索拉非尼基于Hippo/YAP及PI3K/Akt/mTOR信号通路介导细胞自噬在肝细胞癌中产生耐药机制研究进展

肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,它的形成是一个复杂的过程,其具体形成机制尚不明确,由于大多数HCC患者被诊断出来时已是晚期,通常已丧失良好的手术时机。而靶向药物的出现给当前HCC患者带来了新的希望,同时还可作为术后治疗措施,在HCC中发挥着巨大的作用。索拉非尼是第一个被用于治疗HCC的靶向药物,它可抑制肝肿瘤组织血管生成和细胞增殖,可诱导肝肿瘤细胞凋亡,进而提高部分肝癌患者的生存率。但据目前研究显示,有50%~60%HCC经治患者对该药物出现了敏感性下降。主要是由于索拉非尼使用后会抑制体内相关信号通路,从而致使耐药的发生,故进一步探索索拉非尼耐药机制,使其逆转索拉非尼耐药对于改善肝癌治疗的预后具有极其重要的临床价值。近些年来,许多学者致力研究索拉非尼通过Hippo/YAP及PI3K/Akt/mTOR信号通路介导细胞自噬与耐药性的产生有着密切联系。并探讨其耐药分子机制,使该领域获得了巨大的发展。因此,本篇文章主要从Hippo/YAP及PI3K/Akt/mTOR信号通路展开,探讨其与细胞自噬之间的关系以及介导的耐药机制,为索拉非尼治疗肝癌产生耐药性提供可靠的科学理论依据。

品管圈活动在促进肝胆术后患者早日下床活动中的应用

目的观察品管圈活动(QCC)在肝胆术后患者早日下床活动中的应用效果。方法将2014年3月15日至4月14日期间在我院肝胆胰外科实施肝胆开腹手术患者59例设为对照组(QCC活动前),将2014年7月21日至8月20日实施肝胆开腹手术患者60例设为观察组(QCC活动后),对照组按常规对患者进行术后下床活动指导,观察组在此基础上应用QCC手法对患者术后活动进行干预,即成立QCC小组,进行现状调查,找出影响肝胆术后患者早日下床活动的要因,采取有效措施进行持续质量改进。结果观察组术后早日下床活动41例,占68.3%,发生腹胀、肺部感染等并发症6例,占10.0%;对照组术后早日下床活动14例,占23.7%,发生腹胀、肺部感染并发症9例,占15.2%。结论品管圈活动的开展能有效提高肝胆术后患者的早日下床活动率,减少术后并发症的发生,促进患者早日康复。

海南黎族人群mi RNA146a单核苷酸多态性位点与肝细胞癌遗传易感性分析

目的分析海南黎族人群miRNA146a单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)遗传易感性的关系.方法选取2015年3月至2018年3月于海南省人民医院接受治疗的45例肝脏良性疾病患者为对照组,选取2014年3月至2016年3月于本院接受治疗的142例HCC患者为观察组,两组患者HBsAg均为阳性.取2组患者肝组织标本提取DNA后行PCR扩增,查找包含miRNA146a外显子在内的SNP位点,探究miRNA146a与肿瘤易感性、患者术后早期复发间的相关性.结果 HCC患者中miRNA146a rs2910164 C/C型54例,G/G型15例,C/G型73例,Logistic分析表明HCC发生的危险因素为miRNA146a rs2910164 C/G型和C/C型,HCC早期复发的危险因素为miRNA146a rs2910164 C/G型和肿瘤大小.结论 miRNA-146a rs2910164位点与海南黎族HCC患者肿瘤遗传易感性有关,HCC患者术后早期复发的危险因素为rs2910164 C/G型和肿瘤大小.

