KED碰撞模式-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定血液、尿液中8种重金属和准金属元素

在金属中毒与死亡案件中,实验室常用的标准曲线法对人体内重金属和准金属元素定量分析的准确性易受不同人群血液、尿液基质差异以及基质效应的影响,为此建立了直接稀释-电感耦合等离子体质谱结合标准加入法测定人体血液和尿液中Cr、Co、Ni、As、Cd、Sb、Pb、Tl等8种重金属和准金属元素含量的方法。优化了碰撞气流量和载气流速,提高了对8种目标元素定性定量的灵敏度;探究了不同体积分数下ICP-MS增敏剂Triton X-100和乙醇对元素响应值的影响,采用0.1%HNO 3-0.05%Triton X-100混合溶液作为血液稀释剂稀释检材50倍,0.1%HNO 3-1%乙醇混合溶液作为尿液稀释剂稀释检材10倍,提高样品溶液中元素的响应值的同时避免了未消解有机物对仪器信号的影响。标准加入法的应用避免引入其他空白样品定量目标元素,保持定量过程中基质的一致性从而克服了样品中的基质效应,采用动能歧视(KED)模式对直接稀释后的目标元素进行测定,干扰离子与He碰撞裂解有效降低了多原子离子干扰,并选择60 s的清洗时间降低了元素的记忆效应。结果表明,各元素检出限(LOD)为0.006~0.063μg/L,定量限(LOQ)为0.02~0.21μg/L,血液和尿液中的加标回收率为78.8%~118%,日内和日间精密度均小于8.7%。建立的方法快速准确、灵敏度高、操作安全,方法及相关数据可以为相关案件中血液、尿液检材中重金属和准金属元素的检验鉴定提供方法参考和数据支撑。

电感耦合等离子体质谱-标准加入法测定中毒尸体中镉元素的含量

为研究镉元素在中毒尸体内的分布情况,提出了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)-标准加入法测定中毒尸体中镉元素含量的方法。收集镉中毒尸体的生物体液(心脏全血、胆汁、胸腔积液)和固体组织(心、脾、肺、肾、脑、胃),取6份250μL生物体液或组织匀浆,各加入6个浓度水平的镉标准溶液系列(以铟为内标)和硝酸,在最高消解温度170℃下消解10 min,用2%(体积分数)硝酸溶液定容至10 mL,采用ICP-MS测定,以镉含量为横坐标,镉与铟的信号强度比值为纵坐标进行线性回归,工作曲线延长线与x轴交点的绝对值为样本中镉的含量。结果显示:中毒尸体中镉含量分布不均匀,肾中镉的质量分数为7 200.32 ng·g^(-1),而脑中镉的质量分数仅为24.88 ng·g^(-1);镉回收率为82.5%~94.1%,日内和日间测定值的相对标准偏差(n=6)均小于10%。

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定血液和肝脏中12种拟除虫菊酯类农药

建立了超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-QE-Orbitrap HRMS)测定血液和肝脏中12种拟除虫菊酯类农药的分析方法。血液和肝脏样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Hypersil GOLD VAN⁃QUISH色谱柱(1.9μm,2.1 mm×100 mm),以5 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)和甲醇作为流动相进行梯度洗脱分离,采用全扫描及自动触发二级质谱(Full MS/dd-MS2)进行检测。结果显示:12种拟除虫菊酯类农药在各自线性范围内线性良好(r2≥0.9904),血液和肝脏中的检出限分别为1~18 ng/mL和1~18 ng/g,定量下限分别为2~20 ng/mL和2~20 ng/g,基质效应为82.3%~117%,回收率为74.1%~120%,日内精密度(In⁃tra-RSD)≤11%,日间精密度(Inter-RSD)≤12%。该方法满足公安机关办理实际案件要求,适用于血液和肝脏样本中拟除虫菊酯类农药的检验鉴定。

QuEchERS结合GC-MS/MS检测血液中的13种拟除虫菊酯类农药

本研究应用QuEchERS法提取净化血液中拟除虫菊酯类农药,拟建立13种拟除虫菊酯类农药在血液样本中的GC-MS/MS检测方法。血液样品采用乙酸乙酯萃取、无水MgSO_(4)盐析振荡离心后,取上清液并移入装有20 mg PSA、30 mg C18、15 mg GCB粉末的离心管中净化,氮吹复溶后,使用GC-MS/MS多重反应监测(MRM)模式对检材进行定性定量分析。结果表明,13中拟除虫菊酯类农药的血液样本均能通过GC-MS/MS技术进行检测,在5~500μg·L^(-1)范围内,相关系数(R 2)在0.9937~0.9993之间,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别在0.2~2μg·L^(-1)、0.5~2μg·L^(-1)之间,平均回收率为73.49%~108.09%,日内精密度为1.30%~10.31%,日间精密度为1.70%~10.80%。该方法操作简便、检出限低、结果可靠,适用于法庭科学中血液样品中拟除虫菊酯类农药的检测。

