5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人胰腺癌细胞系MiaPaca2生长和RUNX3基因甲基化的影响

目的探讨去甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对胰腺癌细胞系MiaPaca2生长的影响，以及对RUNX3抑癌基因表达和甲基化的影响。方法光镜观察5-Aza-CdR处理前后MiaPaca2细胞形态学变化，四甲基偶氮唑蓝法检测5-Aza-CdR对MiaPaca2细胞增殖活性的影响，半定量逆转录聚合酶链反应检测RUNX3mRNA表达的变化，甲基化特异性聚合酶链反应检测RUNX3基因甲基化的变化。结果经2．5、5、10和20μmol／L5-Aza-CdR处理24h后，MiaPaca2细胞的抑制率分别为（9．17±2．15）％、（10．754-2．04）％、（12．574-1．64）％和（18．70±1．51）％；48h后分别为（14．94±1．68）％、（18．60±1．57）％、（22．84±1．58）％和（33．24±1．53）％；72h后分别为（21．46±1．60）％、（28．62±1．72）％、（35．14±1．64）％和（45．06±1．47）％；96h后分另0为（26．35±1．71）％、（34．48±1．69）％、（40．05±1．60）％和（49．99±1．61）％。各实验组与对照组抑制率比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。在同一时点，各浓度组间MiaPaca2细胞的抑制率差异均有统计学意义（均P〈0．05）。在48、72、96h时，各浓度组抑制率两两比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。在药物处理24h以后，5-Aza．CdR对MiaPaca2细胞的生长抑制作用随着-Aza-CdR浓度的增加而增强。5-Aza-CdR能够逆转RUNX3基因的甲基化状态，恢复RUNX3mRNA的表达。结论RUNX3基因甲基化状态与胰腺癌的发生发展密切相关，异常甲基化可能是引起RUNX3基因表达缺失的重要机制。5-Aza-CdR可以逆转MiaPaca2细胞RUNX3基因的甲基化状态，重新激活其表达，从而抑制肿瘤细胞的生长，为胰腺癌的诊断和治疗提供了一条新途径。