减味藿香正气水指纹图谱分析方法研究

目的:减味藿香正气水的HPLC指纹图谱研究,为质量控制提供有效的方法。方法:采用均匀设计法,将减味藿香正气水5味药组成10个处方,运用高效液相色谱研究指纹图谱。Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相water-aceton itrile(0.01m in,78∶22;10m in,76∶24;35m in,65∶35;45m in,60∶40;65m in,50∶50;80m in,35∶65;85m in,78∶22),254处检测;water-aceton itrile-m ethanol(0.01m in,98∶1∶1;5m in,94∶5∶1;15m in,89/l10;1;25m in,87∶12∶1;40m in,87∶12∶1;55m in,74∶25∶1;60m in,98∶1∶1),294nm处检测,流速1.0mL/m in。结果:方法学考察表明,建立的HPLC指纹图谱有良好的重现性。结论:利用减味藿香正气水的指纹图谱可在一定程度上进行质量控制。

腺病毒介导HSV-TK基因血管靶向治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤

目的：探讨重组腺病毒介导胸苷激酶系统通过血管靶向治疗裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤的疗效及作用机制。方法：32只BALB/c鼠皮下接种建立裸鼠皮下人肝癌细胞移植瘤模型,当瘤体达100 mm^3时随机分成4组,分别为更昔洛韦(GCV)组(Ⅰ)、空载体病毒组(Ⅱ)、重组腺病毒CMV-TK组(Ⅲ)及重组腺病毒AdKDR-TK组(Ⅳ)。各治疗组瘤内分别注入重组腺病毒液及空载体病毒液,重组腺病毒治疗组在病毒给予24 h后分别在腹腔内注射GcV,连续10 d；对照组腹腔内注入GCV。观察各组瘤体生长情况及免疫组化法测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果：与对照组比较,第Ⅲ、Ⅳ组经治疗后肿瘤的生长均受到了明显的抑制,其抑瘤率分别为12．3%和24．5%(两者比较,P＜0．05)。肿瘤组织内的MVD,Ⅰ组为(37．4±8．6)个/mm^2、Ⅱ组为(30．6±7．8)个/mm^2、Ⅲ组为(27．6±7．1)个/mm^2、Ⅳ组为(10．7±4．1)个/mm^2,其中Ⅲ组与Ⅱ组(P＜0．05)、Ⅳ组与Ⅱ组(P＜0．01)、Ⅳ组与Ⅲ组(P＜0．01)之间的肿瘤内MVD比较均有统计学差异。结论：重组腺病毒介导以KDR为启动子的胸苷激酶系统能够通过血管靶向性地有效抑制肿瘤的生长。

减味藿香正气水药味最佳配比的研究

目的:探讨减味藿香正气水药味最佳配比。方法:采用均匀设计和药效学相结合的方法,以家兔离体十二指肠的抑制率为考察指标。结果:减味藿香正气水药味最佳配比是:厚朴7.82g;陈皮3g;苍术3g;半夏3g;广藿香油30μL。结论:最佳配比的减味藿香正气水具有良好的抑制家兔离体十二指肠的作用。

妊娠与未妊娠患者超排卵周期第10天子宫内膜基因表达差异分析

目的对内膜修整后所取得的内膜组织按妊娠结果的不同分组进行分子水平的分析和检测,寻找合适的内膜发育分子标志物,早期预测辅助生殖技术(ART)患者的妊娠结果。方法随机选择10例接受增殖期子宫内膜修整术患者,其B超及组织学检查结果表明内膜处于相同发育阶段,按妊娠结果分为妊娠组与未妊娠组,抽提每例的子宫内膜组织总RNA,4例妊娠患者和3例未妊娠患者的内膜组织RNA符合芯片检测要求,使用Affymetrix U133 plus 2.0基因芯片进行表达谱分析。结果妊娠组与未妊娠组子宫内膜组织具有218个差异表达基因(≥2倍),其中177个基因在未妊娠组高表达,41个基因在妊娠组高表达。差异基因主要涉及代谢、细胞通讯和胞内过程调控等生物学过程,参与离子结合、信号传导和物质转运等重要功能。结论妊娠组与未妊娠组的增殖期子宫内膜细胞表达在转录组水平上差异明显,某些重要差异表达基因(LAMA4i、ntegrinα6和MMP1)有可能成为便利的早期预测ART患者妊娠结果的分子标志物。

