检验医学干化学分析技术进展

检验医学干化学分析技术是临床检验未来发展的热门方向,它集当代化学、光学、酶学、化学计量和计算机技术于一体,并已作为定量分析法达到常规湿化学法的测定水平。本文将从干化学试纸的研究进展及干化学分析仪在临床检验的应用,结合干化学质量控制,对检验医学干化学分析技术进展作一综述。

深圳市正常儿童末梢血-C反应蛋白水平的调查

目的了解深圳市正常儿童C-反应蛋白(CRP)水平，建立本实验室儿童CRP参考值范围。方法用微量末梢血，使用QuikRead CRP分析仪进行CRP测定。结果男女儿童CRP含量分别为(6．27±2．10)mg／L、(6．16±2．04)mg／L、合计为(6．25±2．03)mg／L，性别和年龄之间无显著差异(P>0．05)。结论本法所得CRP含量与其它方法所得大致相同，参考范围在8．28mg／L以下。本法操作简便，微量快速，结果准确可靠，可在基层医疗点实施，像血常规一样用于临床，随时检测。

抗生素敏感试验方法学的研究进展

随着科学技术的发展与应用,抗生素敏感试验在传统的琼脂扩散法和稀释法的基础上得到了长足的发展。本文按试验测试所用的基本方法和原理,对琼脂扩散法、稀释法、E试验法、放射性核素法、荧光法、气体压力法和流式细胞术法的抗生素敏感试验作一综述。

凝固酶阴性葡萄球菌临床感染菌种分布及耐药分析

目的 了解我院临床感染中凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的菌种分布及耐药特性，以利于临床合理用药。方法 应用法国生物梅里埃ATB Expression细菌鉴定和药敏分析系统，对CNS菌株进行鉴定和16种抗生素进行耐药性分析。结果 在检出的1346株病原菌中，凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)319株，占23．7％，居我院临床分离致病菌首位。CNS临床感染以溶血葡萄球菌(44．5％)为主，其次为表皮葡萄球菌(24.5％)和人葡萄球菌(6．0％)。CNS菌株对青霉素、红霉素、苯唑西林表现出高度耐药性，耐药率分别为95．1％、88．2％、82．3％。对克林霉素，复方磺胺甲唑的耐药率也分别达到46．1％和36．3％。未发现对万古霉素和替考拉宁的耐药株。结论 为了减少新的耐药株出现，临床医生应多做感染样本的细菌培养和药敏试验，依据检验结果合理使用抗生素。对临床感染严重病人应首选万古霉素或替考拉宁，对感染较轻病人可选用呋喃妥因、喹奴普汀．达福普汀、夫地西酸、米诺环素和利福平或根据其具体药敏结果选择用药。

溶血葡萄球菌的感染分布及耐药分析

目的 了解溶血葡萄球菌的临床感染分布及其耐药特性。方法 采用法国生物梅里埃ATB细菌鉴定和药敏分析系统，对142株溶血葡萄球菌进行鉴定和16种常规抗生素进行耐药分析，同时分析对红霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、四环素、克林霉素5种非β-内酰胺类抗生素多重耐药性。结果 在临床分离到的319株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中，溶血葡萄球菌有142株，占44．5％，居CNS分离菌种首位。溶血葡萄球菌标本检出率最高为前列腺液(占45％)，其次为精液(占26．2%)和尿道分泌物(占25．1％)。抗生素耐药分析显示，溶血葡萄球菌对青霉素、红霉素、诺氟沙星、庆大霉素表现出高度耐药性，耐药率分别为98．6％、93．7％、76．8％、74．7％。溶血葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为82．4％。117株耐苯唑西林溶血葡萄球菌(MRSH)对3种以上非β-内酰胺类抗生素多重耐药率达82．9％；25株苯唑西林敏感溶血葡萄球菌(MSSH)对3种以上非β-内酰胺类抗生素多重耐药率达已52．0％。结论 溶血葡萄球菌所致临床感染日趋严重，检出率不断增加，提示综合性医院应加强对溶血葡萄球菌的监测与药敏分析，建议为了减少新的耐药株出现，临床医生应多做感染样本的细菌培养和药敏试验，依据检验结果合理使用抗生素。

梅毒血清学诊断的方法学比较

目的探讨梅毒非螺旋体抗原和特异性螺旋体抗体血清学试验对梅毒病人的筛查和确诊价值。方法比较RPR试验和Trust试验检测172例梅毒血清和228例对照血清非特异性心磷脂抗原的结果，比较TPPA法，ELISA法，免疫印迹法检测172例梅毒血清和228例对照血清梅毒特异性抗体的结果。结果对梅毒血清抗原的检测结果，进口RPR试剂检测阳性率为94．19％，国产RPR试剂检测阳性率为93．02％；对对照血清抗原的检测结果，进口RPR试剂20例阳性，国产RPR试剂4例阳性。进口与国产RPR试剂检测结果间没有显著性差异(P>0．05)。对梅毒血清抗原的检测结果，国产Trust试验试剂1、试剂2检测阳性率均为93．02％；对对照血清抗原的检测结果，国产Trust试验试剂1、试剂2均有4例阳性。Trust试验试剂1与试剂2检测结果间没有显著性差异(P>0．05)。对梅毒血清抗体的检测结果，TPPA法检测阳性率为83．72％，ELISA法检测阳性率为87．21％，免疫印迹法检测阳性率为100％；其中对一期梅毒血清抗体的检测结果，TPPA法诊断阳性率为73．08％，ELISA法为61．54％，而免疫印迹法为100％；对对照血清抗体的检测结果，均无一例阳性。TPPA法、ELISA法与免疫印迹法检测结果相比有显著性差异(P<0．01)。结论免疫印迹法具有高度敏感性和特异性。

