艾纳香残渣不同提取部位体外抑菌活性研究

目的考察艾纳香残渣(艾渣)不同提取部位的体外抑菌活性,确定艾渣抑菌活性的有效部位。方法采用体积分数80%乙醇对艾渣中化合物进行提取得到艾渣总提取物,用适量水混悬后,依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到不同提取部位;采用琼脂扩散法测定艾渣不同提取部位的抑菌圈直径;采用二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。结果艾渣醇提部位及石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取部位对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌和乙型溶血性链球菌有不同程度的抑制作用;抗菌活性部位主要为三氯甲烷萃取物,该萃取物对大肠埃希菌和乙型溶血性链球菌均有较显著的抑菌和杀菌作用,说明抑菌活性物质主要为极性较小的化合物。结论艾渣提取物具有较好的体外抗菌活性,尤以三氯甲烷萃取部位对乙型溶血性链球菌和大肠埃希菌的抑制作用显著。

艾纳香口腔护理液的处方筛选及其抑菌效果研究

目的对艾纳香口腔护理液进行处方筛选,并对其抑菌效果及抑菌稳定性进行考察,为后期产品开发提供理论依据。方法以艾纳香提取物为原料,以溶液澄清度、口感、除臭效果为评价指标,采用正交试验设计筛选最优处方。对艾纳香口腔护理液进行体外抑菌试验,并考察在37℃下放置5个月的抑菌稳定性。结果筛选得出的最佳溶剂为体积分数15%的乙醇,最佳促溶剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油。正交试验优选得到的最佳处方为:艾纳香提取物∶甘油∶木糖醇∶食用香精的质量比为0.03∶5∶0.7∶0.02。采用优化处方制备的艾纳香口腔护理液初始抑菌率≥90%,具有较强的抑菌作用;经37℃、相对湿度>75%下放置5个月后,抑菌率仍达到80%以上。结论本文所制得的艾纳香口腔护理液澄清透明、口感良好,抑菌作用稳定,具有较高的潜在市场应用价值。

黎药艾纳香化学成分研究

目的:研究黎药艾纳香的抗菌活性成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶色谱、高效液相色谱和波谱学技术对艾纳香进行系统化学成分分离和鉴定。结果:从黎药艾纳香中共分离得到12个单体化合物,分别鉴定为:6,7-二羟基香豆素(1)、蚱蜢酮(2)、反式对羟基桂皮酸(3)、双(4-羟苄基)醚(4)、原儿茶酸(5)、原儿茶醛(6)、3-(hydroxyucetyl)indole(7)、咖啡酸乙酯(8)、sterebin A(9)、eugenyl-O-β-D-glucoside(10)、4-allyl-2,6-dimethoxyphenol glucoside(11)、blumeaene K(12)。抗细菌活性评价显示化合物4对枯草芽孢杆菌具有较强抑制作用,MIC值为64μg/mL,化合物1、4、5、6、8、11、12分别对大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有不同程度抑制活性。结论:其中,化合物1~11为首次从该植物中分离得到,该研究有助于阐明艾纳香抗菌药效物质基础。

艾纳香资源研究进展

艾纳香资源是开展艾纳香品种收集保存与选育、品质鉴定、遗传研究、生物活性研究和开发利用的重要物质基础,也是艾纳香产业持续发展的物质基础。本文查阅了国内艾纳香资源的相关研究,同时探讨了艾纳香资源存在的问题,并对今后需要重点研究的方向提出建议,以供同行在进一步推动艾纳香资源研究与利用提供参考与商榷。

艾纳香口腔护理液抗口腔黏膜溃疡的药效学研究

目的:探讨艾纳香口腔护理液在口腔黏膜溃疡药效学中的作用,为艾纳香口腔护理液的后期临床应用提供参考依据。方法:采用改良陈谦明法对SD大鼠构建口腔溃疡模型,考察艾纳香口腔护理液对大鼠组织的病理变化、溃疡愈合时间及口腔溃疡组织中的MDA、NO、NOS及SOD含量活性的影响。结果:艾纳香口腔护理液组(低、中、高)的愈合时间较溃疡组和溶剂对照组的愈合时间短,且与阳性药物组间均无明显差异;给药后的第2、4天,艾纳香口腔护理液组(低、中、高)较溃疡自然愈合组NO、NOS、MDA含量显著降低(P<0.05);SOD含量显著升高(P<0.05);与正常组和阳性药物组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:艾纳香口腔护理液能有效缩短口腔溃疡愈合时间,对口腔溃疡的愈合起到了较好的促进作用。

