南蛇藤素调节SDF-1/CXCR4信号通路对脂多糖诱导的A549细胞损伤的影响

目的分析南蛇藤素对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响以及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/趋化因子受体4(CXCR4)通路在其中发挥的作用。方法培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞,用浓度为10μg/mL LPS处理24 h,并在LPS处理前用终浓度为25、100 mmol/L的南蛇藤素或100 mmol/L的南蛇藤素与100μg/mL的AMD3100(CXCR4抑制剂)处理2 h。CCK-8法测定A549细胞活力,TUNEL法测定A549细胞凋亡,试剂盒法测定A549细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,ELISA法检测A549细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平,Western blot法测定SDF-1、CXCR4蛋白表达。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q法进行。结果与对照组相比,LPS组A549细胞TUNEL阳性率[(65.78±8.21)%比(4.23±0.77)%]、细胞凋亡率[(21.38±2.70)%比(7.64±0.95)%]、cleaved caspase-3、Bax蛋白、LDH、TNF-α、IL-6、SDF-1(2.02±0.25比0.75±0.10)、CXCR4蛋白(1.59±0.19比0.71±0.08)升高(P<0.05),存活率、Bcl-2蛋白、IL-10表达降低(P<0.05);与LPS组相比,LPS+南蛇藤素低剂量组、LPS+南蛇藤素高剂量组A549细胞TUNEL阳性率[(52.51±6.54)%,(41.37±5.17)%比(65.78±8.21)%]、细胞凋亡率[(17.62±2.45)%,(12.37±1.54)%比(21.38±2.70)%]、cleaved caspase-3、Bax蛋白、LDH、TNF-α、IL-6、SDF-1(1.69±0.20,1.32±0.18比2.02±0.25)、CXCR4蛋白(1.05±0.13,1.31±0.16比1.59±0.19)降低,存活率、Bcl-2蛋白和IL-10表达升高(P<0.05);与LPS+南蛇藤素高剂量组相比,LPS+南蛇藤素高剂量+AMD3100组A549细胞TUNEL阳性率[(24.28±4.28)%比(41.37±5.17)%]、细胞凋亡率[(9.91±1.25)%比(12.37±1.54)%]、cleaved caspase-3、Bax蛋白、LDH、TNF-α、IL-6、SDF-1(0.95±0.13比1.32±0.18)、CXCR4蛋白(0.78±0.09比1.05±0.13)降低,存活率、Bcl-2蛋白和IL-10表达升高(P<0.05)。结论南蛇藤素可降低LPS诱导的A549细胞凋亡与炎症,提高细胞存活,其作用机制可能与抑制SDF-1/CXCR4通路有关。