大肠埃希菌耐药性及其基因同源性分析

目的研究临床分离的大肠埃希菌对常用抗生素的耐药性及其基因分型,了解其耐药性趋势与传播流行情况,为临床合理治疗大肠埃希菌引起的感染提供参考依据。方法采用常规鉴定技术鉴定细菌;采用K-B纸片扩散法测定77株大肠埃希菌对19种药物的耐药性;K-B法鉴定产超广谱β-内酰胺酶(ESBL s);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对其进行基因分型以确定菌株之间的亲缘关系;F INGERPR INTⅡ软件进行细菌基因指纹图谱分析。结果大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类药物和氨曲南的耐药性明显增高,亚胺培南和美罗培南是大肠埃希菌感染患者的首选药物;经ESBL s确证试验,ESBL s阳性率为28.60%(22/77);产ESBL s大肠埃希菌经PFGE指纹图谱分析,除第62株和第70株相似性系数为78.27%外,其余相似度均低于70.0%;ESBL s大肠埃希菌阴性株中除少数几对菌株相似性系数较高外,其余呈散在分布,且电泳带存有6条以上的不同条带,为流行病学无关的不同克隆。结论大肠埃希菌对常用抗生素耐药性明显增高,且呈多重耐药趋势;该研究尚不能证明存在大肠埃希菌爆发性流行感染,提示可能存在院内感染大肠埃希菌的优势克隆;PFGE基因分型方法是耐药性与流行状况分析的有效手段。

手足口病患儿血清细胞因子水平及其与病情的相关性

目的探讨手足口病（HFMD）患儿血清细胞因子的水平及其与病情严重程度的相关性。方法病例组为住院HFMD患儿37例，均已确诊为肠道病毒感染，其中轻型病例21例，重症病例16例；对照组为本院同期唇腭裂治疗中心的先天性唇腭裂、非感染择期手术同龄患儿10例。应用液相芯片分析平台检测病毒阳性患儿的血清标本及对照组血清细胞因子[TNF—α、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-6、1L-8、IL-12亚单位P40（IL-12P40）、IL-12亚单位PTO（IL-12P20）、IFN-γ、IL-4、IL-10、1L-1β水平，并分析其与病情严重程度的相关性。结果1．重症组IFN-1、IL-10、IL-12P40、IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8和TNF—α的表达水平均显著高于对照组（P均〈0．02）；重症组细胞因子INF-1和IL-2的表达水平均高于轻症组（P均〈0．02）；轻症组IL-10、IL-12P40、IL-1α、IL—1α、IL4、IL-6、IL-8和TNF-α均显著高于对照组（P均〈0，02）；轻症组IL-13和IL-12P70水平均低于对照组（P均〈0．02）。2．病情严重程度与INF-γ（Rs=0．654）、IL-10（Rs=0．517）、IL-10（Rs=0．575）、IL-1β（Rs=0．413）、IL4（Rs=0．508）、IL-6（Rs=0．446）及TNF-α（Rs=0．409）中度相关（Rs〈0．05），与IL-2（Rs=0．351）及IL=8（风=0．392）呈低度相关（P均〈0．05），与IL-13（Rs=-0．304）呈负相关（P〈0．05），与IL-12P40、IL-12P70及白三烯均无相关性（P均〉0．05）。结论HFMD患儿在感染病毒后其病情发展与细胞因子的表达水平有关，多数促炎因子和抗炎因子过度表达可能是发生重症HFMD的免疫病理基础。IFN-γ、IL-10、IL-12P40、IL-1α、IL-1β、IL4、IL-6、IL-8、TNF—α及IL-2的高表达可能促进HFMD的进展。

变性高效液相色谱技术在β地中海贫血分型诊断中的应用

目的探讨变性高效液相色谱技术（DHPLC）在快速诊断β地中海贫血及分型中的应用价值。方法采用外周血红细胞平均体积（MCV）、红细胞分布宽度（RDW）、红细胞脆性和Hb电泳4项指标相结合的方法筛选地中海贫血可疑标本226份。运用PCR反向斑点杂交技术（PCR-RDB）和DHPLC对226份可疑标本进行基因分型确诊。结果226份可疑静脉血标本中，经PCR-RDB和DHPLC确诊的β地中海贫血为69份，两种方法检测缺失和突变的基因型别完全一致，占地中海贫血筛查总人数的30．5％。其中CD41／CD42（-TCTT）移码突变37例（54％）；IVS-Ⅱ-654（C→T）插入序列突变12例（17％）；TATA-28（A-G）转录突变10例（15％）；CD17（A→T）无义突变5例（7％）；CD71／CD72（＋A）移码突变5例（7％）。结论DHPLC可快速、高效和准确地对β地中海贫血进行基因分型诊断。