基于显微共聚焦拉曼光谱与多靶标适配体微流控技术鉴定鼻咽癌循环肿瘤细胞的方法

目的建立一种基于显微共聚焦拉曼光谱技术的鼻咽癌循环肿瘤细胞鉴定方法,实现对鼻咽癌循环肿瘤细胞的无接触、无标记检测。方法体外培养人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat和鼻咽癌细胞株Sune1,利用EpCAM、CD44、EGFR和波形蛋白适配体组装的纳米微流控芯片技术识别和亲和捕获单细胞,并使用显微共聚焦拉曼光谱技术对单细胞进行鉴定,得到单细胞拉曼光谱。以两种机器学习算法:支持向量机和线性判别分析构建分类器,对单细胞拉曼光谱进行建模分析。结果共采集得到474个Jurkat细胞与Sune1细胞的单细胞拉曼光谱,其峰位分析结果显示:与Jurkat细胞相比,Sune1细胞中的腺嘌呤、胸腺嘧啶和鸟嘌呤含量显著下降(P<0.0001);羟脯氨酸、蛋白质和脂类的含量显著上升(P<0.0001),差异有统计学意义。线性判别分析的预测准确率较高,能够有效区分两种细胞,预测准确率高达98.31%。结论本研究基于显微共聚焦拉曼光谱技术和机器学习算法,建立了一种可能适用于鉴定鼻咽癌循环肿瘤细胞的方法,可对鼻咽癌的临床微创诊断产生积极作用。

区域医学检验中心在新型冠状病毒肺炎防控中的应对措施

区域医学检验中心在优化区域医疗资源结构布局,共享优质医疗资源方面具有明显的制度优势。该文结合深圳市罗湖区区域医学检验中心实际情况,介绍区域医学检验中心在新型冠状病毒肺炎防控过程中的应对措施。这些措施包括完善质量控制流程、创新物流体系、提升信息化建设等多个方面,显著提高了新型冠状病毒检测通量和质量,为新型冠状病毒感染早发现、早隔离、早阻断、早治疗提供重要保障。

深圳市罗湖地区女性不同年龄段CA125、CEA和CA125/CEA参考区间的建立和验证

目的建立深圳市罗湖地区健康成年女性人群血清糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)水平和CA125/CEA的参考区间并进行验证。方法对2019年7月至2020年7月进行健康体检的成年女性人群的数据进行分析,通过偏度-峰度值检验数据正态分性,对非正态分布的数据使用BOX-COX转换;采用四分位间距法剔除离群值后计算P_(95)获得参考值上限;通过分析2020年8月的健康体检成年女性数据对其建立的参考区间进行验证。结果20~<40岁女性CA125水平参考值上限为32.63 U/mL,40~<50岁女性CA125水平参考值上限为31.09 U/mL,50~90岁女性CA125水平参考值上限为20.69 U/mL。20~<30岁女性CEA水平参考值上限为2.58 ng/mL,30~<40岁女性CEA水平参考值上限为2.60 ng/mL,40~<50岁女性CEA水平参考值上限为3.11 ng/mL,50~<60岁女性CEA水平参考值上限为3.96 ng/mL,60~90岁女性CEA水平参考值上限为5.76 ng/mL。20~<40岁女性CA125/CEA参考值上限为43.77,40~<50岁女性CA125/CEA参考值上限为34.51,50~<60岁女性CA125/CEA参考值上限为18.70,60~90岁女性CA125/CEA参考值上限为13.72。经验证各年龄段女性CA125、CEA和CA125/CEA新建参考区间用于检测结果判读的符合率均在90%以上,验证均通过。结论间接法建立参考区间适用于临床实验室。CA125和CEA参考区间存在年龄差异,本研究可为临床不同年龄女性的妇科疾病诊断提供参考依据。