土壤因子对艾纳香有效成分的影响研究

目的:研究艾纳香有效成分与土壤因子的相关性,筛选影响其含量的主导因子。方法:GC测定艾纳香中l-龙脑的含量,紫外-可见分光光度计测定总黄酮的含量,理化分析法测定土壤因子,应用相关分析、逐步回归分析及灰色关联度分析对土壤因子与有效成分的关系进行综合分析。结果:艾纳香中l-龙脑含量与有效硫呈显著负相关(P<0.05),总黄酮含量与p H、碱解氮、交换性钙、交换性镁呈显著负相关(P<0.05);经逐步回归分析发现,影响l-龙脑含量的主导因子为有效硫,影响总黄酮含量的主导因子为p H;经灰色关联度分析发现,p H为影响艾纳香有效成分的重要因子,其次为碱解氮和有效硫。结论:无论是选择适宜产地还是施肥,都应重视和考虑氮、硫及土壤p H对艾纳香质量的影响。

艾纳香抗植物病原菌活性成分研究

为评价黎药艾纳香在农业病害防治方面的应用前景,利用菌丝生长抑制法和化学成分预试法研究不同艾纳香提取部位的抑菌活性成分。醇提水悬萃取法依次获得艾纳香石油醚萃取物,乙酸乙酯萃取物以及水相部位。供试样品浓度依次为1、0.5、0.25、0.125 mg/mL。结果显示:石油醚提取部位活性最强,在1 mg/mL浓度下对Alternaria solani (ACCC 36023)和Fusarium gramineum (ACCC 36249)的抑制率均达到71%。乙酸乙酯部位对菌株Alternaria solani (ACCC 36023)和Fusarium gramineum (ACCC36249)也表现出较强的抑制活性,在浓度为1 mg/mL时,抑制率分别达到58%和69%。结合化学成分薄层预试验,推测石油醚部位中的主要抑菌成分为挥发油和萜类成分,乙酸乙酯部位中主要为黄酮类成分。这意味着艾纳香具有开发为植物源杀菌剂的重要价值。

贵州罗甸与海南儋州的艾纳香种质叶片的显微结构比较

为对海南和贵州两地的艾纳香栽培、定向选育和药材生产提供理论参考,对两地的艾纳香叶片进行石蜡切片显微观测。结果表明:艾纳香叶片为异面叶,栅栏组织、海绵组织分化明显;两种质的艾纳香叶片均为上表皮显著厚于下表皮,海南儋州的艾纳香叶片厚度、上表皮厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度和栅海比均显著高于贵州罗甸的艾纳香种质;两种质艾纳香叶片细胞结构紧密度和细胞结构疏松度均有显著性差异,儋州的艾纳香叶片细胞结构紧密度较大。海南儋州的艾纳香叶片对气温高、日照强的气候具有更好的适应性。

艾纳香口腔护理液安全性评价研究

选用SD大鼠进行口腔黏膜刺激性试验、口腔及黏膜用药急性毒性试验;选用白色豚鼠进行过敏试验;选用昆明种小鼠进行灌胃给药急性毒性试验,观察给药后动物口腔黏膜、受药皮肤、体重变化、全身毒性反应情况及死亡只数。艾纳香口腔护理液在口腔黏膜刺激性试验中,未发现SD大鼠口腔黏膜组织异常;在过敏试验中,白色豚鼠皮肤用药未引起过敏反应;在急性毒性试验中,大鼠的耐受性良好;小鼠灌胃时测得的最大给药量(MLD)为288 mg/kg,相对于成人给药量的1 200倍。上述动物均未见死亡和明显毒性反应。以上试验说明艾纳香口腔护理液无口腔黏膜刺激性和致敏性,无明显急性毒性反应,提示其作为口腔外用护理液临床用药安全。

艾纳香不同部位多酚和黄酮类抗氧化活性研究

以海南产艾纳香为原料,采用紫外—可见分光光度法测定艾纳香不同部位总黄酮、多酚的含量及清除自由基的能力,并分析抗氧化活性与其多酚和总黄酮含量的相关性。艾纳香不同部位提取液均有抗氧化活性,并在一定浓度范围内,与多酚和总黄酮含量存在明显量效关系。相关性分析结果表明,多酚和总黄酮对艾纳香抗氧化活性均有较大贡献,多酚和总黄酮是艾纳香抗氧化活性的主要成分,其中艾纳香功能叶和嫩叶为其主要活性部位。

艾纳香黄酮类化学成分研究进展

艾纳香为我国华南地区的特色地道药材,黄酮类成分是其主要活性成分之一。随着仪器分析技术的进步,现已经从艾纳香中分离出了艾纳香素、槲皮素、鼠李素、柽柳黄素、木犀草素、木犀草素-7-甲醚等黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、查尔酮类等黄酮化合物20余种。药理学研究表明,其具有抗肿瘤、保肝护肝、抗氧化、抗酪氨酸激酶等生物活性。本文主要对艾纳香的黄酮类化学成分和药理活性进行综述,以期为艾纳香中黄酮类化合物的综合开发与利用提供参考。