TACE治疗中晚期肝细胞癌的精细化探索

肝细胞癌(HCC)是我国常见的恶性肿瘤,且多数患者在确诊时已处于中晚期,是病死率最高的癌症之一。经典的肝动脉化疗栓塞(TACE)已成为中晚期HCC的一线治疗方法。然而中晚期HCC患者异质性较大,传统的TACE治疗存在一定局限性。为了克服这些问题,近年来出现了精细化TACE治疗策略,本综述总结了TACE治疗中晚期HCC的历史和精细化发展方向,以期为临床实践提供指导和启示。

肝癌中环状RNA的表达模式及其编码潜能的研究

目的:环状RNA作为一类特殊的非编码RNA,近些年多有报道其可以通过编码多肽的方式参与多种恶性肿瘤的演变和进展,然而其在肝癌中的研究是有限的。本研究基于RNA-seq结合在线数据库,探讨肝癌中环状RNA的表达模式并评估其编码潜能。方法:应用Novaseq 6000 PE150高通量测序仪对3对肝癌与癌旁组织行circRNA测序。生物信息学分析寻找差异性表达的circRNA并行序列分析,应用GO、KEGG和Reactome分别进行功能、通路富集分析;联合在线数据库Transcirc和Ribocirc筛选可翻译的circRNA;应用IRES finder识别IRES元件;ORFfinder识别ORF序列;m6A SRAMP识别m6A位点序列;CPAT法评估编码潜能。qPCR检测上述寻找到的差异性表达circRNA表达情况。结果:本研究共发现了416个丰度相对可观的circRNA,包括35个上调和31个下调的circRNA(均P<0.05),序列分析提示这些基因多以小分子量(长度<1 000 nt)、外显子-外显子类型及(2-5)外显子个数构成为主。GO分析显示这些表达差异性的circRNA主要富集在GTP酶活性的调节(P<0.001)、小GTP酶介导的信号转导的调节(P<0.001)、GTP酶活性阳性调节(P<0.001)(生物学过程),核散斑(P=0.016)(细胞成分),GTP酶调节因子活性(P<0.001)、GTP酶激活因子活性(P<0.001)(分子功能)等;KEGG分析显示这些表达差异的circRNA主要富集在补体系统(P=0.002)、mRNA监测通路(P=0.003)和血小板激活(P=0.005)等;Reactome分析显示主要富集在RHO GTP酶周期(P=0.008)、RHOA GTP酶周期(P<0.001)和CDC42 GTP酶周期(P=0.001)等。进一步联合Transcirc和Ribocirc数据库交集获得17个circRNA,其中以hsa_circ_0000231、hsa_circ_0000417、 hsa_circ_0000745、 hsa_circ_0005455、 hsa_circ_0000847、 hsa_circ_0005552、 hsa_circ_0060849、hsa_circ_0008234、hsa_circ_0075796、hsa_circ_0001742及hsa_circ_0001686共11个基因编码潜能评分最显著且均大于0.9分。同时在10例肝癌和癌旁组织中qPCR验证提示:hsa_circ_0000231、hsa_circ_0000745、hsa_circ_0005552、和hsa_circ_0000847在肝癌组织中高表达,hsa_circ_0060849和hsa_circ_0008234呈低表达,差异具有意义(P<0.05)。结论:综合分析了肝癌中cicRNA的表达模式,发现了6个circRNA存在差异性表达且具有高的翻译潜能评分,值得进一步研究。

m6A修饰的circRNA在肝细胞癌中的研究进展

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是一种可逆的表观遗传修饰,是真核细胞中最丰富的修饰物之一,在信使RNA和非编码RNA中被普遍报道。m6A修饰可调节RNA的转录、加工、剪接、降解和翻译等,在肿瘤生物学行为中发挥重要作用。缺乏5’帽子结构的circ RNA(circular RNA)一直被误认为是转录过程中偶然剪切生成的“垃圾序列”,然而研究发现,circ RNA可以通过micro RNA、结合蛋白、翻译多肽和m6A修饰等多种方式参与肿瘤侵袭和转移。本文就m6A修饰在circ RNA调控作用及其在肝细胞癌中的功能作一综述,并讨论其在该领域的潜在临床应用和可能的未来发展方向。