生物检材中有机磷农药代谢物检测技术研究进展

有机磷农药代谢物检测分析在有机磷农药中毒、投毒案件定性、临床诊断和生物监测等方面发挥着重要作用。发展精确检测痕量甚至超痕量有机磷农药代谢物的技术,建立检测生物样本复杂基质中有机磷农药代谢物的方法,成为法庭科学领域亟待解决的问题之一。目前国内外常见的实验室检测方法有气相色谱、气相色谱-质谱联用、液相色谱-串联质谱等,本文重点综述了这些检测方法在有机磷农药代谢物检测方面的研究进展,以及血液、尿液等生物检材所需的液-液萃取、固相萃取、QuEChERS等前处理技术和毛发生物检材所需的固-液萃取等前处理技术。此外,本文还介绍了荧光探针法、免疫分析法、生物传感器法等快速检测技术的原理及应用进展,并对现有检测技术存在的问题进行了总结。

氧化乐果在血液中的分解动力学

目的研究氧化乐果在血液中的分解动力学变化规律。方法血液中加入乙腈沉淀蛋白,色谱柱采用Waters BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为5 mmol/L乙酸铵水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为2μL;电喷雾离子(electrospray ionization,ESI)源,正离子检测,采用多反应监测模式进行定性定量分析。取空白人血液分别添加氧化乐果标准品至质量浓度为0.78、1.40、2.30、4.50、7.20μg/mL,每种质量浓度均分别置于-20℃、4℃、20℃三种温度条件下保存,于不同时间点(0、1、3、4、7、11、15、24、32、40、48、64、80、96和120 d)检测其中氧化乐果的含量。结果在不同温度环境下,不同质量浓度的氧化乐果在人血液中均呈下降趋势,在-20℃、4℃、20℃保存环境下分解符合一级动力学过程一室开放模型,可以采用C_t=C_oe^(-αt)表示,根据C_t=C_oe^(-αt)计算的各样品中氧化乐果含量理论值与实测值接近。结论不同质量浓度的氧化乐果在血液中均存在分解现象,且在不同保存环境条件下存在很大差异,实际检案中对疑似氧化乐果中毒的案件,提取检材后应冷冻保存并及时送检。

敌敌畏在血液中的分解动力学研究

目的研究敌敌畏在血液中的分解动力学变化规律。方法分解动力学的研究:空白人血分别添加敌敌畏至浓度为0.36、0.72、1.5、3.0、5.3μg/mL,每种浓度再平均分成3组,分别置于20、4、-20℃三种温度条件下保存,于不同时间(1、2、4、6、8、12、16、20、24、28、32、40、48、64、80、96、120d)取样,检测其中敌敌畏的含量;样品的处理:血液中加入乙腈沉淀蛋白,采用Waters BEH C 18(1.7μm 2.1×50mm)柱子,流动相为5m M乙酸铵水溶液-甲醇;流速:0.3mL/min;进样量:2μL,电喷雾离子源(ESI),正离子检测,采用多反应监测方式进行定量分析。结果在不同温度环境下不同浓度的敌敌畏在人血中均存在分解,在-20℃和4℃保存环境下分解符合一级动力学过程一室模型,可以用Ct=Coe-αt表示,在20℃保存环境下分解过快,不宜用动力学方程表示。结论不同浓度的敌敌畏在血液中均存在分解,且在不同保存环境条件下存在很大差异。提示法医工作中对疑似敌敌畏中毒案件,应冷冻保存并及时送检。

血液中13种有机磷农药代谢产物的QuEChERS-超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道离子阱高分辨质谱法检测

建立了QuEChERS结合超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱高分辨质谱(UPLC-Q Exactive Orbitrap HRM S)同时检测血液中13种有机磷农药代谢产物的方法。血液样品经甲醇-乙腈溶液(3:2,V/V)提取,优化的QuEChERS方法净化后,进行UPLC-Q Exactive Orbitrap HRM S检测。实验结果显示:13种有机磷农药代谢产物在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.9969,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别在0.2~10 ng/mL和0.5~10 ng/mL之间;在20,50,100 ng/mL 3个添加水平下,13种有机磷农药代谢产物的回收率为60.6%~119.0%,基质效应为54.4%~122.1%,日内和日间精密度RSD均小于11%。该方法适用于公安机关在办理有机磷农药中毒案(事)件中对血液里多种有机磷农药代谢产物的检测鉴定。