第三方医学检测平台在新型冠状病毒核酸检测中保证分析前质量的经验分享

作为公立医院的第三方检测平台,在新型冠状病毒感染的肺炎疫情之下,针对该病毒的特点,为保障分析前标本的质量、采样人员及受检者的安全,从采样前、中、后分析前的全过程,涉及到的采样人、被检人、转运人,涉及到的采样材料、转运设施、产生的医疗垃圾,以及采样方式的选择等采取了一些精细化管理的措施,为今后发生此类公共卫生事件第三方医学检测平台更好实施相应功能提供一些经验。

液相悬浮阵列芯片在检验医学中的应用进展

液相悬浮阵列芯片技术作为一种新兴生物芯片技术,基于多指标联合和批量标本检测优势已广泛应用于临床诊断领域,尤其在蛋白质和核酸检测如细胞因子、激素、肿瘤标志物等方面发挥了重要临床价值。该文归纳了液相悬浮阵列芯片技术的检测原理和悬浮微球类别,总结其在主要临床检验领域包括病原体检测、自身免疫性疾病及肿瘤标志物筛查等中的应用进展,展望其在临床检验中面临的机遇和挑战。

临床实验室人事管理系统的设计与应用

目的 以ISO15189质量管理体系为依据,开发出一套适用于临床实验室的人事管理系统。方法 利用Java程序设计语言,以SpringBoot+SpringMVC技术框架为核心,选用MySQL5.7数据库技术搭建Web平台,设计研发人事管理系统。结果 结合深圳市罗湖区医学检验实验室的实际情况确定研发框架,根据ISO15189中人员准则条款对员工日常工作进行管理。人事管理系统采用模块化的结构设计,主要由7个功能模块构成,涵盖员工的信息监控、培训记录、能力评估和授权记录、表现评估等管理路径。培训考核与能力评估模块要求员工在有限时间内完成自主学习,并通过线上或线下考核的方式评估培训效果,在达到实验室用人要求后授予相应权限。结论 该系统满足ISO15189准则中关于人员管理的要求,实现了实验室员工全方位规范管理,有效提高了实验室人事管理效率。

新型冠状病毒核酸检测假阴性和假阳性案例分析

在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情暴发流行期间,新型冠状病毒变异株不断出现。面对病毒的演变及其传播特点,对阳性感染者采取“早发现”的措施是有效控制疫情传播的关键。新型冠状病毒核酸检测阳性是COVID-19确诊的首要标准,假阴性和假阳性结果都将给临床诊断和疫情防控带来一定的困扰。确保检测结果的准确性和可靠性至关重要。文章就临床实验室在新型冠状病毒核酸检测实际工作中发现的假阴性和假阳性案例进行总结和分析,为未来可能发生的相关场景的疫情防控工作提供参考。

趋化因子和其受体在鼻咽癌中的研究进展

鼻咽肿瘤常出现在咽隐窝,靠近颅底,是起源于鼻咽黏膜的上皮性癌,相较于其他癌症发病率较低,但恶性程度高,远处转移是其治疗难点[1]。EB病毒感染被认为是导致鼻咽癌发生的主要因素,它主要编码EB病毒核抗原1(EBNA-1)、潜伏膜蛋白(LMP)1、LMP2等多种蛋白[2-3]。LMP1在大部分EB病毒相关恶性肿瘤中都有表达,对鼻咽癌的发展有深远影响[4]。以上这些发现对进一步研究鼻咽癌的发病机制有重要意义。肿瘤微环境是肿瘤在生长、增殖、转移过程中所处的内环境,为肿瘤发展提供了不可缺少的物质基础,与肿瘤细胞生长、转移密不可分[5-6]。鼻咽癌所处微环境除了鼻咽癌肿瘤细胞本身,还有免疫细胞、炎症因子、趋化因子等参与组成[7]。趋化因子分为CXC、CC、CX3C、XC 4个亚家族,它是一类细胞分泌的小细胞因子或信号蛋白,因为有诱导反应细胞定向迁移能力而得名[8]。趋化因子及其受体作为微环境中重要的细胞因子,在肿瘤细胞侵袭、转移过程中诱导免疫细胞聚集,通过促进或抑制作用影响鼻咽癌的发展[6]。研究表明,LMP1在鼻咽癌发展中能够促进血管生成及免疫调节,引起肿瘤微环境中的骨髓源性抑制细胞扩增导致免疫逃逸,也可以通过调节部分趋化因子来增强骨髓源性抑制细胞扩增,造成鼻咽癌的肿瘤免疫抑制[9]。迄今为止,已经发现了一些与鼻咽癌发展密切相关的趋化因子及受体,如CXCR7、CXCR4、CXCL12、CXCL8、CXCR2等,它们直接或间接影响癌细胞的增殖和转移。因此,回顾趋化因子及其受体在鼻咽癌中的作用有助于进一步分析其发展机制,也有助于鼻咽癌的靶向治疗和预后。