PigM基因在小鼠中的表达及其在精子发生中的功能探讨

目的筛选与精子发生相关的基因。方法将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出差异表达的基因。利用网络信息资源对该基因进行生物学信息分析。RT-PCR分析该基因在小鼠不同发育阶段睾丸及小鼠不同组织中的表达。结果通过4、91、8、35、54、日龄和6月龄小鼠睾丸的芯片信号比较筛选出一个差异表达杂交点(GenBank登录号:NM-026234),生物信息学分析发现该基因全长3 979 bp,含有1 272 bp的完整ORF,编码一个有423个氨基酸、分子量为49.788的蛋白质。PigM蛋白与大鼠同源基因PigM蛋白有96%的同源性,与人PigM蛋白有89%的同源性,显示该基因在哺乳动物中高度保守。RT-PCR分析表明PigM基因特异性表达于睾丸组织及18日龄后的小鼠睾丸中。结论PigM基因的表达与小鼠精子发生的过程一致,显示其可能在精子发生中起着重要作用。解释该基因的生物学功能,可对揭示人类无精、弱精和少精引起的男性不育的病因,治疗和预防男不育及寻找新的男子避孕药的靶位点具有重要意义。

胸苷激酶系统血管靶向抗肝癌效应的机制

目的探讨KDR为启动子的HSV-tk重组腺病毒对肿瘤血管内皮细胞的特异性杀伤效能及机制.方法采用pAdeasy系统,构建受KDR启动子或巨细胞病毒(CMV)启动子调控并可表达HSV-tk基因的重组腺病毒,体外分别感染人脐静脉血管内皮细胞系(HUVEC)和肝癌细胞系HepG2,并以MTT法检测其细胞增殖情况.人肝癌皮下移植瘤裸鼠随机分成更昔洛韦组(I),空载体病毒组(II),重组腺病毒CMV-tk组(III)及重组腺病毒AdKDR-tk组(IV).各治疗组瘤内分别注入重组腺病毒液及空载体病毒液.重组腺病毒治疗组在病毒给予24h后分别ipGCV,连续10d.对照组,ipGCV.观察瘤体大小及免疫组化法定量测定肿瘤微血管密度.结果病毒滴度均为1×1013pfu/L.感染复数(MOI)为100的条件下,GCV浓度由0增至50mg/L时感染含AdKDR-tk的HUVEC细胞和HepG2细胞存活率由(90.7±4.5)%和(91.8±4.3)%分别下降至(28.9±5.7)%和(75.4±2.9)%(P<0.01),而感染含AdCMV-tk的HUVEC细胞和HepG2细胞存活率分别下降至(17.6±2.5)%和(23.2±5.7)%(P>0.05).体内试验中,与对照组比较,Ⅲ,IV组经治疗后肿瘤的生长均受到了明显的抑制,其抑瘤率分别为(14.7±3.2)%和(23.6±5.6)%(P<0.05).组织内的平均血管密度(MVD),Ⅰ组为37.4±8.6,Ⅱ组为30.6±7.8,Ⅲ组为27.6±7.1,IV组为10.7±4.1.其中,Ⅲ组与Ⅱ组(P<0.05),IV组与Ⅱ组(P<0.01),IV组与Ⅲ组(P<0.01)之间比较均有统计学差异.结论KDR启动子介导的HSV-tk具有特异性杀伤肿瘤血管内皮细胞的作用.

