急性心肌梗死患者PCI术后1年发生主要心血管事件的影响因素及预测模型构建

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后1年发生主要心血管事件(MACE)的影响因素及预测模型构建。方法回顾性选取确诊AMI并行PCI治疗的124例患者,根据术后1年有无MACE发生分为MACE组(n=41)和无MACE组(n=83)。比较两组患者的临床、实验室检查及冠脉造影结果资料,包括年龄、性别、体重指数、吸烟史、合并疾病、既往史、入院时Killip心功能分级、肌钙蛋白(Tn)I、白细胞、血红蛋白、高敏C反应蛋白、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白a[LP(a)]、尿酸、估算的肾小球滤过率(eGFR)、氨基末端脑钠肽原、是否为三支病变、心肌梗死溶栓试验血流评分。分析MACE的相关危险因素并通过二元Logistic回归构建风险模型,通过受试者工作特征曲线评估该模型的效能。结果同无MACE组相比,MACE组TnI、LDL、LP(a)和尿酸水平显著升高,糖尿病和三支病变比例显著上升,eGFR显著下降(均P<0.05)。糖尿病(OR=1.67)、TnI(OR=1.07)、LDL(OR=1.59)、LP(a)(OR=1.32)、eGFR(OR=0.81)和三支病变(OR=2.75)是影响MACE的危险因素。据此所构建的风险模型鉴别MACE的曲线下面积为0.82,敏感性和特异性分别为90.24%和62.65%。结论糖尿病、TnI、LDL、LP(a)、eGFR和三支病变是影响AMI患者PCI术后1年MACE的影响因素。据此所构建的预测模型具有较高的预判效能,可能有助于辅助临床决策。

微小RNA-208a及微小RNA-483联合NT-proBNP对维持性血液透析患者心血管事件发生的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸(microRNA,miR)-208a、miR-483联合氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)预测维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者心血管事件发生的价值。方法选取2016年1月至2019年12月海南西部中心医院收治的MHD患者163例,根据随访6个月期间是否发生心血管事件,分为65例心血管事件组和98例无心血管事件组。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测两组患者血清miR-208a及miR-483浓度,采用酶联免疫吸附法测定NT-proBNP浓度。应用多因素Logistic回归分析对MHD患者心血管事件发生的危险因素进行分析。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析miR-208a、miR-483及NT-proBNP预测MHD患者心血管事件发生的价值。结果心血管事件组患者血清miR-208a(3.28±1.50 vs.1.15±0.46,P<0.001)、miR-483(2.26±1.06 vs.0.73±0.24,P<0.001)及NT-proBNP[(5682.73±290.50)pg/mL vs.(1835.40±174.36)pg/mL,P<0.001]浓度均明显高于无心血管事件组,差异有统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-208a(OR=2.473,95%CI:1.752~5.490)、miR-483(OR=1.962,95%CI:1.358~3.704)及NT-proBNP(OR=2.750,95%CI:1.926~6.483)浓度升高是MHD患者心血管事件发生的危险因素(P<0.05)。ROC分析结果显示,miR-208a、miR-483联合NT-proBNP预测MHD患者心血管事件发生的曲线下面积(area under the curve,AUC)最大(0.942,95%CI:0.882~0.995),其敏感度和特异度分别为97.3%和85.0%。相关分析显示,心血管事件患者血清miR-208a、miR-483浓度与NT-proBNP均呈正相关(P<0.001)。结论心血管事件患者血清miR 208a、miR-483及NT-proBNP浓度明显升高,是MHD患者心血管事件发生的危险因素,3项联合预测心血管事件发生的敏感度较高。

MiRNA-27b对血管紧张素Ⅱ诱导肥大心肌细胞凋亡相关因子表达的影响

目的:观察微小RNA-27b(miR-27b)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导肥大心肌细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达的影响。方法:将H9c2小鼠心肌细胞分为4组,分别为正常对照组、AngⅡ诱导组、miR-27b mimics组和阴性核苷酸组。各组细胞建模培养后分别检测心肌细胞凋亡率,Bax、Bcl-2蛋白和mi R-27b的表达,监测心肌细胞内活性氧(ROS)水平的变化以及总超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:免疫荧光染色可见AngⅡ诱导组心肌细胞均较正常对照组明显肥大,细胞表面积增大,而miR-27b mimics组细胞肥大明显改善(P<0.05)。与正常对照组比较,AngⅡ诱导组Bax蛋白表达上调,而Bcl-2蛋白和miR-27b表达明显下调(P<0.05)。与AngⅡ诱导组比较,miR-27b mimics组Bax蛋白表达则减少,而Bcl-2蛋白和miR-27b表达增加(P<0.05)。与正常对照组相比,AngⅡ诱导组凋亡率显著增加(P<0.01),而与AngⅡ诱导组比较,mi R-27b mimics组凋亡率明显改善(P<0.05)。AngⅡ诱导组心肌细胞ROS水平较正常对照组上升,而总SOD活性下降,2组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与AngⅡ诱导组比较,miR-27b mimics组ROS水平下降,而总SOD活性增加(P<0.05)。结论:miR-27b可能通过调控细胞凋亡的基因转录,参与心肌细胞肥大的发生发展。

miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及PPARα信号的作用机制

目的 研究miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α信号的作用机制。方法 清洁级SD健康雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,由于建模时意外死亡3只,因此健康组10只、模型组9只,miR-27b-NC组9只、miR-27b组9只,miR-27b-NC组及miR-27b组于腹主动脉分别注射5μl(20 nmol/L)拮抗剂阴性对照、5μl(20 nmol/L)miR-27b拮抗剂,其余大鼠注射等体积生理盐水,1次/d,共4 w。苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠心肌组织病理形态及纤维化,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-27b、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)mRNA、PPARα mRNA指标水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌细胞能量代谢指标,TUNEL检测心肌细胞凋亡,免疫印迹检测微管相关轻链蛋白(LC)3Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin)-1、组织蛋白酶(Cath)D表达。结果 HE染色:健康组心肌细胞形态正常,结构清晰;模型组与miR-27b-NC组心肌细胞水肿并有大量炎性细胞浸润,此外还产生大量的成纤维细胞;miR-27b组与模型组相比,成纤维细胞增生及炎性细胞浸润减少。Masson染色:胶原纤维呈现蓝紫色,心肌细胞及肌纤维呈现红色。健康组心肌组织结构正常,心腔附近有少量胶原纤维;模型组与miR-27b-NC组胶原纤维显著增加;与模型组相比,miR-27b组胶原纤维增生有所减少。上述结果均提示建模成功。与健康组相比,模型组与miR-27b-NC组N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、游离脂肪酸(FFA)、心肌细胞凋亡、LC3Ⅱ、Beclin-1、CathD、miR-27b水平显著升高,LC3Ⅰ、AMPK、PPARα水平显著降低(P<0.05),在经过抑制miR-27b后,NT-proBNP、FFA、心肌细胞凋亡、LC3Ⅱ、Beclin-1、CathD、miR-27b水平显著降低,LC3Ⅰ、AMPK、PPARα水平显著升高(P<0.05)。结论 沉默miR-27b表达后可抑制心力衰竭大鼠心肌细胞自噬,减少心肌细胞凋亡,同时通过调控AMPK/PPARα通路改善心肌能量代谢水平,从而起到心保护的作用。

黄芩苷对脂多糖诱导心肌细胞炎症反应和焦亡的抑制作用及其机制

目的观察黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导心肌细胞焦亡、炎症反应的抑制作用并分析其机制。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,取对数生长期细胞分为对照组、LPS组、黄芩苷组,对照组不做干预,LPS组以LPS刺激H9C2细胞构建体外细胞损伤模型,黄芩苷组在LPS诱导后分别加入10、20、40、80μmol/L黄芩苷,CCK-8法检测各组细胞活力,取细胞活力最高的黄芩苷浓度作为最佳作用浓度进行后续实验。而后取对数期H9C2细胞分为对照组、LPS组、黄芩苷组、抑制剂组、黄芩苷+抑制剂组及黄芩苷+激活剂组,除不做干预的对照组外均给予LPS刺激构建细胞损伤模型;黄芩苷组在此基础上给予黄芩苷处理,抑制剂组给予磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路抑制剂LY294002处理,黄芩苷+抑制剂组给予黄芩苷及LY294002处理,黄芩苷+激活剂组给予黄芩苷及PI3K/AKT通路激活剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理。采用ELISA法检测细胞上清液炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6,Western blotting法检测细胞焦亡相关蛋白焦孔素D(GSDMD)、核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)及PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT相对表达量。结果与对照组比较,LPS组细胞上清液炎症因子IL-6、IL-1β水平升高;与LPS组比较,黄芩苷组、抑制剂组IL-6、IL-1β水平降低;与黄芩苷组比较,黄芩苷+抑制剂组IL-6、IL-1β水平降低,黄芩苷+激活剂组IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。与对照组比较,LPS组细胞焦亡相关蛋白GSDMD、NLRP3、Caspase-1表达升高;与LPS组比较,黄芩苷组、抑制剂组GSDMD、NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平降低;与黄芩苷组比较,黄芩苷+抑制剂组GSDMD、NLRP3、Caspase-1蛋白表达降低,黄芩苷+激活剂组GSDMD、NLRP3、Caspase-1蛋白表达升高(P均<0.05)。与对照组比较,LPS组PI3K/AKT通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT表达升高;与LPS组比较,黄芩苷组、抑制剂组p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平降低;与黄芩苷组比较,黄芩苷+抑制剂组p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,黄芩苷+激活剂组p-PI3K、p-AKT蛋白表达升高(P<0.05)。结论黄芩苷能够在LPS诱导的大鼠体外心肌细胞损伤模型中抑制细胞炎症反应及焦亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路激活有关。