经皮置管冲洗引流治疗感染性胰周坏死

目的探讨感染性胰周坏死采用经皮穿刺置管配合冲洗引流治疗的临床疗效。方法2018年1月~2022年6月收治的感染性胰周坏死10例,采用穿刺置管冲洗引流治疗,记录病人引流时间、恢复情况及并发症发生情况。结果9例经穿刺冲洗引流处理后均痊愈,1例穿刺置管冲洗引流治疗失败行开腹清创术后治愈,住院平均冲洗引流时间32天,无并发症发生,治愈后未再复发。结论经皮穿刺逐级置换冲洗引流具有微创、效果明确等特点,可考虑单独用于部分病人感染性胰周坏死的治疗,值得推广。

神经菌毛素1参与肝细胞癌侵袭及转移的研究进展

肝细胞癌是世界上极具侵袭性的实体恶性肿瘤之一,发病隐匿,早期易发生浸润和转移,导致多数患者确诊时已失去手术最佳时期。神经菌毛素1(NRP1)在肝细胞癌中发挥巨大的作用,其可促进血管生成、肿瘤生长以及肿瘤侵袭和转移,甚至介导免疫逃逸,值得注意的是,NRP1还可与微小RNA相互作用介导肝细胞癌的发生、发展。故进一步研究NRP1在肝细胞癌中的作用机制,使其未来能够作为肿瘤侵袭转移的诊断标志物以及新治疗靶点具有极其重要的意义。本文将从NRP1出发,对其与肝细胞癌之间的关系以及介导的肿瘤侵袭转移的潜在机制进行综述。

完全腹腔镜肝切除术在肝肿瘤治疗中的应用和评价

目的探讨完全腹腔镜肝切除术在肝肿瘤治疗中的安全性及临床效果。方法回顾性分析2010年12月至2012年9月期间在我科行完全腹腔镜下肝切除术的42例肝肿瘤的临床资料。结果 42例手术均获得成功,其中原发性肝癌35例、肝血管瘤5例,肝炎性假瘤2例。术式:左外叶切除(II,III段肿瘤)19例、左半肝切除(IVa,IVb段肿瘤)5例,V^VII段(V^VII段肿瘤)部分肝切除18例。手术时间30~290(90±30)min,术中出血30~1 000(350±80)mL,术后引流量为20~150(64±15)mL/d。术后引流管拔除时间2~5 d,下床活动时间术后第2~3天,2~3 d后胃肠道功能恢复,总住院时间5~12(8.5±1.7)d。未发生胆漏、大出血、气体栓塞等严重并发症,全组无死亡。随访35例肝细胞癌12个月以上,其中l例术后6个月、2例术后10个月出现肝内复发,其余均健在,均未见局部复发及腹壁戳孔种植性转移等。结论肝脏II、III、IVb、V^VII段的肿瘤行完全腹腔镜肝切除术是安全可行的,且短期随访效果良好,其他部位的肿瘤如遇操作困难可视情中转开腹。

减轻应激训练在肝癌患者中的应用对巨噬细胞集落刺激因子-1表达的影响

目的探讨减轻应激训练在肝癌患者中的应用对于巨噬细胞集落刺激因子(CSF)-1表达的影响。方法选择进行肝癌根治术治疗的肝癌患者92例,根据随机平行对照原则分为观察组与对照组各46例,对照组在围手术期给予常规护理,观察组在对照组护理的基础上给予加强应激训练,包括行为训练、心理干预和认知干预,观察CSF-1表达变化情况与预后情况。结果患者的手术全部顺利完成,观察组术后恶心呕吐的发生率、下地活动的时间以及肛门排气的时间都比对照组明显要少(P<0.05)。手术后2周将对照组与观察组的血清CSF-1值分别为(69.35±11.84)pg/mL和(103.98±18.14)pg/mL,都明显低于术前1 d的(255.35±18.83)pg/mL和(254.10±20.19)pg/mL(P<0.05),组内与组间对比差异都有统计学意义(P<0.05)。术前1 d两组HAMA和HAMD评分均差异无统计学意义(P>0.05),术后14 d观察组较术前1 d及对照组术后14 d HAMA和HAMD评分都明显降低(P<0.05)。结论减轻应激训练在肝癌患者中的应用能抑制血清CSF-1的表达,缓解患者的焦虑与抑郁情绪,从而促进患者的康复。

