类鼻疽实验室诊断的研究进展

类鼻疽是由革兰阴性菌类鼻疽伯克霍尔德菌引起的人畜共患传染病,已成为一个新的全球公共卫生问题。传统的类鼻疽实验室诊断需要特殊的仪器设备,且操作繁琐,许多热带发展中国家缺乏实验室诊断工具和相关临床经验,延误了类鼻疽病的诊断和治疗。优化的血清学检测及分子生物学检测方法具有操作简便、快速、高灵敏度、高特异度等特点,对于类鼻疽的早期诊断具有重要意义。现就类鼻疽实验室诊断技术和研究进展进行综述,以便为该病制订最佳防控方案提供参考。

小儿大面积烧伤休克期切痂术输血策略

目的探讨大面积烧伤休克期切痂术患儿的输血治疗策略。方法利用医院临床用血全程闭环智能路径管理与评价信息系统检索2014—2016年我院≤14岁小儿烧烫伤病例资料795例,回顾性分析并筛选纳入55例大面积烧伤休克期切痂术患儿,根据患者输血前不同血红蛋白（Hemoglobin,Hb）值分为限制性输血组（Hb≤70 g/L,n=25）和开放性输血组（Hb≤100 g/L,n=30）,分析二组患者临床基本资料、输血量、输血前后患者的红细胞（Red blood cell,RBC）计数、Hb值和血细胞比容（Hematocrit,Hct）、术后感染率、并发症、输血不良反应发生率、住院时长、30 d死亡率和治愈率指标。结果 1）各年龄组烧伤小儿中,1—〈5岁组发生风险最高,约占烧伤小儿半数（45. 5%）; 2）二组患儿的血浆输注量差异不具统计学意义（P〉0. 05）,但限制性输血组的红细胞输注量和输血总量均少于开放性输血组,差异均具统计学意义（P〈0. 05）; 3）与开放性输血组相比,限制性输血组输血24 h后的RBC、Hb、Hct值均显著升高,输血前后差异均具统计学意义（P〈0. 05）; 4）二组患者输血后的术后感染率、并发症、输血不良反应发生率、住院时长、30 d死亡率和治愈率均无统计学差异（P〉0. 05）。结论应加强1—5岁小儿的监管,以降低其烧烫伤风险;大面积烧伤休克期切痂术患儿在输注血浆胶体液抗休克治疗同时,临床上采用Hb≤70 g/L的红细胞输注阈值是安全有效、可行的。

水样粪便中粪类圆线虫幼虫的收集方法

粪类圆线虫（Strongyloides stercoralis）是一种兼性寄生虫,可以引起人兽共患寄生虫病,并可在宿主体内自体感染、播散性超度感染[1-2]。该虫引起的人类疾病易被忽略而误诊、漏诊。一旦患者免疫力下降或受损,该虫大量增殖,可导致患者全身播散性感染,全身各器官衰竭,甚至死亡[1-2]。2017年2月13日在海南省肿瘤医院一名67岁男性患者水样粪便中发现粪类圆线虫幼虫。为开展后续DNA和RNA的提取等研究,需要从患者水样粪便中分离其幼虫。

巨噬细胞迁移抑制因子介导缺氧诱导的保护性自噬对肝癌细胞化疗敏感性的影响及机制研究

目的:在体内外探究巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)对肝癌(HCC)细胞化疗敏感性的影响及机制。方法:在低氧(HXP)条件下体外培养HCC细胞系Huh7和HepG2,Western blot检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与MIF蛋白表达;siRNA转染技术将靶向沉默MIF的si-MIF转染至Huh7与HepG2细胞,Western blot进行验证,将转染后的Huh7、HepG2细胞分为4组:正常对照组(Control)、低氧处理组(HYP)和低氧处理的转染si-NC组(HYP+si-NC)与低氧处理的转染si-MIF组(HYP+si-MIF);CCK-8检测各组细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性;Western blot检测各组细胞HIF-1α、MIF及自噬标志蛋白LC3B与Atg5表达;在裸鼠体内进一步验证5-FU对敲低MIF表达的Huh7细胞的生长抑制作用及对肿瘤组织自噬水平的影响。结果:与常氧条件相比,HXP能够以时间依赖的方式促进Huh7与HepG2细胞HIF-1α与MIF蛋白表达(P<0.05);转染si-MIF能够显著下调Huh7与HepG2细胞MIF表达;与Control组相比,HYP组和HYP+si-NC组细胞对5-FU的化疗敏感性显著降低(P<0.05),HIF-1α和Atg5蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高(P<0.05),而HYP+si-MIF组则相反(P<0.05);前两组差异无统计学意义(P>0.05);裸鼠体内实验结果表明,敲低Huh7细胞中MIF表达能够促进5-FU对HCC的生长抑制作用,并抑制肿瘤组织中细胞增殖与自噬,促进细胞凋亡。结论:HCC的低氧环境能够上调MIF表达,而敲低MIF表达可能通过抑制肿瘤细胞及组织中HIF-1α介导的保护性自噬增强HCC的化疗敏感性。