注射用益气复脉(冻干)激活PI3K/Akt通路改善小鼠心肌缺血再灌注损伤的机制研究

目的研究注射用益气复脉(冻干)激活磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)通路对小鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的改善机制。方法将56只健康雄性小鼠按照随机数字表法分为4组:假手术组(n=8)、缺血-再灌注(I/R)组(n=16)、缺血-再灌注+注射益气复脉(冻干)组(I/R+YQFM组)(n=16)、缺血-再灌注+注射益气复脉(冻干)组+PI3K/Akt信号通路抑制剂Wortmannin注射液组(I/R+YQFM+Wort组)(n=16)。假手术组小鼠穿线但不结扎冠状动脉,等待缺血25 min后通过腹腔缓慢注射0.9%氯化钠溶液2 mL/kg。I/R组小鼠结扎前降支缺血25 min后通过腹腔缓慢注射0.9%氯化钠溶液2 mL/kg,5 min后再灌注。I/R+YQFM组小鼠同I/R组处理,仅将0.9%氯化钠溶液换为注射益气复脉(冻干)0.867 g/kg。I/R+YQFM+Wort组小鼠术前30 min经腹腔缓慢注射Wortmannin注射液1 mg/kg,其余处理同I/R+YQFM组。记录各组小鼠心脏血流动力学指标[左室舒张末内腔容积(LVESV)、左心室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)],并测算心肌梗死面积。采用蛋白质印迹法分析抗磷酸化Akt(p-Akt)、总Akt(t-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、总GSK3β(t-GSK3β)蛋白表达水平。结果I/R 24 h后,I/R组、I/R+YQFM组、I/R+YQFM+Wort组的LVESV均大于假手术组,FS、EF均小于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05);I/R+YQFM组的LVESV小于I/R组,FS和EF均大于I/R组,差异均有统计学意义(P<0.05);I/R+YQFM+Wort组的LVESV大于I/R+YQFM组,FS和EF均小于I/R+YQFM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。I/R 24 h后,心脏超声检测显示,I/R+YQFM组的梗死面积小于I/R组和I/R+YQFM+Wort组,差异均有统计学意义(P<0.05);I/R组、I/R+YQFM组、I/R+YQFM+Wort组的缺血区面积比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。I/R 24 h后,I/R组、I/R+YQFM+Wort组、I/R+YQFM组的p-Akt、p-GSK3β、p-Akt/t-Akt和p-GSK3β/t-GSK3β蛋白表达水平均高于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05);I/R+YQFM组的p-Akt、p-GSK3β、p-Akt/t-Akt和p-GSK3β/t-GSK3β蛋白表达水平均高于I/R组,差异均有统计学意义(P<0.05);I/R+YQFM+Wort组的上述蛋白表达水平均低于I/R+YQFM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论注射用益气复脉(冻干)可有效改善小鼠MIRI引起的心脏损伤,这可能与激活PI3K/Akt通路抑制心肌细胞凋亡有关。

比索洛尔不同给药时间对慢性心力衰竭患者血浆去甲肾上腺素、肾上腺素和血管紧张素水平的影响

目的观察比索洛尔不同给药时间对慢性心力衰竭患者去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素和血管紧张素(Ang)水平的影响。方法选择2013年3月—-2016年3月海南省西部中心医院心血管内科诊治的轻中度慢性心力衰竭患者56例作为观察组,于同期医院进行健康体检正常者30例为健康对照组。观察组按服药时间分为2亚组各28例:早晨亚组给予早7~8时服用比索洛尔,晚间亚组给予晚19~20时服用比索洛尔,4周为1疗程。治疗前后分别进行动态心电图检测,并于2时、6时、10时、14时、18时、22时共6个时间点检测血浆去甲肾上腺素、肾上腺素、血管紧张素水平。结果观察组心力衰竭患者在6时、10时、14时、18时、22时、次日2时等各个时间点NE、肾上腺素及血管紧张素均高于健康对照组(F=16.325,P=0.000)。采用Pearson分析后,2组受检者心率与NE、肾上腺素及血管紧张素水平呈正相关性(P均<0.05)。治疗后心力衰竭2亚组患者在各个时间点的NE、肾上腺素及血管紧张素均较治疗前显著降低(P<0.05),但昼夜节律异常均未恢复,且2亚组患者治疗前后差异无统计学意义(t=2.856,P=0.135)。结论慢性心力衰竭患者不同时段服用比索洛尔可降低心率及去甲肾上腺素、肾上腺素和血管紧张素水平,但对昼夜节律无显著影响。