基于高通量测序的拷贝数变异检测技术在产前诊断中的临床应用

我国是出生缺陷高发国家之一,出生缺陷发生率高达5.6%,每年新增出生缺陷患儿约900000例,出生时临床可见缺陷患儿数高达250000例,这一严重现象给家庭和社会都带来了巨大压力[1]。其中80%以上的出生缺陷由染色体畸变引起,在染色体结构变异中最主要的变异类型是拷贝数变异(CNV)[2]。CNV是指染色体上DNA片段大小范围从1 kb到几个Mb的亚显微水平的基因组变异,包括缺失和重复两种类型[3]。

1例12号环状染色体的遗传学分析

目的探讨1例患有12号环状染色体患者的临床表型和遗传学特征。方法收集1例12号环状染色体患者的症状、体征和影像学检查等临床资料,应用染色体常规G显带技术(chromosome G banding technique)、染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)、荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)和多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)进行分析。结果本例12号环状染色体患者流产2次,其他临床体征正常;性激素6项正常;抗苗缪勒管激素0.57 ng/m L,低于参考区间;腹部B超未见异常;该患者核型为mos 46,XX,r(12)(p13q24)[96]/45,XX,-12 [3]/46,XX,dic r(12; 12)(p13q24)[1]; CMA结果显示12号染色体在12q24.33区域存在小片段的缺失,缺失区域为良性CNVs; FISH检查结果显示12号环状染色体长臂末端缺失; MLPA检查结果显示12号长臂末端亚端粒缺失。结论本例环状12号染色体临床体征正常,环状染色体的临床表现与核型嵌合比例及12q末端缺失的多少相关,女性流产可能与r(12)的不稳定相关。

ISO 15189认可迎检和内审系统的设计与应用

为了满足ISO 15189医学实验室质量和能力评审认可要求,该实验室利用SpringBoot+SpringMVC技术框架进行构建,采用JAVA等编程语言和MySQL 5.7数据库技术搭建Web平台,基于Apache/Nginx/Caddy应用服务器,设计研发了迎检和内审系统。迎检系统主要对15个管理要求、10个技术要求和各专业领域应用说明的每一条款以标准解读、查阅文件、访谈调查、追踪核实、现场观察等不同方式进行解读。内审系统为实验室提供了完整的内审模板,为全流程提供范例。迎检和内审系统实现了电子化记录,有效提高了实验室认可效率,满足了医学实验室质量管理体系建设的要求。

外泌体在胶质瘤微环境中的研究进展与应用

中枢神经系统恶性肿瘤在临床上是预后最差的肿瘤疾病之一,其中恶性胶质母细胞瘤(GBM)是最常见的中枢神经系统肿瘤,发病率约占脑部肿瘤的1/2,临床上恶性胶质瘤患者的中位生存期只有14~17个月[1]。目前,临床上GBM的治疗手段主要为手术切除、放疗和化疗等方法,但仍有约2/3的患者在治疗10个月内复发,5年生存率仅为5%[2]。

