基于网络药理学、分子对接和细胞实验探讨枸杞子防治老年性痴呆的作用机制

目的 基于网络药理学、分子对接和细胞实验探讨枸杞子防治老年性痴呆的作用机制。方法 通过化学成分数据库联合检索,结合药动学参数筛选枸杞子的候选活性成分,采用PharmMapper反向药效团匹配的靶标识别平台预测其靶点,TTD等数据库筛选与老年性痴呆相关的潜在靶点,DAVID数据库对靶点基因进行GO功能富集及KEGG通路富集分析,String数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用(PPI)网络和“成分-靶点-通路”网络,SYBYL软件对关键活性成分与靶点进行分子对接,RT-qPCR检测枸杞子水提物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞GSK3B、MAPK14、ESR1、NOS2、CASP3 mRNA表达的影响,Western blot检测枸杞子水提物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞CASP3蛋白表达的影响。结果 枸杞子中50种活性成分通过调控HSD11B1、RARB、NR3C1、RARA、IGF1、MAPK14、CASP3、ESR2、GSK3B等31个潜在靶点,参与多种癌症通路、Rap1信号通路、Ras信号通路、PI3K-Akt信号通路、神经营养因子信号通路、多巴胺能突触等信号通路,起到防治老年性痴呆作用。新黄质、花色素苷、胡萝卜素、隐黄素、玉米黄质等成分与关键靶点HSD11B1、INSR、NR3C1、RARA、CASP3、MAPK14、GSK3B、NOS2具有良好的结合能力。枸杞子水提物可抑制Aβ_(25-35)诱导PC12细胞GSK3B、MAPK14、NOS2、CASP3 mRNA表达,上调ESR1 mRNA表达,下调CASP3蛋白表达。结论 本研究揭示了枸杞子防治老年性痴呆“活性成分-靶点-通路”的关系,可为该药材临床应用提供依据。

化痰合剂提取工艺的优化

目的优选化痰合剂提取工艺。方法采用网络药理学结合分子对接筛选活性成分、靶点,构建“成分-靶点-通路”网络,预测化痰合剂潜在质量标志物。以溶剂用量、提取时间、浸泡时间为影响因素,辛弗林、芍药苷、橙皮苷转移率及固含量的综合评分为评价指标,信息熵赋权法结合正交试验优化提取工艺。结果化痰合剂中122种活性成分通过调控精神分裂症疾病网络中27个靶点来发挥抗精神分裂症的作用,β-谷甾醇、山槐素、芍药苷、卡维丁、四氢巴马汀、橙皮苷、辛弗林对关键靶点DRD2、DRD3、DRD4、HTR2A、HTR2C、HTR3A、CHRNA7、CHRM1具有良好的结合能,辛弗林、芍药苷、橙皮苷为潜在质量标志物。最佳条件为加入15倍量水浸泡30 min后提取2次,每次1.5 h,综合评分为0.998。结论该方法提取率高,稳定性、重复性良好,可用于提取化痰合剂。