UPLC-Q-TOF-MS^E技术快速定性艾纳香抗菌有效部位的化学成分

为明确艾纳香药效物质基础,采用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOFMS^E)技术快速鉴定艾纳香有效部位化学成分。色谱柱为BEH C_(18)(100 mm×2. 1 mm,1. 7μm),流动相为0. 1%甲酸水(A)-0. 1%甲酸乙腈(B)梯度洗脱,流速为0. 4 mL/min,电喷雾高分辨质谱分别采用正负离子两种模式进行扫描。结合天然产物词典(DNP,Dictionary of natural products)和文献对化学成分进行定性。乙酸乙酯部位共检测到23种成分,鉴定出22种,石油醚部位检测到25种成分,鉴定出21种。本研究明确了艾纳香有效部位的化学组成,为艾纳香中药物先导化合物的发现提供依据。

艾纳香中绿原酸类化学成分研究

为全面了解海南传统黎药艾纳香抗菌药效物质基础,本研究采用硅胶柱色谱、凝胶色谱以及高效液相色谱技术对艾纳香提取物进行系统化学成分研究。结果显示:共分离鉴定6个绿原酸类成分:3,5-O-二咖啡酰奎尼酸乙酯(1),3,5-O-二咖啡酰奎尼酸甲酯(2),3,4-O-二咖啡酰奎尼酸甲酯(3),3,4-O-二咖啡酰奎尼酸(4),3,5-O-二咖啡酰奎尼酸(5),1,3,5-O-三咖啡酰奎尼酸(6)。化合物1~6均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1为新天然产物。抗细菌活性评价显示化合物3对枯草芽孢杆菌及化合物6对金黄色葡萄球菌均具有较强抑制活性,MIC值均为64μg/mL,推测绿原酸类为艾纳香的重要抗菌活性组成。

艾纳香总黄酮对大鼠皮肤创伤愈合的作用及机制研究

探讨艾纳香总黄酮对大鼠皮肤创伤愈合的影响及其作用机制。取大鼠150只,随机分为模型组、京万红组和艾纳香总黄酮高、中、低组,建立大鼠背部双侧圆形创伤模型,连续给药10 d,测定创面面积,计算愈合率;于术后的1、3、5、7、10 d检测创缘组织IL-1、TNF-α表达量并切取创伤边缘皮肤全层,制片,HE染色后镜下观察创面组织形态学的改变。结果表明:艾纳香总黄酮随药物剂量的增加而提高创面愈合百分率,缩短愈合时间,创伤早期增强创面IL-1、TNF-α的表达。艾纳香总黄酮促进大鼠皮肤创伤的愈合机制之一可能是增强创伤早期炎症因子的分泌,从而促进创面的修复愈合。

艾纳香内生真菌抗细菌和炭疽菌的活性研究

为获得丰富的艾纳香内生真菌资源,筛选出抗性生防菌株,用于活性次生代谢产物的发现,通过水琼脂法对海南产艾纳香进行内生真菌分离,通过ITS序列分析,对其进行鉴定和分析。采用滤纸片法评价内生真菌发酵产物对细菌的抑制活性,采用平板对峙培养法评价艾纳香内生真菌对植物炭疽菌的拮抗作用。本研究共分离鉴定出191株内生真菌,分属于27属,45种,其中优势菌属为Diaporthe、Paraphoma、Ectophoma、Penicillium、Talaromyces、Hypoxylon、Phomopsis、Colletotrichum和Fusarium。抗细菌活性结果显示,Clonostachys、Fusarium和Diapothe属活性较强。抗炭疽病菌试验显示,Talaromyces、Ectophoma和Penicillium属活性较强。本研究初步探讨了海南产艾纳香内生真菌种类的多样性,并首次对其进行了抗病原菌活性筛查,获得的活性菌株可作为微生物源菌剂开发的重要材料。

锰元素对冬季迟缓期的艾纳香幼苗生物量和有效成分含量的影响

以一年生艾纳香种子苗为试验材料,在冬季艾纳香生长迟缓期3次施用锰元素,研究锰元素对冬季生长迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响。结果表明:在冬季艾纳香生长迟缓期,施用锰元素可以显著促进艾纳香的生长和生物量的积累,显著提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量。锰元素极显著提高了冬季生长迟缓期艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标,进而导致艾纳香叶、茎和根生物量的增加,其中以4 g/L Mn处理的艾纳香叶生物量最高,极显著高于其他3个处理;锰元素对艾纳香不同部位中总黄酮相对含量和叶片l-龙脑相对含量提高无促进作用或影响不显著,但是极显著增加了其绝对含量的积累,其中4 g/L Mn处理下叶总黄酮绝对含量最高,其次是1、10 g/L Mn处理,分别是对照的7.62、5.5、4.08倍;4 g/L Mn处理下叶片l-龙脑绝对含量显著高于其他处理。