贝那普利联合氨氯地平治疗对老年高血压病人血压变异性及血管内皮功能影响

目的探讨贝那普利联合氨氯地平治疗对老年高血压病人血压变异性及血管内皮功能影响。方法选取2016年1月—2017年1月在我科住院的老年高血压病人80例为研究组,以同期老年健康体检者40例为对照组。研究组病人给予贝那普利联合氨氯地平降压治疗。比较对照组和研究组病人治疗前、治疗8周、治疗16周时的24h动态血压,内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)水平,颈动脉内膜中层厚度(IMT)和反应性充血后血管内径的变化率(FMD)。结果治疗前,研究组收缩压变异性(SBPV)、舒张压变异性(DBPV)均高于对照组(t=9.903～19.414,P<0.05);治疗8周时,研究组24hSBPV、白天SBPV、夜间SBPV、24h DBPV、夜间DBPV较治疗前降低(F=10.672～15.786,P<0.05);治疗16周时,研究组24hSBPV、白天SBPV、24hDBPV、白天DBPV较治疗前降低(F=17.788～23.016,P<0.05)。研究组治疗前ET、NO、eNOS、IMT、FMD与对照组相比,差异有统计学意义(t=7.949～20.404,P<0.05);治疗后,研究组ET、IMT进行性下降(F=26.473、65.998,P<0.05),NO、eNOS、FMD进行性升高(F=12.874～62.264,P<0.05)。结论贝那普利联合氨氯地平治疗老年高血压病人临床效果显著,且能改善其血管内皮功能。

血管生成素对稳定性心绞痛择期经皮冠状动脉介入治疗后心肌梗死发生的预测价值

目的探讨稳定性心绞痛患者择期经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后心肌梗死发生的危险因素分析及血管生成素2/血管生成素1(Angpt2/Angpt1)比值的预测价值。方法选取2016年1月至2019年1月间在海南西部中心医院接受择期PCI治疗的心绞痛患者138例作为心绞痛组,同期在本院进行体检的健康志愿者100例作为对照组,对比其血清Angpt2、Angpt1水平及Angpt2/Angpt1比值的差异。根据PCI后90 d是否发生心肌梗死将稳定性心绞痛患者分为心肌梗死组18例、非心肌梗死组120例,对比其临床资料差异。采用Logistic回归分析稳定性心绞痛患者择期PCI后心肌梗死发生的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Angpt2/Angpt1比值对择期PCI后心肌梗死发生的预测价值。结果心绞痛组患者的血清Angpt2水平及Angpt2/Angpt1比值高于对照组,Angpt1水平低于对照组(t=10.693、20.582、10.505,P<0.05)。心肌梗死组、非心肌梗死组患者的吸烟、合并糖尿病、病变血管支数、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、总胆固醇(TC)分布差异有统计学意义(t/χ^(2)=5.560、8.776、13.642、8.145、3.002,P<0.05)。Logistic回归分析发现,吸烟、合并糖尿病及hs-CRP、TC、Angpt2/Angpt1水平较高是稳定性心绞痛患者择期PCI后心肌梗死发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,Angpt2/Angpt1比值预测稳定性心绞痛患者择期PCI后心肌梗死发生的最佳截断值为3.830,AUC为0.717,95%CI=0.608~0.826。对应的敏感度、特异度分别为65.0%、66.67%。结论稳定性心绞痛患者择期PCI后心肌梗死发生的危险因素包括吸烟、合并糖尿病及hs-CRP、TC、Angpt2/Angpt1水平较高,尤其Angpt2/Angpt1比值在早期预测后续心肌梗死发生方面具有一定作用。