miR-182激活PI3K/AKT信号通路促进肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

目的:探讨miR-182通过PI3K/AKT信号通路对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法:将体外培养的HepG2细胞分为对照组(未转染)、阴性组(转染阴性对照)、模拟物组(转染miR-182模拟物)和模拟物+抑制剂组(转染miR-182模拟物后,加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002),采用RT-PCR检测各组细胞中miR-182的表达水平,Western blot检测各组细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达,采用MTT法、克隆形成实验和Transwell小室分别检测各组细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果:与对照组相比,模拟物组细胞的存活率、克隆形成率和侵袭细胞数、迁移细胞数均明显升高,细胞中p-PI3K、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达水平也均明显上升(P<0.05);而阴性组和对照组细胞相比无显著性差异(P>0.05)。与模拟物组相比,模拟物+抑制剂组细胞的存活率、克隆形成率和侵袭细胞数、迁移细胞数明显降低,细胞中p-PI3K、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达水平也均明显下降(P<0.05)。结论:miR-182可通过激活PI3K/AKT信号通路上调MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

肝癌的热疗方法与新进展

热疗是继手术、放疗、化疗和生物四大肿瘤治疗以外的第五种新生的疗法。经过深入应用和研究,其安全性与疗效性已毋容置疑。肝癌的热疗方法已存在多种并且还不断地更新和发展。近年我院开展的手术加术中温水浴疗治疗肝癌的方法是安全、可行的,疗效性已经得到了初步的肯定,长期疗效需要进一步研究证实,其有望成为一种肝癌综合治疗的好方法。

miR-144脂质体复合物体外抑制肝癌细胞增殖和侵袭能力及对裸鼠种植肿瘤的抑制作用初步研究

目的研究mi-RNA-144脂质体复合物对HepG2和SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并观察其在体内的抑瘤作用。方法通过薄膜分散法制备DOTMA阳离子脂质体,与miR-144孵育得到miR-144脂质体复合物,通过摄取和转染实验确定DOTMP脂质体与miR-144的体积质量比;观察miR-144脂质体复合物对HepG2和SMMC-7721细胞杀伤、迁移和侵袭能力的影响。在裸鼠肝脏种植肿瘤模型,观察miR-144脂质体复合物的抑瘤作用。结果选择DOTMP脂质体与miR-144的体积质量比为3:1,得到的miR-144脂质体复合物粒径在200 nm左右,其多分散性指数(PDI)小于0.3;DOTMP脂质体与质粒的体积/质量比(μl/μg)为3:1时,转染效率最高(P<0.05);随着孵育时间的延长,miR-144脂质体复合物对SMMC-7721细胞和HepG2细胞的杀伤作用均增强(P<0.05);经miR-144脂质体复合物处理过的HepG2细胞和SMMC-7721细胞迁移和侵袭距离均显著缩短(P<0.01);与对照组比,经过miR-144脂质体复合物处理的肿瘤细胞接种肿瘤直径显著缩小(P<0.05)。结论 miR-144脂质体能够在体外和体内抑制肝癌细胞的侵袭,具有很大的应用前景。