拟除虫菊酯类农药残留检测技术研究进展

拟除虫菊酯类农药的使用对食品安全、环境安全及人类健康造成了严重的隐患,加强农药残留检测成为多方关注的焦点。概述了当前应用于拟除虫菊酯农药检测的主要仪器检测方法,气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用技术、液相色谱-串联质谱技术,同时介绍了免疫分析法、表面增强拉曼技术等快速检测方法。对当前拟除虫菊酯类农药实际检测工作中存在的问题及今后研究发展的方向进行讨论与展望。

山东汉族群体39个STR基因座遗传多态性

本研究对中国山东1 030名健康无关汉族个体39个常染色体STR基因座进行遗传多态性调查。应用AGCU EX22和AGCU 21+1 STR荧光检测试剂盒对样本进行扩增及检测。结果在39个常染色体STR基因座共检测出425种等位基因,其分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。该系统在汉族人群中具有较好识别能力。

UPLC-MS/MS检测人血中18种有机磷及氨基甲酸酯类农药

目的建立人血中18种有机磷及氨基甲酸酯类农药超高压液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。方法血液中加入乙腈沉淀蛋白,采用Waters BEH C18(1.7μm 2.1×50mm)柱子,流动相为5mmol/L乙酸铵水-甲醇,流速:0.3m L/min;进样量:2μL,电喷雾离子源(ESI),正离子检测,采用多反应监测方式进行定量分析。结果药物最小检测限(LOD)在0.1~40ng/m L之间,定量限(LOQ)在0.5~50ng/m L之间,各药物浓度在定量限到500ng/m L范围内线性良好,回收率均在64.3%~111.9%之间,相对标准偏差为3.9%~10.3%。结论该方法专属性强、灵敏、准确,可以适用于法庭与临床毒物分析。

触摸痕中接触DNA检验概述

接触DNA是指人体与客体相接触后遗留在客体表面的细胞内含有的遗传物质。接触DNA的检验鉴定作为一项较新的技术,在日常工作实践中已被广泛应用。基于接触DNA检验的相关研究在国内外均受到重视,本文借助相关文献,对皮肤触摸痕中接触DNA的形成原理、发现与提取、检验中的影响因素以及对检验结果正确地解读和利用等问题进行阐述,以期为相关研究和应用提供参考和借鉴。

甲胺磷在人血中的分解动力学研究

建立人血中甲胺磷的分解动力学模型,研究甲胺磷在人血中的分解动力学变化规律。取空白人血分别添加甲胺磷至浓度为0.8、1.4、2.2、4.4、6.4μg/m L,每种浓度再平均分成3组,分别置于20℃、4℃、-20℃3种温度条件下保存,于不同时间(0d、1d、3d、5d、7d、11d、15d、24d、32d、40d、48d、64d、80d、96d、120d)取样,检测其中甲胺磷的含量,并采用多反应监测方式进行定量分析。在不同温度环境下,不同浓度的甲胺磷在人血中均存在分解,20℃、-20℃保存环境下分解符合一级动力学过程二室开放模型,可以用Ct=Coe-αt+C1e-βt表示;4℃保存环境下分解符合一级动力学过程一室模型,可以用Ct=Coe-αt表示。不同浓度的甲胺磷在血液中均存在分解,且在不同保存环境条件下存在很大差异,在法医工作实践中,对疑似甲胺磷中毒案件应冷冻保存并及时送检。

三种DNA提取纯化方法对PCR抑制的比较

PCR抑制剂广泛存在于现场生物检材中,会随提取的DNA一起,影响PCR反应的各个环节,继而降低DNA检测成功率[1],增加了DNA检验的难度。笔者自制了几种含有常见抑制剂的生物检材,用三种方法提取纯化,并对其检验效果进行比较,为法庭科学实践提供参考依据,现报道如下。

手套印痕的DNA检验2例

近年来,随着犯罪分子反侦察意识的增强,戴手套作案的比例大幅上升。大多数技术员认为,在手套触摸痕迹中,指纹的提取几乎没有可能,更不可能提取到生物物证,因此,常常忽略此类现场的检材提取。笔者通过对本地多起戴手套作案现场提取的手套印痕进行DNA检验,成功检出两例犯罪嫌疑人DNA分型,为案件侦破提供了重要线索,现报道如下。