急性冠脉综合征患者外周血B淋巴细胞与冠状动脉病变严重程度的相关性

目的 观察急性冠状动脉(冠脉)综合征(ACS)患者外周血B淋巴细胞亚群与冠脉病变严重程度的相关性。方法 前瞻性选取海南西部中心医院2018年1月至2020年1月收治的197例ACS患者作为研究对象,均于治疗前收集资料,检测外周血B淋巴细胞亚群(CD19+、B10、B1b、B1a)水平,均接受经皮冠脉介入(PCI)治疗,于患者脱离生命危险后评估冠脉病变严重程度并分组,分析ACS患者入院时外周血B淋巴细胞亚群水平与冠脉病变严重程度的关系。结果 ACS患者治疗后左室舒张末期内径(LVEDD)较治疗前显著降低,左室射血分数(LVEF)较治疗前明显升高(P<0.05);ACS患者治疗前后CD19+、B10、B1b、B1a比较,差异无统计学意义(P>0.05);197例ACS患者中,有91例冠脉轻度病变,68例中度病变,38例重度病变,冠脉中重度病变患者占53.81%;经回归分析检验结果显示,ACS患者心功能Killip分级Ⅳ级、三支病变、LVEDD高、LVEF低、CD19+表达上调、B10及B1a表达下调均与ACS患者PCI治疗后冠脉病变程度有关,均可能是治疗后中重度冠脉病变的风险因子(P<0.05);绘制受试者工作特征(ROC)曲线发现,ACS患者治疗前LVEDD、LVEF、CD19+、B10、B1a预测冠脉中重度病变的曲线下面积(AUC)均>0.80,有一定预测价值。结论 ACS患者治疗后冠脉病变严重程度与治疗前心功能、病变范围、外周血B淋巴细胞亚群水平密切相关,其中心功能、外周血B淋巴细胞亚群水平均可用于冠脉病变严重程度预测。

前列地尔调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制心肌缺血再灌注损伤诱导的自噬

目的探讨前列地尔[又称前列腺素(PG)E1]对心肌缺血再灌注损伤的影响及其可能的作用机制。方法进行原代乳鼠心肌细胞的分离和培养,将细胞随机分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、PGE1组和PGE1+磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂(LY294002)组,除对照组外,其余组进行H/R处理,CCK-8检测细胞活力;试剂盒检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)产生和凋亡;Western印迹检测细胞微管相关蛋白轻链(LC)3、自噬效应蛋白(Beclin)1、p62、磷酸化(p)-PI3K、PI3K、p-蛋白激酶B(AKT)、AKT、p-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和mTOR蛋白表达。结果成功分离培养原代乳鼠心肌细胞。与对照组相比,H/R组心肌细胞增殖能力显著降低,LDH、CK-MB、MDA和ROS水平显著升高,SOD水平显著降低,凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达显著升高,p62、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低(均P<0.05);与H/R组相比,PGE1组心肌细胞增殖能力显著升高,LDH、CK-MB、MDA和ROS水平显著降低,SOD水平显著升高,凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达显著降低,p62、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR蛋白表达显著升高(均P<0.05);与PGE1组相比,PGE1+LY294002组心肌细胞增殖能力显著降低,LDH、CK-MB、MDA和ROS水平显著升高,SOD水平显著降低,凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达显著升高,p62、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低(均P<0.05)。结论PGE1可改善心肌细胞H/R损伤,抑制H/R诱导的自噬,该作用是通过激活PI3K/AKT/mTOR通路实现的。

白藜芦醇阻断TGF-β1/Smad信号通路抑制脑胶质瘤细胞迁移侵袭及上皮间质转化

目的探究白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞黏附、迁移、侵袭、上皮间质转化(EMT)及转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的调控作用。方法体外培养人脑胶质瘤T98G细胞,分为对照组(不做干预)、实验组(12.5μmol·L^(-1)白藜芦醇组、25μmol·L^(-1)白藜芦醇组、50μmol·L^(-1)白藜芦醇组)、5-氟尿嘧啶组(50 mg·L^(-1)的5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(50μmol·L^(-1)白藜芦醇+10μmol·L^(-1) TGF-β1/Smad通路抑制剂LY2109761)和激活剂组(50μmol·L^(-1)白藜芦醇+10μmol·L^(-1)TGF-β1/Smad通路激活剂SRI-011381),干预24 h。用细胞计数试剂盒比色(CCK-8)、倒置显微镜、黏附实验、划痕实验、Transwell小室及蛋白印迹(Wb)法对细胞活力、形态、黏附、迁移、侵袭能力及EMT和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平进行分析。结果与对照组比较,12.5、25μmol·L^(-1)白藜芦醇组对细胞活力没有显著变化(P>0.05),50μmol·L^(-1)白藜芦醇组和5-氟尿嘧啶组的细胞活力显著降低(P<0.05),12.5、25μmol·L^(-1)白藜芦醇组较5-氟尿嘧啶组细胞活力显著升高(P<0.05)。其中50μmol·L^(-1)白藜芦醇组细胞活力接近50%且与5-氟尿嘧啶组差异无统计学意义(P>0.05),因此,选择在该浓度基础上分别加入TGF-β1/Smad通路抑制剂LY2109761和激活剂SRI-011381进行TGF-β1/Smad通路验证,且实验组中不再选取12.5和25μmol·L^(-1)白藜芦醇组进行后续实验,其他组别不变。与对照组相比,50μmol·L^(-1)白藜芦醇组和5-氟尿嘧啶组T98G细胞生长受到抑制、细胞黏附、迁移、侵袭能力及N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平显著降低,而E-钙粘蛋白(E-cadherin)、Smad7蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与50μmol·L^(-1)白藜芦醇组相比,抑制剂组T98G细胞生长进一步受到抑制、细胞黏附、迁移、侵袭能力、N-cadherin、Vimentin、FN、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而E-cadherin、Smad7蛋白表达水平显著增加(P<0.05);激活剂组较50μmol·L^(-1)白藜芦醇组T98G细胞生长状态较好,细胞黏附、迁移、侵袭能力、N-cadherin、Vimentin、FN及TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而E-cadherin、Smad7蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论白藜芦醇可显著抑制人脑胶质瘤T98G细胞的生长、黏附、迁移及侵袭,其作用机制可能与通过抑制TGF-β1/Smad通路的信号转导抑制EMT进程相关。