GALAD模型在原发性肝细胞癌诊断和预后评估中的价值研究

目的探讨GALAD(Gender,Age,Lens culinaris agglutinin⁃reactive AFP,AFP,Des⁃γ⁃carboxy prothrombin)模型在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断和预后评估中的价值。方法选取2016年11月至2019年11月在海南省肿瘤医院接受根治性手术治疗的HCC患者98例为HCC组,选取同期在海南省肿瘤医院确诊的良性肝脏疾病(benign liver diseases,BLD)患者87例为BLD组,同期进行健康体检的健康者86例为对照组。检测所有研究对象血清甲胎蛋白(alpha⁃fetoprotein,AFP)、甲胎蛋白异质体L3(Lens culinaris agglutinin⁃reactive alpha⁃fetoprotein,AFP⁃L3)、异常凝血酶原(des⁃γ⁃carboxy prothrombin,DCP)水平,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析单个血清标志物及GALAD模型对HCC的诊断效能,并分析GALAD模型在HCC患者手术预后中的评估价值。结果GALAD模型诊断HCC的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.958,高于单个血清标志物及联合检测的AUC,差异有统计学意义(P<0.05),当截断值为2.75时,GALAD模型诊断HCC的灵敏度、特异度和准确度分别为81.6%、93.6%和89.3%。Kaplan⁃Meier生存曲线结果显示,GALAD模型高水平组患者3年累积生存率为23.8%,中位生存时间为28.03个月,低于GALAD模型低水平组的49.8%和36.38个月,差异有统计学意义(χ^(2)=12.022,P=0.001),GALAD模型高水平组3年累积无进展生存率为7.2%,中位无进展生存时间为20.70个月,低于GALAD模型低水平组的46.0%和30.32个月,差异有统计学意义(χ^(2)=9.810,P=0.002)。结论GALAD模型用于HCC的诊断效能优于AFP、AFP⁃L3,DCP和三项联合,并对HCC患者手术预后具有一定评估价值。

HBV相关肝细胞癌微血管侵犯术前预测模型的构建与应用

目的构建HBV相关肝细胞癌(HCC)微血管侵犯(MVI)的术前预测模型,并验证其预测效能。方法回顾分析2017年1月至2021年1月海南省肿瘤医院收治的812例HBV相关HCC患者资料,根据手术顺序分为模型组589例和验证组223例,单因素和多因素Logistic回归分析模型组发生MVI的独立影响因素,建立术前预测模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估预测模型预测HBV相关HCC患者发生MVI的效能,并在验证组中进行独立验证。结果多因素Logistie回归分析显示年龄、中性粒细胞/淋巴细胞比值、甲胎蛋白异质体L3百分比、异常凝血酶原肿瘤最大直径是HV相关HCC患者发生MVI的独立影响因素(OR分别为0.944、1.215、1.059、2.815、1.201),根据Logistice回归分析结果构建预测模型,ROC曲线分析结果显示,在模型组预测模型预测MVI的曲线下面积(AUC)为0.801,截断值为0.15时,灵敏度为75.2%,特异度为82.4%。在验证组预测模型预测MVI的AUC为0.824,灵敏度75.8%,特异度82.6%,预测低危MVI的AUC为0.788,灵敏度73.8%,特异度80.4%,预测高危MVI的AUC为0.858,灵敏度77.6%,特异度83.7%。结论基于Logistic回归分析构建的术前预测模型对预测HBV相关HCC患者是否发生MVI,特别是高危MVI具有较高的临床价值,可为HBV相关HCC患者的术前治疗方案,手术规划提供参考。

海口市围产期无乳链球菌携带状况及其毒力基因分布和药物敏感性

目的 分析海南地区海口市围产期孕妇无乳链球菌携带状况及其毒力基因分布和药物敏感性。方法 收集海口市中医医院和海南省人民医院门诊部于2019年3月-2021年9月收集的围产期孕妇泌尿生殖道分泌物和直肠拭子标本,对检出的无乳链球菌进行多位点序列(MLST)分型和荚膜多糖基因分型,检测毒力基因分布,进行药物敏感性试验。结果 所有标本经培养分离得到300株无乳链球菌菌株。300株无乳链球菌菌株有237株成功进行MLST分型,共分为19种ST型,主要ST型为ST1、ST19、ST23、ST17、ST12、ST61;共检出Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ5种型别,主要荚膜多糖型为Ⅲ型;CAMP未检出,hyl B、cyl E、PI-1、PI-2a、PI-2b均检测到阳性株;对青霉素等常见抗菌药物敏感,对红霉素、阿奇霉素等常见抗菌药物耐药。结论 海南地区海口市围产期孕妇主要ST型为ST1、ST19、ST23,主要荚膜多糖型为Ⅲ型,均携带hyl B、cyl E毒力基因,至少携带PI-1、PI-2a、PI-2b其中一个,药物使用推荐青霉素。