新型冠状病毒核酸检测的主要影响因素及控制措施

新型冠状病毒肺炎于2020年2月11日被世界卫生组织(WHO)命名为COVID-19(coronavirus disease 19)。自COVID-19疫情暴发以来,核酸检测作为病毒感染的直接证据在疾病的诊断、治疗和防控中起到关键作用。但因部分病例确诊前多次核酸检测均呈阴性,核酸检测结果的可靠性受到临床广泛质疑。这种“假阴性”结果除与检测方法的检出能力有关外,还与标本的采集、保存、运输以及疾病的进程和病毒特点密切相关。该文结合本实验室在核酸检测实践中遇到的一些实际问题,对影响核酸检测的分析前、中、后等多种因素进行分析和探讨,并提出提高核酸检测质量的具体措施。

15种高危型人乳头瘤病毒核酸检测方法验证及人群感染情况调查

目的 对实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)核酸进行方法学评价,同时对本院妇产科15种高危型HPV感染情况进行调查。方法 参考相关文件对性能评价的要求,验证检测方法的重复性、准确度、测定下限和抗干扰能力。对2018年6月至2019年4月份深圳市罗湖区医学检验中心妇产科23 276例HPV送检标本检测结果进行分析。结果 HPV高危分型试剂盒批内及批间阴阳性符合率均≥95.00%,室间质评结果符合率为100.00%,临界阳性标本重复性检测的阳性检出率为100.00%。HPV不同型别之间及与多种生殖道常见微生物之间无交叉反应,红细胞浓度达4.00%对检测结果无内源性干扰。HPV总体感染率为19.77%。高危型HPV感染年龄呈“U”形分布,≤25岁年龄段感染率最高(28.70%),其次为≥56岁年龄段(27.63%)。总体感染率排名前5位的HPV基因型别依次为56、58、16、51、68型。各年龄组以单一感染最多见。结论 qPCR方法是一种快速、便捷、准确、稳定检测HPV的方法,适用于大规模的临床HPV样本检测。深圳市罗湖区HPV感染亚型分布存在地区特异性,5个年龄组不同HPV感染状况亦有差异。流行病学调查结果为HPV感染的临床诊断和防治提供参考依据。

环状RNA在恶性肿瘤发生发展和诊疗中的研究进展

环状RNA(circRNA)是一类共价闭合环状的内源性非编RNA,在各种真核细胞基因组广泛存在。因其具有丰度高、结构稳定、高度保守及组织特异表达等性质,成为最近几年研究的热点。研究发现,circRNA竞争性吸附微小RNA(miRNA),作为miRNA海绵,参与多种基因的表达调控,在肿瘤发生发展、侵袭转移等过程中发挥重要作用。该文就circRNA的起源、特征、功能及其在肿瘤发生发展、侵袭转移、诊断预后方面的研究作以下综述。