白藜芦醇调控TGF-β1/Smad信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的探究白藜芦醇调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法将人脑胶质瘤T98G细胞分为对照组、25μmol/L白藜芦醇组、50μmol/L白藜芦醇组、100μmol/L白藜芦醇组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、LY2109761(LY)组和SRI-011381(SRI)组,干预24 h。用活细胞计数、5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷、Hoechst 33258染色、黏附实验、Transwell小室及蛋白免疫印迹法分析细胞活力、增殖、凋亡、黏附、侵袭能力及细胞周期蛋白D1、半胱氨酸蛋白酶-3和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平。结果50、100μmol/L白藜芦醇组和5-FU组较对照组的细胞活力降低(P<0.05)。50μmol/L白藜芦醇组和5-FU组较对照组细胞增殖率、黏附、侵袭能力及细胞周期蛋白D1、TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平降低,而细胞凋亡、半胱氨酸蛋白酶-3和Smad7蛋白表达水平增强(P<0.05);LY组上述指标的变化进一步增强(P<0.05),而SRI组上述指标则与LY组的趋势相反(P<0.05)。结论白藜芦醇可抑制人脑胶质瘤T98G细胞的增殖、黏附、侵袭,并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路的活化有关。

急性心肌梗死患者PCI术中血栓事件相关危险因素及转归分析

目的分析急性心肌梗死（AMI）患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术中血栓事件（IPTE）的发生率、临床病变及相关危险因素等特点。探讨IPTE对于心脏结构功能及主要不良心脏事件（MACE）的影响。方法选择2013年1月至2014年12月在海南省人民医院心血管内科连续收治的确诊为AMI并在住院期间接受PCI术的836例患者为研究对象,其中男708例,平均年龄61.05±11.96岁;女128例,平均年龄68.18±10.42岁。将PCI术中出现血栓事件的患者入选IPTE组,未出现血栓事件的患者入选NIPTE组。所有入选患者行PCI术前送检血常规、血生化、凝血功能等指标。依据GRACE评分、CURSADE评分、SYNTAX积分及血栓负荷积分等进行危险分层,并应用独立样本t检验、多因素Logistic回归等方法进行分析。结果入选患者中出现IPTE 166例（19.86%）,未出现IPTE 670例。IPTE组与NIPTE组SYNTAX积分无显著差异,但血栓负荷积分显著高于NIPTE组（1. 11±0. 78比0.57±0.70,P〈0.001）。IPTE组患者入院时首次CK-MB（127.20±138.36 U/L比89.67±139.25 U/L,P〈0.01）、首次TNT（2.30±3.04μg/L比1.81±2.59μg/L,P〈0.05）、hs-CRP（28.90±43.97 mg/L比22.96±30.92 mg/L,P〈0.05）、白细胞数（11.50±3.94 109/L比10.43±3.63 109/L,P=0.001）及Hcy（17. 26±15. 28μmol/L比14. 41±8. 33μmol/L,P 〈0.05）显著高于NIPTE组。IPTE组患者心力衰竭发生率较高（30.1%比22.2%,P〈0.05）,两组死亡、再梗死、心源性休克、心脏骤停等事件无显著差异。多因素Logistic回归分析显示,年龄（OR=1.039,95%CI为1.017~1.062,P〈0.001）、血糖（OR=1.107,95%CI为1.023~1.197,P〈0.05）、FIB降低（OR=0.758,95%CI为0.644~0.893,P〈0.05）、TT缩短（OR=0.994,95%CI为0.990~0.998,P〈0.01）、Hcy（OR=1.033,95%CI为1.010~1.058,P〈0.01）、RBC（OR=2.078,95%CI为1.357~3.183,P〈0.01）、TNT（OR=1.144,95%CI为1.048~1.249,P〈0.01）以及血栓负荷积分（OR=2.773,95%CI为2.067~3.719,P〈0.001）是出现IPTE的独立危险因素。结论本研究中AMI患者PCI术中IPTE发生率为19.86%; IPTE组患者合并心力衰竭发生率较高;多因素Logistic回归分析显示年龄、血糖、FIB、TT、Hcy、RBC及血栓负荷积分是AMI患者PCI术中出现IPTE的独立危险因素。