鼻咽癌细胞中ezrin基因启动子上游序列转录调控特性的研究

目的:研究鼻咽癌细胞中ezrin基因启动子上游序列的转录调控特性。方法:构建一系列携带ezrin基因-1541/-706序列的报告基因表达载体,ezrin基因-1541/-706序列以正向和反向分别连接至不含启动子的报告基因上游、ezrin启动子上游、SV40启动子上游、ezrin启动子或SV40启动子控制的报告基因下游,将质粒转染CNE2细胞,检测荧光素酶活性。结果:CNE2细胞中,当-1541/-706序列正向位于报告基因上游时表现出启动子活性,其转录激活作用约为ezrin启动子的50%;反向连接时无启动子活性。而且,当-1541/-706序列正向位于ezrin启动子或SV40启动子上游时,显著提高荧光素酶表达;当反向位于启动子下游、正向或反向位于启动子控制的报告基因下游时,转录增强作用消失。结论:CNE2细胞中ezrin基因启动子上游序列具有转录激活和转录增强作用,这种作用具有DNA序列位置和方向依赖性。

ALDH2在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)在肾透明细胞癌中的表达,分析ALDH2与肾透明细胞癌临床病理特征之间的关系及临床意义。方法收集17例肾透明细胞癌患者的病理标本,采用实时荧光定量PCR方法检测ALDH2在肾透明细胞癌中的表达。收集90例肾透明细胞癌患者的石蜡标本定制组织芯片,免疫组织化学法检测肾透明细胞癌组织及癌旁组织中ALDH2蛋白的表达。结果 ALDH2在肾癌组织相比癌旁组织,表达差异有统计学意义(P<0.05)。UICC分期T1期和>T1期的低表达率分别为57.38%(35/61)、63.64%(14/22),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Fuhrman分级Ⅰ级和>Ⅰ级的肾癌组织中,低表达率分别为57.78%(26/45)、78.57%(33/42),差异有统计学意义(P<0.05)。ALDH2表达与肾癌患者性别、年龄、肿瘤大小及部位无统计学差异(P>0.05)。术后随访2~106个月,根据ALDH2高表达组和低表达组生存情况绘制KaplanMerier曲线及进行Log-rank检验,患者生存分析结果无统计学差异(P>0.05)。结论 ALDH2在肾透明细胞癌组织中低表达,其表达与病理分级相关。

PTPRQ基因的内耳功能及突变致聋机制的研究进展

受体型蛋白酪氨酸磷酸酶Q(Receptor type protein tyrosine phosphatase Q,PTPRQ)作为一种蛋白酪氨酸磷酸酶,能催化不同的底物,参与多种细胞内的功能。PTPRQ基因突变可导致常染色体隐性和显性非综合征性耳聋DFNB84A型和DFNA73型耳聋的发生,两型耳聋的临床表型差异提示了其致病机制的不同。在内耳,PTPRQ主要位于前庭及耳蜗毛细胞纤毛基底部,参与耳蜗毛细胞纤毛束的成熟,对维持纤毛的形态和功能具有重要作用。目前世界上报道的与PTPRQ突变相关的耳聋家系有14个,多数隐性突变是因截短或缺失而影响了PTPRQ的酶结构域的功能,但是PTPRQ的显性突变致病机理仍不清楚。有关该基因显、隐性突变致病机制的更深入研究可为相关病例的针对性干预提供理论依据。

光疗对人体皮肤微生态影响的研究进展

人体皮肤定植大量微生物,包括细菌、真菌、病毒等,与人体相互依存和影响共同构成了皮肤微生态。皮肤微生态可作为外部物理屏障,防止外来病原体入侵,对人体皮肤起到保护作用。光疗法是皮肤科常用的物理治疗方法之一,常用于治疗炎症性皮肤病、感染性皮肤病和皮肤肿瘤。该文主要就紫外线治疗、光动力治疗、激光治疗对人体皮肤微生态影响的研究进展作一综述。

沃森肿瘤解决方案系统在我国结肠癌综合治疗决策中的应用价值评估

目的评估沃森肿瘤解决方案系统(Watson for oncology,WfO)在我国结肠癌综合治疗决策中的应用价值。方法前瞻性分析2017年7月至2017年12月北京大学深圳医院收治并使用WfO辅助治疗决策的30例结肠癌患者的临床资料。对比WfO与多学科会诊(multidisciplinary team,MDT)方案,以WfO推荐或可考虑方案中含MDT所选方案视为一致,分析两者一致率和不一致病例原因。结果 WfO与MDT方案总一致率为86.7%(26/30),其中Ⅱ～Ⅲ期病例一致率为90.5%,Ⅳ期为77.8%;一般病例一致率为94.4%,复杂病例一致率为75.0%。结论 WfO推荐方案与MDT会诊意见一致率较高,能够有效辅助结肠癌综合治疗临床决策,临床应用前景广阔。

