人睾丸特异性新基因hTSC29合成肽单克隆抗体制备与鉴定

目的:制备和初步鉴定人睾丸特异性新基因h TSC29(Gen Bank登录号:BC032957)合成肽的单克隆抗体(m Ab)。方法:利用生物信息学方法对h TSC29的蛋白质序列进行分析和预测,根据免疫原性、表露性、亲疏水性及柔韧性4个参数,合成一段由18个氨基酸组成的多肽,并以此为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,采用ELISA法、Western blot、免疫组化和免疫荧光法鉴定h TSC29 m Ab的特异性。结果:获得了1株稳定分泌h TSC29 m Ab的杂交瘤细胞株,分泌的抗体属Ig G2b(κ)亚型,杂交瘤细胞培养上清效价达到1∶104;Western blot鉴定表明,制备h TSC29 m Ab可特异性地识别人睾丸总蛋白中Mr约为60 000处的蛋白;免疫组织化学和免疫荧光结果显示h TSC29蛋白主要定位在正常人睾丸组织中的精母细胞和精子细胞。结论:成功建立了1株稳定分泌抗h TSC29 m Ab的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体效价高、特异性强,为进一步研究h TSC29的功能提供了特异的检测工具。

左西孟旦对右心室衰竭大鼠右心功能、心肌能量代谢和心肌代谢的影响

目的:探究左西孟旦对右心室(RV)肥厚和衰竭者右心功能,心肌耗氧量,心肌能量代谢(MEE)和心肌代谢的影响。方法:右心室衰竭(right ventricular heart-failure,RVF)大鼠肥大和衰竭是由肺部躯干条带诱导的。将大鼠随机(数字表法)分配到安慰剂组(n=16)或左西孟旦组(3 mg·kg^(-1)·d^(-1))(n=13)进行7周干预。通过超声心动图,11C-乙酸正电子发射断层扫描(PET),18F-FDG PET和有创压力测量来评估RV MEE和RV代谢。结果:左西孟旦在不影响RV心肌耗氧量的情况下,通过增加右室外径[(0.62±0.06)vs.(0.30±0.03)mm,P<0.001],可改善RV MEE[(26±3)%vs.(14±1)%,P<0.01]。RV MEE的改善与RV心肌葡萄糖摄取的变化无关[(1.3±0.1)vs.(1.0±0.1)μmol·g^(-1)·min^(-1),P=0.44]。在大鼠的肥大和衰竭RV中,左西孟旦改善RV功能而不增加心肌耗氧量,从而改善MEE。结论:左西孟旦对右心衰竭具有潜在的治疗价值,可扩展左西孟旦的临床应用范围。

精子顶体相关蛋白Dkkll在小鼠睾丸组织中的表达研究

目的：研究顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的Dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测Dkkl1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况，采用免疫组化方法检测Dkkl1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后，筛选得到1个差异表达杂交点，通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Dkkl1基因。RT-PCR结果表明Dkkl1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达，在出生31d小鼠睾丸开始高表达，在成年前达到高峰。Dkkl1蛋白主要定位在睾丸精母细胞和圆形精子细胞。结论 Dkkl1基因存在发育的表达调控，为小鼠年龄依赖性表达基因，其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性，且具有睾丸特异性表达的特征，因此我们推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。

右旋糖酐40和羟乙基淀粉130/0.4对失血性休克患者早期血流动力学、血液流变学及凝血功能的影响

目的观察右旋糖酐40和羟乙基淀粉130/0.4(HES 130/0.4)对失血性休克患者早期血流动力学、血液流变学及凝血功能的影响,探讨治疗失血性休克早期的首选胶体。方法将2012年1月-2013年12月期间就诊于我院急诊科的76例失血性休克患者随机分为对照组与观察组。在常规急救措施及静脉快速输入1 000 mL林格液同时,对照组和观察组分别在30min内给予15 mL·kg^(-1)的6%右旋糖酐40和6%HES 130/0.4,观察并比较2组患者治疗后30、60 min血流动力学指标、血液流变学指标及凝血功能指标的动态变化。结果与对照组比较,观察组治疗后60 min心率明显降低,而收缩压及平均动脉压均明显升高;治疗后30、60 min高、中、低切全血黏度均明显升高;治疗后30、60 min血浆凝血酶原时间和部分活化凝血活酶时间均明显延长,血浆纤维蛋白原含量明显降低(P均<0.05)。结论 HES 130/0.4可明显改善失血性休克患者早期血流动力学和血液流变学,而对患者血液凝血功能无显著影响,是治疗早期失血性休克较好的人工胶体。