IL-17表达从而改善以中性粒细胞浸润为主的重症哮喘。

SPD-1、CYTL1在类风湿关节炎患者中的水平及其与免疫指标的相关性

目的 探讨可溶性PD-1(SPD-1)、细胞因子样蛋白1(CYTL1)在类风湿关节炎(RA)患者中的水平及其与免疫指标的相关性。方法 选取2019年10月至2020年10月该院收治的RA患者128例作为研究组,同期在该院体检的健康志愿者60例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测两组SPD-1、CYTL1水平,采用多功能液相芯片分析平台检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、类风湿因子(RF)和C-反应蛋白(CRP)水平,采用流式细胞仪检测血清CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例和B细胞比例。采用多元线性回归分析RA患者中SPD-1、CYTL1水平与部分免疫指标之间的相关性。结果 研究组SPD-1水平高于对照组(P<0.05),研究组CYTL1水平低于对照组(P<0.05);研究组TNF-α、RF、CRP水平及B细胞比例均高于对照组(P<0.05),研究组IFN-γ、IL-4、IL-17水平及CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例均低于对照组(P<0.05);多元线性回归分析结果显示,IL-4水平对RA患者的SPD-1、CYTL1水平产生影响(P<0.05)。结论 RA患者的SPD-1、CYTL1水平高于健康人,同时RA患者机体的部分免疫指标发生了一系列的生理化学变化,SPD-1、CYTL1水平与免疫指标IL-4水平存在相关性。

可溶性程序性死亡受体-1和干扰素调节因子4在类风湿关节炎患者血清中的表达与疾病活动性、免疫炎症的关系

目的检测可溶性程序性死亡受体-1(sPD-1)、干扰素调节因子4(IRF4)在类风湿关节炎(RA)患者血清中的表达并探讨其临床意义。方法选取RA患者100例为研究对象(RA组),其中缓解期患者50例(RA缓解组),活动期患者50例(RA活动组)。另外,选取同期接受治疗的骨关节炎(OA)患者50例(OA组)和进行体检的健康者50例(对照组)。采集静脉血,分离血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测受试者血清sPD-1、IRF4、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)表达水平,采用Pearson法分析RA患者血清sPD-1、IRF4水平与血清IL-4、IL-17、IFN-γ水平的相关性。结果与对照组比较,OA组和RA组受试者血清sPD-1、IRF4、IL-4、IL-17、IFN-γ水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与OA组比较,RA组受试者血清sPD-1、IRF4、IL-4、IL-17、IFN-γ水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与RA缓解组比较,RA活动组血清sPD-1、IRF4水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);RA患者血清sPD-1水平与血清IL-4、IL-17、IFN-γ水平均呈正相关(P<0.05);RA患者血清IRF4水平与血清IL-4、IL-17、IFN-γ水平均呈正相关(P<0.05)。结论RA患者血清中sPD-1、IRF4表达水平均升高,且与疾病活动性及患者体内炎症因子水平异常有关,有潜力成为新的治疗靶点。

儿童偶发分枝杆菌脓毒症1例报告

目的分析儿童偶发分枝杆菌脓毒症的临床特点。方法回顾分析1例儿童偶发分枝杆菌脓毒症的临床资料,并复习相关文献。结果患儿,男,3岁8个月,以发热、咳嗽等呼吸道感染为表现,血培养发现偶发分枝杆菌,经阿奇霉素抗感染治疗有效。结论偶发分枝杆菌属于非结核分枝杆菌,常规细菌培养不易检出。儿童感染偶发分枝杆菌感染罕见,临床表现无特异性,及时抗感染治疗,预后良好。

儿童结核感染合并类鼻疽伯克霍尔德氏菌脓毒症1例

目的分析儿童类鼻疽伯克霍尔德氏菌脓毒症合并结核感染的临床特点。方法回顾分析1例儿童类鼻疽伯克霍尔德氏菌脓毒症合并结核感染的临床资料。结果患儿,男,9岁,以发热、头痛、呕吐为临床表现,既往结核感染不规则治疗,血培养发现类鼻疽伯克霍尔德氏菌,亚胺培南西司他丁钠联合利福平、异烟肼抗感染治疗有效,随访至今无复发。结论类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染临床特点复杂多样,常规抗生素治疗效果欠佳,在儿童感染中少见,儿科医生应充分重视,早诊断,早治疗。

T2DM孕妇CRP、sICAM-1、25-(OH)D水平与PE发病的关系及对妊娠结局的预测价值

目的探讨2型糖尿病(T2DM)孕妇血清C反应蛋白(CRP)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、25羟维生素D[25-(OH)D]水平变化与子痫前期(PE)发病的关系及对妊娠结局的预测价值。方法选取2018年1月至2020年12月海南省人民医院收治的148例T2DM孕妇作为研究对象,根据是否发生PE分为无PE组(129例)和PE组(19例)。比较两组孕妇一般资料及血清CRP、sICAM-1、25-(OH)D水平,分析上述生化指标与PE的关系及对妊娠结局的预测价值。结果两组孕妇前次妊娠PE病史、吸烟史、CRP、sICAM-1、25-(OH)D、胎盘生长因子(PLGF)、平均动脉压(MAP)水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,校正前次妊娠PE病史、吸烟史混杂因素后,CRP、sICAM-1、25-(OH)D、PLGF、MAP仍与PE的发生有关(P<0.05);不同妊娠结局孕妇血清CRP、sICAM-1、25-(OH)D水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);CRP、sICAM-1、25-(OH)D联合检测预测不良妊娠结局的受试者工作特征曲线下面积[0.899(95%CI:0.839~0.943)]最大。结论血清CRP、sICAM-1、25-(OH)D水平异常变化与T2DM孕妇并发PE有关,孕期检测3项血清指标水平对评估PE发生的风险及预测妊娠结局有重要价值。

