医学检验本科专业人才培养模式改革探讨

进入21世纪,随着我国医学检验本科教育由五年制改为四年制,如何保证和提高医学检验学生的教育质量,培养出合格的临床检验人才,已成为高等医学教育改革的主要课题。通过对目前学生培养存在问题的分析,应用"卓越检验师"培养计划,从调整教学计划,修订教学大纲;围绕素质教育,加强教材建设;改革理论教学,以临床需要带动学校教育;加强实验教学,突出学生实践能力的培养等方面的论证,初步探讨了四年制医学检验本科专业人才培养的新模式。

接受索磷布韦/维帕他韦治疗的慢性丙型肝炎患者免疫检查点TIM-3、PD-1表达情况及临床意义

目的观察接受索磷布韦维帕他韦治疗的慢性丙型肝炎(CHC)患者免疫检查点T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)、程序性细胞死亡受体-1(PD-1)的表达及临床价值。方法选择2020年8月—2022年8月南京医科大学附属淮安第一医院收治的120例CHC患者作为CHC组,另选取同期于本院体检的118例研究对象,将其作为健康对照组,CHC组给予CHC组患者索磷布韦/维帕他韦治疗,连续治疗3个月。比较两组血生化指标、单核亚群细胞以及各亚群TIM-3、PD-1水平进行检测。结果未进行治疗时,CHC患者血清ALT、AST水平分别为[(74.0±35.8)U/L、(55.1±26.0)U/L]相较于健康对照组[(14.9±6.3)U/L、(19.2±7.0)U/L]显著升高;在治疗3个月末,CHC患者PD-1 CD4、PD-1 CD8、TIM-3 CD8、TIM-3 CD4水平分别为[(0.6±0.1)%、(1.7±0.6)%、(2.5±1.0)%、(6.5±1.0)%]比对照组[(0.4±0.1)%、(1.5±0.7)%、(1.7±0.8)%、(6.0±2.4)%]高(均P<0.05)。结论索磷布韦/维帕他韦治疗CHC,有助于患者肝功能的改善,而CHC患者存在外周血部分淋巴细胞比例紊乱,负性免疫检查点分子的高表达可对细胞免疫进行调控,对于单药治疗未见症状改善的患者,可在应用索磷布韦治疗的基础上加用维帕他韦治疗。

丝裂原蛋白激酶两种抑制剂对弓形虫侵入宿主细胞影响的差异

目的观察两种丝裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响,探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的不同阻断效应。方法丝裂原蛋白激酶抑制剂PD98059或U0126分别在不同时间及不同剂量作用于速殖子-宿主细胞培养系统,用流式细胞仪(FCM)检测宿主细胞感染速殖子的差异。结果流式细胞仪检测加入U01261μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的细胞培养孔的细胞感染弓形虫速殖子的量分别比对照组平均降低了26.10%(P<0.01),66.42%(P<0.01)和70.39%(P<0.01)。而加入PD980591μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的分别比对照组平均降低了25.45%(P<0.01),53.01%(P<0.01)和64.70%(P<0.01)。实验中发现100μmol/L U0126作用培养细胞9h的时候,可导致HL-60细胞出现部分聚集成团、漂浮的中毒现象。结论U0126和PD98059均可明显抑制弓形虫速殖子侵入宿主细胞,但其差异无显著性,其机制有待进一步探索。

烟曲霉感染时NADPH氧化酶通过诱导活性氧活化巨噬细胞自噬

目的研究NADPH氧化酶(NOX)参与烟曲霉孢子诱导巨噬细胞自噬及其作用机制。方法取对数生长期的RAW264.7细胞,随机分为3组:以烟曲霉孢子刺激的处理组、烟曲霉孢子联合NOX抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)的处理组和无处理的空白组。细胞作用2 h后荧光显微镜观察细胞内二氯荧光黄亮度以检测活性氧(ROS)水平,免疫印迹法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达量,免疫荧光技术观察LC3的表达与定位。结果烟曲霉孢子刺激后RAW264.7细胞的ROS与LC3BⅡ表达水平显著升高,同时LC3呈斑点状聚集并与烟曲霉孢子共定位;以DPI抑制后ROS与LC3 BⅡ表达量与空白组相比无明显变化,并且LC3在细胞内弥散分布。结论烟曲霉感染时NOX通过产生ROS活化巨噬细胞自噬。

