紫檀芪对宫颈癌细胞自噬及SIRT1-FoxO信号通路的影响

目的:探讨紫檀芪(PTE)对宫颈癌细胞自噬及SIRT1-FoxO信号通路的影响。方法:以人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象。采用CCK-8法和流式细胞术分别测定不同浓度的PTE对HeLa细胞活力和凋亡率的影响;透射电镜观察细胞中自噬体数目;qPCR测定细胞中SIRT1和FoxO的mRNA表达;Western blot测定细胞中SIRT1、FoxO、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62、Bax和Bcl-2水平。结果:PTE作用于HeLa细胞24和48 h后,细胞活力抑制率随浓度增加而升高。与0μmol/L PTE相比,15、30和60μmol/L PTE处理后,HeLa细胞凋亡率、细胞中自噬体数目及Bax、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、SIRT1和FoxO水平显著升高(P<0.05),Bcl-2和p62水平显著降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论:PTE可能通过激活SIRT1-FoxO信号通路诱导HeLa细胞自噬和凋亡,从而抑制HeLa细胞活力。

SOCS3介导IL-6/STAT3通路在卵巢上皮癌细胞增殖凋亡过程中的作用机制

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)3对卵巢上皮癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹法检测人正常卵巢上皮细胞系IOSE-80和卵巢上皮癌细胞系SKOV-3、OVCAR-3和HO8910中SOCS3 mRNA和蛋白表达。将体外培养的SKOV-3细胞分为对照组(未处理)、空载体组(转染pcDNA3.1空载体)和SOCS3组(转染pcDNA3.1-SOCS3过表达载体),采用qRT-PCR法检测细胞中SOCS3 mRNA表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹检测细胞中SOCS3、白细胞介素(IL)-6、信号转导和转录激活因子(STAT)3和磷酸化(p)-STAT3蛋白表达。结果与IOSE-80细胞比较,SKOV-3、OVCAR-3和HO8910细胞中SOCS3 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),其中SKOV-3细胞中SOCS3 mRNA和蛋白表达最低。与对照组、空载体组比较,SOCS3组细胞中SOCS3 mRNA、蛋白表达和细胞凋亡率均明显升高(P<0.05),而细胞增殖活力和细胞中IL-6、p-STAT3蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论SOCS3在卵巢上皮癌细胞中低表达,而SOCS3过表达可抑制癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3通路有关。