哌拉西林他唑巴坦对类鼻疽伯克霍尔德菌的体外抗菌活性评估

目的评估哌拉西林他唑巴坦体外抗类鼻疽伯克霍尔德菌的活性,为临床用药提供理论依据。方法采用E-test法,对临床分离的109株类鼻疽伯克霍尔德菌进行哌拉西林他唑巴坦最低抑菌浓度(MIC)的检测,计算MIC50和MIC90,与有CLSI敏感性判断标准的亚胺培南、强力霉素、复方磺胺甲噁唑、头孢他啶、四环素、阿莫西林克拉维酸及有EUCAST敏感性判断标准的美罗培南药敏检测结果进行比较。结果所检测的8种抗菌药物的MIC50分别为哌拉西林他唑巴坦0.25/4μg/mL、亚胺培南0.5μg/mL、美罗培南0.5μg/mL、强力霉素0.5μg/mL、复方磺胺甲噁唑1μg/mL、头孢他啶1μg/mL、四环素2μg/mL、阿莫西林克拉维酸2μg/mL;MIC90分别为哌拉西林他唑巴坦0.5μg/mL、亚胺培南0.5μg/mL、美罗培南1μg/mL、复方磺胺甲噁唑2/38μg/mL、头孢他啶2μg/mL、强力霉素2μg/mL、四环素4μg/mL、阿莫西林克拉维酸4μg/mL。所测有CLSI判断标准的6种抗菌药物敏感性显示,亚胺培南、头孢他啶、阿莫西林克拉维酸的敏感性均为100%,其他药物敏感性依次为强力霉素99.08%,复方磺胺甲噁唑95.41%,四环素94.49%。结论哌拉西林他唑巴坦体外对类鼻疽伯克霍尔德菌的MIC50和MIC90均低于其他7种抗菌药物,表明其在体外对该菌有较强的抗菌活性,结合其体内药代学特点,临床可尝试使用以获取体内对该菌药效学的评估。

致血液感染的活泼瘤胃球菌的分离与鉴定

目的鉴定1株临床分离活泼瘤胃球菌。方法取2020年8月就诊于海南省人民医院的1例败血症患者的血液标本进行细菌培养、革兰染色,采用Vitek 2 Compact生化鉴定和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)结合16S rRNA PCR扩增及测序鉴定分离株。结果该分离菌为革兰阳性链球菌,专性厌氧,MALDI-TOF MS鉴定置信度为83.7%;16S rRNA PCR产物为1446 bp,与已知活泼瘤胃球菌ATCC 29149^(T)序列号(NR 036800.1)16S rRNA基因同源性为99%,由分离株的系统进化树可知,该分离菌与标准菌株活泼瘤胃球菌ATCC 29149^(T)位于同一分支。结论常规生化方法无法鉴定出该菌,16S rRNA检测与MALDI-TOF MS结合可用于活泼瘤胃球菌鉴定。

2000-2020年海口市类鼻疽病的流行病学和临床特征分析

目的了解海口市类鼻疽病的流行病学和临床特征,以提高对类鼻疽病的认识和提出有针对性的防治措施。方法收集2000年1月至2020年9月海口市4家三甲医院收治的254例类鼻疽病患者的临床资料,回顾性分析其流行病学特征、临床表现、感染部位、疾病预后、药物敏感性等情况。结果254例类鼻疽病患者中,男性226例(88.98%),女性28例(11.02%),男女性别比为8.07∶1.00;职业以农民为主,占37.80%(96/254);年龄中位数为53岁,以41~80岁为主,占83.46%(212/254);民族以汉族为主,占89.76%(228/254)。发病季节主要集中在夏秋季,8-10月为发病高峰(117例)。患者主要分布在沿海地区,其中海口市最多(49例),东方(46例)、儋州(23例)、文昌市(21例)次之。伴有基础疾病的患者有196例(77.17%),其中糖尿病最为常见(162例)。入院以发热症状为主(211例),其次为咳嗽(108例)、咳痰(88例)。感染部位主要为血液104例(40.94%),肺部60例(23.62%),肝脾32例(12.60%)。195例患者经敏感抗生素治疗,出院时治愈37例(18.97%),好转129例(66.15%),未愈18例(9.23%),死亡7例(3.59%),主动出院4例(2.05%)。2010-2020年药物敏感性试验显示,亚胺培南(142例)、美罗培南(16例)、头孢他啶(141例)治疗敏感率均为100.00%,多西环素(25例)和复方磺胺甲噁唑(142例)治疗敏感率分别为92.00%(23/25)、99.30%(141/142)。结论男性、农民、中老年人及伴糖尿病等基础疾病人群是海口市类鼻疽病的高发人群;夏秋季为发病高峰。发热、肺部感染、肝脾脓肿等为海口市类鼻疽病的常见临床表现,亚胺培南、美罗培南、头孢他啶有较高的治疗敏感率。