138例高脂血症患者血液流变学指标检测分析

目的分析高脂血症者血液流变学变化特点。方法采用SA-9000全自动血液流变仪对138例高脂血症患者血流变学有关指标进行检测,并与83例健康对照者检测结果进行对比分析。结果高脂血症患者组男女血液流变学指标全血黏度(1 s-1～200 s-1)、血浆黏度、血细胞比容、红细胞变形指数、红细胞聚集指数与对照组男女相比均有明显改变。高脂血症组男、女患者全血粘度(1 s-1～200 s-1)与对照组相应性别比较均增高(P<0.05),高脂血症组男女患者红细胞聚集指数和血细胞比容均明显高于对照组(P<0.05),而红细胞变形指数低于对照组相应性别(P<0.05)。结论高脂血症患者普通存在血液流变学指标的改变,应定期进行血液流变学检测,对其治疗、预后及疗效观察具有重要的临床意义。

剩余稀释标本涂片复检在末梢血预稀释模式三分群血常规检查中的应用价值

目的探讨剩余稀释标本涂片细胞形态学复检在新生儿、婴幼儿末梢血预稀释模式三分群血常规检查中的可靠性。方法对新生儿、婴幼儿末梢血血常规检查标本以Sysmex-kx-21三分群血细胞分析仪预稀释模式进行检测,并对筛查的结果进行手工复检;对剩余稀释标本的手工复检以离心沉淀或静置沉淀的方式进行浓缩与涂片瑞氏染色,镜检至少观察200个白细胞,同时每例检查补充末梢血直接涂片1~2张瑞氏染色镜检作为细胞形态学复检比对的金标准。结果根据复检规则对仪器法检测结果进行统计学分析,得到真阳性率为4.6%,假阳性率为20.3%,真阴性率为74.0%,假阴性率为1.1%,复检率为24.9%,仪器法测定的敏感度为18.3%,特异度为98.6%,阳性预测值为81.3%,阴性预测值为78.5%,准确性为78.6%;两种涂片方式复检结果一致(P>0.05)。结论基层单位末梢血预稀释模式三分群血常规检查简易形态复检能为新生儿、婴幼儿门诊保健和临床医疗提供安全保障。

重症监护病房铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌药敏分析

目的了解2006～2007年重症监护病房患者铜绿假单胞菌及鲍曼／溶血不动杆菌的药敏及耐药变化，为合理应用抗菌药物及指导临床用药提供参考。方法用美国DadeBehring公司Microscan WalkAway-40SI全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验，并对耐药结果进行分析。结果铜绿假单胞菌总体敏感率较高的是亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林／他唑巴坦等，2年间耐药性变化显著的为阿米卡星。对鲍曼／溶血不动杆菌较敏感的是亚胺培南、氨苄西林／舒巴坦等，耐药性显著变化的有阿米卡星、头孢吡肟、头孢曲松、头孢噻肟及头孢他啶。结论临床应重视药敏试验结果，严格控制抗菌药物的使用。

缺血性中风的血液流变学观察

近年来血液流变学进展颇快,特别是中风病人的血液流变学研究对中风的防治具有重要意义。现将我院61例缺血性中风经丹参等治疗前后的血液流变学观察报告如下。对象和方法一、对象:本组急性缺血性中风系发病5天以内的住院病人,计61例(男44例,女17例),平均年龄60.5岁(46～80岁)。二、诊断标准:1.于安静状态下发病;2.无明显头痛、呕吐;3.发病较缓慢,多逐渐进展,或呈阶段性进行,多与脑动脉硬化有关,也见于脉管炎钩端螺旋体病、血液病;4.一般发病后1～2天内意识清楚或轻度障碍;5.发病6小时以后腰穿脑脊液一般不含血;6.有颈内动脉或椎基动脉系统缺氧症状。