急性心肌梗死患者PCI术中血栓事件不同亚群单核细胞及单核细胞-血小板聚集体的变化

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)过程中,术中血栓事件(IPTE)的出现情况;分析出现和不出现IPTE的情况下,单核细胞、不同单核细胞亚群以及单核细胞-血小板聚集物(MPA)的变化。方法入选的AMI患者PCI术前抽血进行单核细胞亚群和MPA的四色流式细胞术检测。根据血小板表面标志CD41的表达,利用绝对计数管中的荧光微球,进一步对单核细胞及3个亚群进行MPA的数量进行分析。采用Wilcoxon秩和检验、受试者工作曲线(ROC)等检验方法分析。结果 IPTE组CD14+CD16++单核细胞较非IPTE组明显减少,且占总单核细胞百分比下降。与非IPTE组患者相比,IPTE组MPA、各亚群与MPA以及结合比例均显著高于非IPTE组患者。各组患者的受试者工作特征(ROC)曲线分析显示MPA结合比率以及各亚群MPA结合比率对AMI患者PCI术中发生IPTE有较好的预测价值。结论 IPTE组患者中CD14+CD16++单核细胞亚群较非IPTE组患者显著减少,MPA结合比率及各单核细胞亚群MPA结合比率均显著高于非IPTE组患者,对于AMI患者PCI术中发生IPTE有较好的预测价值。

老年呼吸机相关肺炎病原菌分布及头孢哌酮/舒巴坦的治疗效果及不良反应

目的探讨老年呼吸机相关性肺炎(VAP)的病原菌分布及实施头孢哌酮舒巴坦治疗的临床效果及不良反应。方法 49例老年VAP患者的资料进行病原菌分布情况检测和统计,均实施头孢哌酮/舒巴坦治疗,统计治疗有效率与不良反应发生情况以及病原菌清除效果。并在治疗前后对患者的肝肾功能相关指标进行检测,包括肌酐、尿素氮、天冬氨酸氨基、丙氨酸氨基转氨酶。结果共检出49株病原菌,其中铜绿假单胞菌与大肠埃希菌以及肺炎克雷伯菌占大多数;头孢哌酮/舒巴坦治疗总有效率为77.55%;入组患者均未出现皮疹与呕吐等不良反应,治疗前后患者肝肾功能各项指标均未出现异常变化(均P>0.05)。患者获得了理想的清除效果,嗜麦芽寡养单胞菌、不动杆菌属、肺炎克雷伯菌的清除率分别达到100.00%、75.00%以及90.00%。结论老年VAP的病原菌主要为铜绿假单胞菌与大肠埃希菌以及肺炎克雷伯菌等,实施头孢哌酮/舒巴坦治疗可以获得理想的效果,且无明显不良反应的出现。

老年冠状动脉不同病变程度患者治疗后斑块稳定性的临床分析

目的分析老年冠状动脉不同病变程度患者择期行PCI后斑块稳定性的临床意义。方法选取2018年3月~2019年6月于我院住院并成功进行择期PCI术的208例老年冠心病患者,按照疾病严重程度的不同将患者分为单支组(85例)、双支组(71例)及多支组(52例)。分别于PCI前及PCI后3 d,检测血清中血管内皮功能指标[NO、血栓素B2(TXB2)]、内皮素、细胞凋亡相关分子[可溶性凋亡相关因子(sFas)及其sFas配体(sFasL)、B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)]、炎性反应指标[高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]及斑块稳定性指标[脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、组织蛋白酶K(Cat K)、五聚素3(PTX3)]。结果PCI后,单支组Bcl-2、NO均显著高于双支组、多支组[(8.50±1.03)ng/L vs(7.80±0.95)ng/L和(6.87±0.91)ng/L,(83.58±6.87)ng/L vs(77.76±6.18)ng/L和(70.51±6.12)ng/L,P<0.05],且双支组显著高于多支组(P<0.05);PCI后,单支组内皮素、TXB2、sFas、sFasL、MMP-9、hs-CRP、IL-6、Cat K、PTX3、Lp-PLA2、LOX-1均显著低于双支组、多支组(P<0.05),且双支组显著低于多支组(P<0.05)。结论择期PCI可在一定程度上造成老年冠心病患者血管内皮损伤,引发炎性反应,并诱导心肌细胞凋亡,致使斑块稳定性降低,且病变支数越多,越不利于稳定动脉粥样硬化斑块。