中晚期肝癌介入治疗后应用血必净的临床疗效观察

目的探讨中晚期肝癌介入治疗后应用血必净注射液的临床疗效。方法选取2015年6月至2016年6月海南省人民医院肝胆胰外科收治的中晚期肝癌患者80例为研究对象,按随机数表法将患者分为观察组和对照组各40例,两组患者均行肝动脉化疗栓塞术,术后常规予以护肝、护胃等对症处理,观察组在此基础上加用血必净注射液50 m L静脉滴注,2次/d,7 d为一个疗程,比较两组患者的临床疗效。结果观察组患者的发热、腹痛程度较对照组有所减轻,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的平均住院天数为(11.5±1.8)d,明显少于对照组的(14.6±2.5)d,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者术后3 d、7 d血清C反应蛋白,白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论中晚期肝细胞癌介入治疗后应用血必净注射液能有效缓解介入术后患者发热,腹痛症状,缩短住院周期,降低炎症反应,具有一定的临床应用价值。

缩短术前禁食禁水时间对肝癌合并糖尿病患者术后康复情况的影响

目的 探讨缩短术前禁食禁水时间对肝癌合并糖尿病患者术后康复情况的影响.方法 选取海南省人民医院2013年4月至2015年4月收治的肝癌合并糖尿病患者140例,按入院先后顺序分为对照组和观察组,各70例.对照组患者在手术前1d晚20：00后禁食,24：00后禁水.观察组患者在手术前1d晚24：00前根据需要适当的进食总量＜400 ml的半流质清淡饮食,且在术前2-3h口服200 ml 5％葡萄糖注射液.比较2组患者术前口渴、饥饿、焦虑、腹部不适发生情况,手术前后空腹血糖、空腹胰岛素、血清C肽水平以及稳态模型评估法胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,手术前后肝功能指标以及住院时间和并发症发生情况.结果 观察组术前口渴、饥饿患者比例明显低于对照组,差异均有统计学意义[54.3％（38/70）比81.4％（57/70）、54.3％（38/70）比84.3％（59/70）]（均P＜0.05）.2组焦虑、腹部不适患者比例比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.术前,2组空腹血糖、空腹胰岛素、血清C肽、HOMA-IR差异均无统计学意义（P＞0.05）.术后,观察组血清C肽水平高于对照组,HOMA-IR低于术前和对照组,差异均有统计学意义[（1.4±0.7） μg/L比（0.9±0.4）μg/L,（1.05 ±0.69）比（1.77±0.69）、（1.89±0.26）]（均P＜0.05）,但2组空腹血糖、空腹胰岛素水平差异无统计学意义（P＞0.05）.术后,2组肝功能指标、住院时间以及并发症发生率差异均无统计学意义（均P＞0.05）.结论 适当缩短术前禁食禁水时间可以有效改善肝癌合并糖尿病患者术前饥饿感和口渴感以及术后胰岛素的抵抗能力.

十二指肠乳头癌诊断的现状与进展

十二指肠乳头癌(CPV)是一类原发于十二指肠大乳头的恶性肿瘤,临床罕见。大多数研究均表明,CPV手术切除率和预后优于其他壶腹部周围癌。近年来,局部切除的疗效已被广泛认可。因此,早期诊断已成为正确选择治疗时机和治疗策略以提高远期生存率的关键。然而,临床上术前准确判断十二指肠乳头肿瘤性质和分期仍然存在众多困难,局部切除适应证亦有争议。此文就目前CPV的早期诊断、局部切除适应证判断等方面进行综述,旨在为临床医师选择更好的诊断评估方法提供参考。