国产迈瑞EH-2080B全自动尿沉渣分析系统的性能评估

目的 对国产迈瑞EH-2080B全自动尿沉渣分析系统的主要分析性能与功能扩展进行验证.方法 对该仪器检测白细胞、红细胞和上皮细胞等的主要分析性能进行验证;利用相对偏差对仪器间的结果比对以及利用假阳（阴）性率对人工镜检结果双重比对进行评价;利用目视低倍单视野对充液静置时间段,利用视觉暂留对低倍拍照和高倍拍照转换视野瞬间人工浏览视野,对可能成活的精子以及阴道毛滴虫补充动态观察进行功能扩展评价.结果 该仪器各检测项目的主要分析性能均在可接受范围;与室间质评各检测项目的相对偏差均≤仪器厂家提供的1/2允许总误差,符合仪器性能要求;该仪器各检测项目与人工镜检结果比对均存在一定程度的假阳（阴）性率,但临床尿液标本随机抽样的综合分析总体符合率在85％以上;人工浏览视野对可能成活的精予以及阴道毛滴虫补充动态观察可以捕捉到动态信息或可疑动态信息.结论 迈瑞EH-2080B全自动尿沉渣分析系统的主要分析性能及仪器间比对结果等基本符合实验诊断学实验室的要求,可用于临床标本的检测.该分析系统检测结果基本与人工镜检相符,相关性均较好.人工浏览视野对可能成活的精子以及阴道毛滴虫补充动态观察可以捕捉到的动态信息或可疑动态信息,结合可能的人工镜检综合审核红细胞的定量分析结果可作出滴虫感染的诊断.

临床微生物检验与监测在控制医院感染中的作用

随着各种新发感染性疾病的涌现及新型抗生物制剂的临床试验，临床微生物室所肩负的职责和使命日益突出。微生物室提供的数据对这些疾病和新生药物的诊疗起了关键性的作用，加强住院患者的临床微生物检验与监测，对于预防和控制医院感染起着十分重要的作用。

36例系统性红斑狼疮患者体液免疫功能测定的临床研究

目的分析系统性红斑狼疮(SLE)患者体液免疫功能测定结果,探讨其变化及规律,探讨SLE发病机制。方法选取2015年1月至2016年9月风湿免疫科接诊的SLE住院患者36例,入组后于次日清晨空腹状态下行静脉血采集,以免疫比浊法行体液免疫指标测定,包括免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、补体C3与补体C4。结果 SLE组IgG为(13.12±0.57)g/L、IgM为(0.76±0.12)g/L、IgA为(2.90±0.47)g/L,健康对照组IgG为(11.62±0.21)g/L、IgM为(0.89±0.27)g/L、IgA为(2.16±0.25)g/L,差异有统计学意义(P<0.05);SLE组补体C3为(0.69±0.17)g/L、补体C4为(0.13±0.22)g/L,健康对照组补体C3为(1.16±0.25)g/L、补体C4为(0.26±0.17)g/L,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论SLE患者表现为明显的免疫球蛋白水平升高,补体水平下降的免疫变化,在评价和判断SLE中具有较高的应用价值。

全自动细菌鉴定仪直接鉴定血培养阳性标本的临床应用

目的探讨全自动细菌鉴定仪对血培养阳性标本直接鉴定和药敏试验的临床应用价值及其与常规法(转种后取得的纯菌落上机鉴定及药敏试验)的符合率。方法将血培养阳性标本的培养液混匀于专用接种水中,接种于专用鉴定板上直接上机做细菌鉴定和药敏试验,并与转种后取得的纯菌落上机鉴定及药敏结果进行比较。结果86例血培养阳性标本直接上机与转种菌落上机鉴定结果差异无统计学意义(P<0.01),血培养阳性标本直接上机与转种菌落上机的药敏试验结果符合率大于95.5%。而直接法比常规法约提前24h。结论对血培养阳性标本进行直接鉴定及药敏试验缩短了检验时间,为菌血症的治疗争取了时间,且与常规法的实验结果符合率高。

万古霉素耐药肠球菌的表型及基因型检测

目的了解我院耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药表型、基因型及流行情况。方法用K-B纸片扩散法检测临床分离肠球菌的药物敏感性,E-test法检测VRE对万古霉素的最低抑菌浓度(MIC);PCR检测vanA、vanB、vanC1和vanC2-3基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析VRE同源性。结果 73株肠球菌中检出3株万古霉素耐药屎肠球菌,检出率为4.1%;3株屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁均耐药,但对利奈唑胺敏感;基因型检测显示3株屎肠球菌均为vanA型,PFGE结果显示该3株VRE不属于同一型别。结论我院住院患者中已出现VRE,应加强医院感染控制,以阻止VRE菌株在院内的传播和流行。

嗜麦芽窄食单胞菌的耐药特征

目的探讨嗜麦芽窄食单胞菌的细胞耐药规律,为临床治疗提供参考依据。方法采用回顾性调查的方法,对临床分离到的嗜麦芽窄食单胞菌的细菌耐药特点进行分析。结果嗜麦芽窄食单胞菌对多种常用抗生素呈现多重耐药,但对复方新诺明、头孢他啶的耐药率较低,分别为19.2%和34.6%。结论治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染应根据药敏试验选择用药,经验用药可选用复方新诺明和头孢他啶。

