塞来昔布对膀胱癌细胞移植小鼠的治疗作用及机制

目的初步探讨塞来昔布对膀胱癌细胞移植小鼠的治疗作用及相关机制。方法将60只雄性BALB/c裸鼠随机分为3组:对照组、模型组及观察组。模型组及观察组利用注射人膀胱癌细胞系5637制备小鼠膀胱癌模型。观察组小鼠给予塞来昔布治疗,对照组及模型组小鼠给予同剂量0.9%氯化钠溶液。治疗4周后,取模型组和实验组小鼠瘤组织及对照组正常组织,检测3组小鼠组织中CD4^+、CD8^+表达量及CD4^+/CD8^+比值;利用Western blot检测COX-2、VEGF及cPLA2阳性表达;利用TUNEL法检测模型组及观察组小鼠肿瘤细胞凋亡率。结果对照组小鼠正常生长,皮下无肿瘤生成。模型组和观察组小鼠成瘤率100%。模型组和观察组小鼠的瘤体质量分别为(2.08±0.36)g和(1.18±0.21)g,与模型组相比,观察组小鼠瘤体质量显著降低(P<0.05)。观察组小鼠的肿瘤抑制率为43.33%。模型组及观察组小鼠移植瘤中CD4^+、CD4^+/CD8^+水平均显著低于对照组,CD8+水平均显著高于对照组(P<0.05)。观察组小鼠瘤组织中CD4^+、CD4^+/CD8^+水平明显高于模型组,CD8+水平明显低于模型组(P<0.05)。COX-2及cPLA2蛋白在对照组小鼠组织中不表达,VEGF蛋白在3组中均有阳性表达。观察组小鼠中COX-2、VEGF及cPLA2蛋白表达水平明显低于模型组,细胞凋亡指数明显高于模型组小鼠(P<0.05)。结论塞来昔布对小鼠膀胱癌具有一定的抑制作用,其作用机制可能与提高膀胱癌小鼠免疫系统水平、减轻炎性反应、促进癌细胞凋亡有关。

miR-200a-3p通过靶向MMP-1抑制膀胱癌T24细胞侵袭及转移

探讨miR-200a-3p靶向调控MMP-1对膀胱癌T24细胞迁移和侵袭能力的影响。运用Target Scan Human 7.2生物信息学软件预测miR-200a-3p的下游靶基因,采用双荧光素酶报告实验验证MMP-1为miR-200a-3p的下游靶基因。在T24细胞中转染miR-200a-3p mimics或miR-200a-3p inhibitor后,采用实时荧光定量PCR技术检测MMP-1 mRNA的表达量、Western blotting检测MMP-1蛋白的表达量。通过Transwell小室法检测T24细胞的迁移和侵袭能力。miR-200a-3p靶向调控MMP-1的3’-UTR,降低了荧光素酶的表达活性。与对照组比,miR-200a-3p mimics组MMP-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低,且miR-miR-200a-3p mimics组细胞的迁移、侵袭能力也均降低。与对照组比,miR-200a-3p inhibitor组MMP-1 mRNA和蛋白表达水平明显升高,且miR-200a-3p inhibitor组细胞的迁移、侵袭能力也均升高。miR-200a-3p通过靶向调控MMP-1抑制膀胱癌T24细胞侵袭及转移。