实时荧光PCR技术在快速检测植物及其加工产品中转基因成份中的应用

本文报道了利用实时荧光PCR技术对若干植物及其加工产品中的转基因成分进行检测、鉴定的结果。首先用一套转基因植物荧光PCR定性试剂盒对这些样品中可能存在的7个目标基因(35S、nos、npt Ⅱ、pat、bar、FMV、cry3A)进行筛查。对15份已知的样品的检测结果与样品的标准记录完全吻合;在113份未知样品中,检出21份阳性样品。并对其中的5份阳性大豆样品和3份玉米阳性样品进一步进行定量分析,确定了这些样品中转基因成分(GMO)的含量。本文同时讨论了实时荧光PCR技术在快速检测植物及其加工产品中转基因成份中的应用,认为荧光PCR技术是适合植物转基因检测、鉴定的一种快速、灵敏、准确的方法。

原料血浆混样HCV/HIV-1核酸检测的方法学研究

目的 建立原料血浆混浆核酸检测方法。方法 以国产HCV和HIV核酸扩增 (PCR)荧光定量检测试剂进行WHO标准品的灵敏度、重现性和精密度实验 ,并对 19196份国内原料血浆进行HCVRNA和HIV 1RNA核酸扩增分析。结果 扩增系统能够确保高拷贝数 (2 0 0IU/ml)标准品核酸的检出率 ,对于 <10 0IU/ml的低拷贝数标准品核酸检出率逐渐降低 ;受检原料血浆样本没有检出HCVRNA和HIV 1RNA阳性。结论 核酸扩增方法适用于原料血浆病毒筛查。

人血清中舒必利的高效液相色谱测定与临床应用

目的:建立人血清中舒必利的测定方法,为临床应用和药化动力学研究提供技术参考。方法:采用高效液相色谱法检测,流动相为甲醇-乙腈-5mmol/L磷酸二氢钠(30∶3∶67,V/V),腈基分离柱,UV波长254nm,以对二甲氨基苯甲醛为内标,氯仿提取。结果:线性范围为50～1500μg/L,平均回收率为99.62%,日内、日间精密度RSD分别为2.54%和3.67%,且常用的其他抗精神病药及安定类药物不干扰测定。结论:方法简单,分析速度快,灵敏度高,适用临床血药浓度测定及药代动力学研究。

荧光RT-PCR快速检测禽流感病毒H5亚型的研究

本研究根据禽流感病毒H5亚型的RNA4节段,设计、合成多对引物、探针,并通过筛选获得灵敏度、特异性好的组合,在此基础上对荧光RT-RCR反应体系中的各组分进行优化,并建立对各种禽类样品中病毒核酸的提取方法。通过对阳性鸡胚尿囊液及人工攻毒的SPF鸡、肉鸡、肉鸭的各脏器进行检测,并与传统鸡胚病毒分离进行对比,显示该方法与传统鸡胚病毒分离灵敏度接近,但检测时间由原来的21天缩短为4小时。

丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒核酸扩增荧光检测试剂盒在血液筛查中的敏感性

目的 评价深圳匹基公司开发的HCV和HIV核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒在血液筛查中的灵敏度和检测极限。方法 以阴性血浆梯度稀释WHO的HCV及HIV标准品,病毒稀释液滴度分别为200、100、50、25和0 IU/ml,每个满度平行做24个重复,利用该试剂盒及检测方案测定各滴度的 HCV和 HIV的24个重复的检出例数和阳性率(检测阳性例数/总重复数)。结果 滴度≥50IU/ml的HCV检出率为100％(24/24),而25IU/ml为75％(18/24)。滴度≥100IU/ml的HIV检出率为100％(24/24),50IU/ml为92％(22/24)。结论 匹基公司开发的HCV和HIV核酸扩增荧光检测试剂盒在特异性和灵敏度方面已经达到核酸检测(Nucleic Acid Test,NAT)的要求,基本达到国际同类试剂的检测水平。