紫外线辐照致弱RH株弓形虫速殖子及生物学性质的研究

目的探讨紫外线辐照致弱RH株弓形虫的条件以及致弱弓形虫的生物学特性。方法以253.7nm紫外线在室温下辐照一定浓度的弓形虫速殖子,辐照时间为0、0.5、1、2、5、10、20、30、35、40min。台盼蓝染色观察辐照速殖子的活力;辐照速殖子与小鼠黑色素瘤B16细胞共同培养观察对细胞侵入以及在细胞内增殖情况;辐照速殖子接种小鼠,观察小鼠存活时间,判断速殖子在小鼠体内增殖情况;线粒体呼吸实验观察速殖子氧代谢功能;辐照2min速殖子免疫小鼠,60 d后接受同株弓形虫攻击,观察小鼠存活时间。结果紫外线辐照35min内速殖子保持活力,而辐照40min速殖子失去活力。辐照1～35min速殖子均能够侵入B16细胞但失去在细胞和小鼠体内的增殖能力,小鼠在30 d实验观察期内无死亡;与未经辐照的速殖子相比,辐照并没有影响速殖子的氧代谢功能;辐照速殖子免疫小鼠在受到攻击后存活时间较对照组明显延长(P<0.05)。结论在本实验条件下,紫外线辐照1～35min即可致弱弓形虫,致弱弓形虫失去增殖能力,但细胞侵入能力正常,并可以诱导一定的免疫保护力。

疟疾实验室诊断方法的新进展

疟疾是经蚊媒传播的重要热带病，据WHO统计全球约有40％的人生活在疟疾流行区，每年有3～5亿人感染，110万人死于疟疾，尽管采取多种防治措施并取得了丰硕的成果，但当前疟疾仍然是热带与亚热带国家和地区危害公众健康、影响经济发展的主要因素之一。近年来，我国的疟疾感染形势仍然相当严峻，据统计2006年全国23个省917个县有疟疾病例报告，发病数较2005年上升51．7％，

随机扩增多态性DNA分析法在幽门螺杆菌鉴定中的应用

目的探讨随机扩增多态性DNA（RAPD）分析法在在幽门螺杆菌（HP）菌株鉴定中的应用价值。方法选取该院65例HP感染的慢性胃炎或消化性溃疡患者,获取胃窦、胃体部黏膜进行HP培养,提取及纯化HP DNA后进行PCR反应,并采用RAPD分析HP基因指纹图谱;以同一HP菌株验证RAPD可重复性;65例患者均进行6个月以上的HP治疗,治疗后4∽6周评估HP治愈情况;对复发病例再次进行RAPD分析,观察RAPD指纹图谱变化。结果 65株菌株PAPD指纹图谱各不相同,但同一菌株传4代后,原代株与传代株进行PCR扩增,RADP指纹图谱完全一致。6例HP治疗后复发,3例RAPD指纹图谱与治疗前基本一致;3例产生不同RAPD指纹图谱。结论 RAPD分析法适用于HP基因多态性鉴定,是临床研究HP感染的实用方法,可用于HP复发和再感染鉴定。

葫芦素E诱导刚地弓形虫从宿主细胞逸出的观测

目的检测葫芦素E诱导刚地弓形虫从感染的宿主细胞逸出的效力。方法用不同浓度(20、50和100μmol/L)的葫芦素E孵育刚地弓形虫感染的HFF细胞1 h,统计纳虫空泡破损比例;用细胞松弛素D、1,2-二(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸四乙酰氧甲基酯(BAPTA-AM)预处理感染刚地弓形虫的HFF细胞,用50μmol/L葫芦素E孵育1 h,统计纳虫空泡破损比例;将逸出虫体重新感染细胞或腹腔注射昆明小鼠,检测虫体毒力变化。结果葫芦素E可以诱导刚地弓形虫从HFF细胞释放逸出,葫芦素E浓度越高,逸出率越高。葫芦素E诱导的虫体逸出与虫体的运动能力和虫体内钙离子有关,逸出虫体的毒力没有发生明显变化。结论葫芦素E可以诱导刚地弓形虫的逸出,为探索弓形虫和宿主细胞相互作用提供了新的研究方向。