黔琼产艾纳香中主要化学成分含量差异分析

目的比较贵州和海南产艾纳香药材的质量差异,为艾纳香药材生产与提取加工提供参考。方法采用GC法测定艾纳香中左旋龙脑质量分数,紫外分光光度法测定总黄酮质量分数,并运用方差分析对海南和贵州不同居群间艾纳香左旋龙脑与总黄酮质量分数差异进行分析。结果不同居群间艾纳香总黄酮质量分数差异有统计学意义(P<0.05),而左旋龙脑质量分数差异无统计学意义;海南和贵州2个产区艾纳香在化学成分上存在一些差异,但差异无统计学意义。结论海南产艾纳香可作为加工艾片的原料;本试验所建立的含量测定方法简便、快速、准确,可用于艾纳香左旋龙脑与总黄酮的测定。

赤霉素对冬季迟缓期艾纳香生长和有效成分含量的影响

为研究赤霉素对冬季迟缓期艾纳香生长和有效成分含量的影响,以一年生艾纳香种子苗为实验材料,在冬季艾纳香生长迟缓期喷施3次赤霉素,测定艾纳香的株高、地径、叶长、叶宽、叶干重、叶片总黄酮含量和叶片中l-龙脑含量。结果表明:赤霉素可显著促进艾纳香生长,提高生长指标和叶干重,其中,1mg/L和10mg/L赤霉素的效果最明显。赤霉素可不同程度地抑制艾纳香叶片中总黄酮相对含量的积累,但不同浓度的赤霉素极显著地促进了总黄酮绝对含量的增加,1mg/L赤霉素处理下的总黄酮绝对含量分别是10mg/L、100mg/L和空白处理的1.78倍,2.54倍和4.69倍。赤霉素显著抑制了l-龙脑的积累,但可促进其绝对含量的增加;1mg/L赤霉素处理的艾纳香叶片中l-龙脑绝对含量最高,分别是100mg/L和CK处理的1.57倍和3.67倍。结论:在冬季艾纳香生长迟缓期施加赤霉素可以显著促进艾纳香生长和增加叶干重,提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量。

艾纳香油对紫外线诱导小鼠皮肤晒伤的保护作用

目的研究艾纳香油[Blumea balsamifera(L.)DC.,BBO]对紫外线诱导小鼠皮肤晒伤的保护作用及其作用机制。方法采用急性紫外线UVB辐射小鼠皮肤建立晒伤模型,创面外用艾纳香油,HE染色观察晒伤皮肤组织的病理变化,测定超氧化物岐化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含有量,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测表皮中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHd G)、白细胞介素6(IL-6)及核转录因子-Kappa B(NF-κB)水平,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、P53肿瘤抑制蛋白、肿瘤坏死因子(TNF-α)蛋白表达。结果与模型组比较,艾纳香油显著减少表皮厚度,使小鼠皮肤中SOD活性、GSH和MDA含有量得到恢复,显著降低8-OHd G、IL-6和NF-κB水平,同时抑制P53、PCNA表达。结论艾纳香油能够缓解UVB引起的皮肤晒伤,其机制与增强抗氧化作用,抑制NF-κB信号通路,下调IL-6释放,减少8-OHd G和PCNA水平有关。

钙元素对冬季迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响

以一年生艾纳香种子苗为实验材料,用一水合氯化钙提供钙元素,在冬季艾纳香生长迟缓期进行3次施肥,测定艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标以及生物量。采用紫外可见分光光度法测定艾纳香不同部位中总黄酮的相对含量,并计算总黄酮的绝对含量;采用GC测定艾纳香叶片中l-龙脑的相对含量,并计算l-龙脑的绝对含量。结果表明:钙元素极显著增加了冬季生长迟缓期的艾纳香叶、茎和根生物量,其中5 g/L钙处理组的艾纳香叶生物量极显著高于其他3个处理组,10、15 g/L钙处理下的叶生物量极显著高于空白对照组(CK),分别是对照的3.03倍和2.65倍。钙元素的施加抑制了艾纳香不同部位总黄酮相对含量的积累,然而显著增加了总黄酮绝对含量。5 g/L钙处理组的l-龙脑相对含量和绝对含量最高,分别为0.22%和0.22 g,与10、15 g/L钙和CK组相比,分别增加了37.50%、22.22%、37.50%和100%、100%、450%。在冬季艾纳香生长迟缓期施加钙元素可以显著促进艾纳香叶、茎和根生物量的积累,提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量。