瑞替普酶联合替罗非班治疗老年STEMI患者的疗效及对凝血功能的影响

目的探讨瑞替普酶联合替罗非班静脉溶栓治疗老年急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)的疗效及对凝血功能的影响,为临床安全用药提供依据。方法选取2015年1月-2018年10月儋州市中医院及海南西部中心医院收治的老年STEMI患者116例,按随机数字表法将患者分为观察组(n=58)和对照组(n=58)。对照组给予瑞替普酶溶栓干预,观察组给予替罗非班联合瑞替普酶溶栓干预。观察两组溶栓治疗后60 min、90 min和120 min血管再通率,比较两组心血管不良事件、出血事件及凝血酶时间(thrombin time,TT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)及纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)水平。结果观察组溶栓后60 min (67.2%vs 36.2%)、90 min (81.0%vs 63.8%)和120 min (93.1%vs 72.4%)血管再通率均明显高于对照组(P均<0.05)。观察组住院期间梗死后心绞痛(8.6%vs 22.4%)、心力衰竭(3.4%vs 15.5%)及再梗死发生率(1.7%vs 12.1%)均明显低于对照组(P均<0.05)。观察组住院期间总出血事件发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗后两组TT、PT及APTT水平较治疗前均明显延长,且观察组治疗后TT、PT及APTT水平明显高于对照组(P <0.05)。治疗后两组FIB水平较治疗前均明显降低,且观察组治疗后FIB水平明显低于对照组(P <0.05)。结论瑞替普酶联合替罗非班治疗老年STEMI的临床效果较好,能改善患者的凝血功能。

PARP-1通过调节HMGB1乙酰化和核移位促进缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的:探究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的作用及其机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,将其分为对照组、H/R组、PARP-1特异性抑制剂氨基苯甲酰胺(3-AB)处理组(3-AB组)、3-AB+过表达空载(3-AB+oe-NC)组和3-AB+过表达HMGB1(3-AB+oe-HMGB1)组。除对照组外,其他各组均予H/R处理。采用CCK-8法检测细胞活力,EdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫沉淀法检测HMGB1乙酰化,免疫荧光染色检测细胞中HMGB1的表达,western blotting法检测细胞PARP-1、HMGB1、Beclin1、LC3和p62蛋白表达。结果:与对照组比较,H/R组H9c2细胞活力、EdU阳性细胞数、p62蛋白表达明显降低,细胞凋亡率和PARP-1、HMGB1、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显升高,HMGB1乙酰化水平升高(均P<0.05),胞核HMGB1蛋白转移至胞质。与H/R组比较,3-AB组H9c2细胞活力、EdU阳性细胞数、p62蛋白表达明显升高,细胞凋亡率和PARP-1、HMGB1、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显降低,HMGB1乙酰化水平降低(均P<0.05),HMGB1蛋白滞留于胞核。3-AB+oe-NC组与3-AB组各指标比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。与3-AB+oe-NC组比较,3-AB+oe-HMGB1组H9c2细胞活力、EdU阳性细胞数、p62蛋白表达明显降低,细胞凋亡率和HMGB1、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达及HMGB1乙酰化水平明显升高(均P<0.05),胞核HMGB1蛋白转移至胞质,而两组PARP-1蛋白表达比较无明显差异(P>0.05)。结论:抑制PARP-1通过抑制HMGB1乙酰化和核移位减轻H/R诱导的心肌细胞凋亡和自噬,促进细胞增殖。

血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879联合Hs-cTnI在急性心肌梗死患者中的表达及其临床意义

目的探讨血清环状RNA(CircRNA)_0050908、CircRNA_0001879联合高敏心肌肌钙蛋白I(Hs-cTnI)在急性心肌梗死(AMI)患者中的表达及其临床意义。方法选取2018年1月至2021年6月海南西部中心医院收治的AMI患者108例作为研究对象(AMI组),另选取健康体检者50名作为对照组。检测两组研究对象血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI水平并比较。采用ROC曲线评估CircRNA_0050908、CircRNA_0001879联合Hs-cTnI诊断AMI及预测心血管不良事件的效能。采用Pearson相关分析AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平与Hs-cTnI水平的相关性。结果AMI组患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI水平均明显高于对照组(均P<0.01)。ROC曲线显示,CircRNA_0050908、CircRNA_0001879及Hs-cTnI3项联合诊断AMI的AUC为0.970(95%CI:0.910~0.995),灵敏度为0.982,特异度为0.913;3项联合预测心血管不良事件的AUC为0.929(95%CI:0.872~0.976),灵敏度为0.943,特异度为0.875。Pearson相关分析显示,AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879水平与Hs-cTnI水平均呈正相关(r=0.830和0.751,均P<0.01)。结论AMI患者血清CircRNA_0050908、CircRNA_0001879表达水平明显升高,联合Hs-cTnI检测有助于提高AMI诊断及心血管不良事件预测的准确性。