HTPAP单体型与基因表达及肝细胞癌(HCC)预后的关系

目的拟通过分析不同HTPAP单体型与基因表达及肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后的关系,探讨HTPAP单体型对HCC术后复发及预后的影响。方法随机选取377例HCC样本,提取其中以AGCTAC、GCGGGT、AGCTGC和GCGGAT等4种主要HTPAP单体型组成的HCC RNA。绝对定量PCR检测HTPAP基因表达水平,免疫组化染色、RT-PCR和Western blot检测HTPAP蛋白表达水平,分析单体型与基因表达的关系。随机选取665例HCC样本并提取DNA,焦磷酸测序方法对6个单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphisms,SNPs)进行检测。单体型构建后,分析HTPAP单体型与HCC预后的关系。结果 377例HCC中有327例由上述4种主要单体型构成。基因表达分析提示,HCC中HTPAP在GCGGGT纯合子组和AGCTAC/GCGGGT杂合子组的表达低于AGCTAC/GCGGAT杂合子组、AGCTAC/AGCTGC杂合子组及AGCTAC纯合子组,但差异无统计学意义(P=0.062)。免疫组化染色发现GCGGGT纯/杂合子组HCC较其他单体型HCC的HTPAP表达显著降低(P=0.035)。Kaplan-Meier分析提示,GCGGGT纯/杂合子组HCC较其他单体型HCC术后易复发且预后差(P<0.001)。Cox风险比例模型发现GCGGGT单体型是HCC术后复发及预后差的独立相关因子。结论 HCC的不同HTPAP单体型在mRNA水平的表达差异无统计学意义,但在蛋白水平存在显著差异。GCGGGT单体型可作为HCC术后复发和预后差的预测指标。

十二指肠乳头肿瘤的诊断与外科治疗

十二指肠乳头肿瘤（PV）临床罕见,但十二指肠乳头癌（CPV）在壶腹部周围癌中发病率仅次于胰头癌,约占胃肠道恶性肿瘤的5%[1],且有逐年升高趋势.现对第二军医大学东方肝胆外科医院2005年1月至2010年12月期间收治的106例行手术治疗的PV患者的临床资料加以分析,旨在探讨如何提高PV的早期诊断和治疗效果.

肝移植围手术期细节管理的实施与体会

目的探讨细节管理在肝移植围手术期护理中的实施效果及体会。方法对6例肝移植患者应用细节管理,对患者做好术前心理护理,完善术前准备,术后注重病情观察,严密保护性隔离措施,做好用药护理、并发症的预防及护理等细节管理。结果通过对肝移植围手术期患者应用细节管理,提高护理质量,确保护理安全,6例患者均痊愈出院,目前均生活良好,最长存活时间已达30个月。结论细节管理的制定实施是提高患者存活率和生活质量的关键措施之一。

肿瘤抑制基因HTPAP单体型构建及其与肝癌转移潜能的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者肿瘤组织DNA的HTPAP基因单体型与肝癌转移潜能的关系。方法提取864例HCC手术样本DNA,应用焦磷酸测序行SNPs检测,并予单体型构建,分析其与肝癌转移潜能的关系。构建HTPAP启动子单体型pGL3质粒,并分别转染MHCC-97H、HepG2肝癌细胞和正常的肝Hela细胞,分析不同HTPAP启动子单体型对基因转录活性的影响。结果共发现6个SNPs位点[-1053A/G、+64G/C、+357C/G、+1648-/TAAG(无插入和插入TAAG等位基因分别以T/G示,后同)、+1838A/G、+3528C/T]。单体型构建发现HTPAP中共存在11个单体型,其中AGCTAC、GCGGGT、AGCTGC、GCGGAT四种单体型占94.75%。临床病理特征分析提示单体型GCGGGT与高转移潜能正相关(P=0.0003)。启动子序列中两个SNPs(-1053AG和+64GC)存在完全LD,故只有三种启动子单体型(-1053AA/+64GG、-1053AG/+64GC GC和-1053GG/+64CC);双荧光报告法发现三种单体型的HTPAP启动子都具有显著转录活性,其中-1053AA/+64GG单体型启动子转录活性较-1053GG/+64CC和-1053AG/+64GC单体型启动子强,差异具有统计意义(P=0.005,0.009)。结论肿瘤转移抑制基因HTPAP的GCGGGT单体型与HCC高转移潜能正相关。HTPAP启动子单体型对基因的转录活性有显著影响并与术后复发密切相关,提示HCC中HTPAP的不同SNP单体型可能是潜在侵袭转移和复发预后的预测指标。