肠道菌群:从生命健康到体育运动

近年来研究已证实,肠道菌群是维持人类健康不可或缺的一个重要"器官"。多篇文献指出,运动锻炼可通过改变人体肠道菌群的结构和多样性,从而对机体发挥积极作用,同时预言体育锻炼将成为肠道菌群研究的下一前沿。基于此,本文就肠道菌群从人类健康到运动锻炼的研究现状和趋势进行梳理和总结,同时提出未来应关注体育专业运动员的肠道菌群健康与技能发挥的关系。

鼻咽癌细胞中ezrin基因增强子区的定位分析

本研究采用嵌套缺失和荧光素酶检测技术对鼻咽癌CNE2细胞ezrin基因增强子区进行定位分析。实验结果显示,CNE2细胞中,ezrin基因-1541/-706具有转录激活和转录增强作用,存在转录正调控区和负调控区。对5个潜在转录调控区的进一步研究发现,ezrin基因-1297/-1186对ezrin启动子和SV40启动子具有显著的转录增强作用;其它4个区域对启动子不表现转录调控作用,或表现弱的转录增强作用。结果表明,ezrin基因-1297/-1186是具有增强子作用的关键转录调控区,它有可能与其它潜在转录调控区以共同或协同的方式调控ezrin基因转录。

自然杀伤T细胞在慢性生殖道炎症患者精液中的表达及其临床意义

目的研究自然杀伤T细胞（NK T细胞）在慢性生殖道炎症患者精液中的表达.方法筛选40例罹患生殖道炎症患者精液标本及20例正常精液标本,采用流式细胞术检测NK T细胞在患者精液中的表达.通过酶联免疫吸附试验在患者精浆检测炎性细胞因子：白介素6（IL-6）,IL-17及γ-干扰素（IFN-γ）.运用SPSS软件对NK T细胞百分率和精子密度、活力和存活率分析,同时对精液IL-6、IL-17以及IFN-γ的相关性进行研究.结果 NK T细胞在一部分慢性生殖道炎症患者中数目显著增高（n =20）,而正常组则未能检测到其表达;NK T细胞数目与精子浓度、活力及存活率具有显著负相关性;在NK T细胞高表达组,NK T细胞数量与精浆IL-6、IFN-γ浓度具有显著相关性,但与精浆IL-17不具有显著相关性.结论在慢性生殖道炎症中NK T细胞增殖可伴随对精子的自身免疫反应,其通过释放IL-6、IFN-γ等影响精子质量.

树突状细胞在男性生殖系统中的作用

树突状细胞（dendriticcell，DC）是目前已知抗原提呈功能最强的抗原提呈细胞，是机体适应性T细胞免疫应答的始动者，又是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁。近年来研究资料显示，DC在男性生殖系统发挥重要作用，特别是在生殖道炎症所致男性不育的病因中可能起关键性作用。文章综述了近年来的相关研究资料阐述DC在男性生殖道的表型和功能，探讨DC与男性不育之间的联系，旨在为男性不育的临床诊治提供新的思路。

钙化在伴有桥本甲状腺炎的甲状腺乳头状癌中的意义

桥本甲状腺炎(Hashimoto′s thyroiditis,HT)的病理和超声表现复杂,HT背景下的甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)鉴别诊断有难度。超声特征上微钙化是诊断PTC的危险因素,而粗钙化一般提示为良性病变,但PTC合并HT发生的钙化现象多见且类型多样化,粗钙化的发生率可能高于微钙化,各类钙化皆提示有恶性风险。钙化可能与癌症发生、侵袭和转移相关,HT背景下的钙化现象需引起警惕,要高度怀疑是否合并PTC的发生。