HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的:建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法:通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^(-1)),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^(-1),梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]^(+)m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]^(+)m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果:在1.5625~1600 ng·mL^(-1)浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^(-1),精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取回收率在91.70%~100.28%,基质效应在88.35%~97.55%,稳定性RSD均小于15%。水黄皮素在雌性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.95 h、1214.85 ng·mL^(-1)和11920.43 ng·mL^(-1)·h;在雄性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.19 h、1221.57 ng·mL^(-1)和9983.40 ng·mL^(-1)·h。结论:所建方法符合生物样品定量分析的基本要求,可用于水黄皮素在大鼠血浆中的含量测定及其药代动力学评价;水黄皮素在雌性SD大鼠体内的生物利用度更高。

注射用帕瑞昔布钠肌肉刺激性考察

目的考察注射用帕瑞昔布钠经家兔肌内给药的刺激性,为临床安全用药提供参考。方法采用家兔同体左右侧自身比对法,经股四头肌注射给药,浓度分别为20和5 mg·mL^(-1)。通过一般状况、给药局部肉眼观察、解剖观察及组织病理学检查,综合判断其肌肉刺激性。结果注射用帕瑞昔布钠显示出浓度-肌肉刺激性依赖关系,20 mg·mL^(-1)引起中度刺激且不可逆,5 mg·mL^(-1)引起轻度刺激且可逆。结论注射用帕瑞昔布钠临床使用浓度具有肌肉刺激性风险,在本试验条件下,5 mg·mL^(-1)为肌内注射安全浓度。

金克痤胶囊浸膏粉对小鼠的急性毒性试验研究

目的观察金克痤胶囊浸膏粉对KM小鼠的急性毒性反应情况。方法采用最大给药量法,以最大给药体积40 m L/kg经口给予最大浓度为0.25 g/m L的金克痤胶囊浸膏粉混悬液,24h内给药2次,给药剂量达20 g/kg体重(相当于拟定临床剂量的909倍),给药后连续观察14 d。观察给药后动物饮食、外观、行为、排泄物、中毒反应(症状、严重程度、起始时间、持续时间、是否可逆等)和死亡情况等。称量小鼠给药前、给药后第7、14 d体重。观察期结束对每只小鼠进行大体解剖。结果给药后小鼠体重增加良好,均未见明显中毒反应,无死亡,大体解剖未见异常。结论小鼠经口给予金克痤胶囊浸膏粉后,无毒性反应,其小鼠最大耐受量大于20 g/kg体重(相当于人临床使用剂量的909倍)。

金克痤胶囊浸膏粉对大鼠的长期毒性试验

目的:观察金克痤胶囊浸膏粉连续的反复给药后对大鼠的长期毒性反应及其性质、程度、发展和恢复情况;确定毒性作用的靶器官及其损害的可逆性;预测其可能的对人体产生的不良反应;初步估计供试品不出现毒副反应的剂量水平。方法:将160只SD大鼠,随机分为溶剂对照组及供试品高、中、低3个剂量组,每组40只,雌雄各半,分别给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液、金克痤胶囊浸膏粉2.5,1.25和0.44 g·kg-1(相当于临床拟用剂量的113.6倍,56.8倍和20倍),连续灌胃给药3个月,观察动物的一般状况、体质量、摄食量;给药中期、末期和恢复期后分别采血测定血常规、凝血酶原时间和血清生化指标,并对每只大鼠进行系统解剖,进行脏器称重,计算脏器系数及主要脏器的组织病理学检查。结果:试验过程中,各组动物行为活动、外观体征、粪便颜色、性状等一般状况均正常,均未见与供试品有关的中毒症状及死亡。供试品组与对照组相比,大鼠的体质量、摄食量、血常规、血清生化、主要脏器重量、脏器系数等及组织病理学检查指标均未见与供试品相关的改变。结论:本实验室条件下,大鼠经口灌胃给予金克痤胶囊浸膏粉,未观察到与供试品相关的毒性反应,供试品对大鼠的无可见有害作用剂量(NOAEL)为2.5 g·kg-1剂量(相当于临床拟用剂量的113.6倍,临床等效剂量的18.4倍)。