ICP-MS法测定人全血中19种微量元素的性能评价及临床应用

目的评价电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)检测人全血中19种微量元素[钙(Ca)、镁(Mg)、铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)、铬(Cr)、硒(Se)、钼(Mo)、锰(Mn)、锂(Li)、锶(Sr)、铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铋(Bi)、钒(V)、砷(As)、钴(Co)、铊(Tl)]的分析性能,并探讨该方法在检测孕妇19种微量元素中的临床应用价值。方法对ICP-MS法检测人全血中19种微量元素的正确度、精密度、检出限、定量限、线性范围、稳定性进行验证,并与公认的质量指标或厂家声明的性能指标相比较。同时,对该院2019—2020年358例孕妇全血标本中微量元素的水平进行检测,采集肝素钠抗凝静脉血稀释40倍后利用ICP-MS测定,并比较非高龄组孕妇(<35岁)、高龄组孕妇(≥35岁)及妊娠早期组(<13周)、妊娠中晚期组(≥13周)孕妇的19种微量元素水平差异。结果19种微量元素的靶值在计算的验证区间内,正确度验证通过;批内和总变异系数(CV)均≤15%,表明该方法的精密度验证符合要求;定量限满足检测要求,相对偏倚及CV均≤15%;19种微量元素水平与相对响应比值具有良好的线性关系(r≥0.995);通过对标本稳定性的验证发现,检测微量元素的标本可在冷藏(2~8℃)存放5 d、室温(20~26℃)存放3 d的条件下满足检测需求,与全血标本一般保存要求一致。利用该方法对临床标本研究发现,高龄组孕妇与非高龄组孕妇血液中Mg、Tl元素水平差异有统计学意义(P<0.05),妊娠早期组和妊娠中晚期组孕妇血液中的Mg、Cu、Mn、Co元素水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论ICP-MS在检测人全血中19种微量元素时具有良好的分析性能,该检测方法具有精密度高、准确度好、线性范围宽,以及临床标本测定结果准确、可靠等优势,可用于临床多种微量元素高通量快速测定。年龄和孕周是导致孕妇体内部分微量元素水平产生差异的重要影响因素,因此,定期监测微量元素有助于临床了解并研究孕期女性的营养状况,辅助识别相关疾病,并且指导孕妇对微量元素进行合理的补充。

膜蛋白NMHC ⅡA的表达对膀胱癌细胞侵袭和转移的影响

目的近年来,非肌肉肌浆球蛋白重链ⅡA(NMHCⅡA)在肿瘤细胞中的作用备受关注。笔者团队前期研究发现高表达的NMHCⅡA可以作为预示膀胱癌患者不良预后的分子标志物,但其在膀胱癌发生发展过程中的作用尚不清楚。方法采用实时荧光定量PCR和western blot分析膀胱癌细胞株中NMHCⅡA的表达情况,采用划痕实验检测细胞的迁移能力及Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力。结果沉默内源性NMHCⅡA表达后能降低膀胱癌细胞侵袭及转移能力。结论 NMHCⅡA可促进膀胱癌细胞侵袭及转移能力。

BC-6900全自动血液细胞分析仪检测外周血有核红细胞的准确性分析

目的探讨BC-6900全自动血液细胞分析仪法(简称仪器法)检测外周血有核红细胞(NRBC)的方法学特点,评价其临床应用价值。方法同时用仪器法和显微镜检查法(简称镜检法)检测100例外周血标本中的NRBC,以镜检法为金标准,比较不同方法的计数结果,并从批内精密度、稳定性、携带污染率、人机比对方面分析BC-6900全自动血液细胞分析仪检测NRBC的效果。结果仪器法检测NRBC的灵敏度为97.959%(48/49),特异度为96.078%(49/51),假阳性率为3.922%(2/51),假阴性率为2.041%(1/49)。仪器法与镜检法检测结果有极好的相关性(r=0.9731),2种检测法比较,NRBC计数结果差异无统计学意义(P>0.05)。仪器法检测NRBC的重复性好,线性范围较宽,携带污染率小,比对试验中各项目变异系数(CV)均小于实验室允许的CV。结论BC-6900全自动血液细胞分析仪检测外周血NRBC性能良好,能满足临床医生对全血检测分析的需求。

新型冠状病毒肺炎研究进展

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒感染导致的肺炎,以呼吸道飞沫传播和接触传播为主,传染性强,病死率较高。目前尚无治疗COVID-19的特效药物和疫苗。该文通过对COVID-19的流行病学、临床特征、诊断技术、治疗方案、感染控制与预防等方面进行综述,旨在为COVID-19的防治工作提供参考。

外泌体在肿瘤中的作用及前景

外泌体是胞浆内的多囊泡体与细胞膜融合后,释放到胞外基质的直径40~100nm的包含有DNA、RNA、蛋白质等信息分子的膜性囊泡,正常细胞及肿瘤细胞均可产生外泌体与周围环境及远处细胞进行信息交流,尤其在肿瘤细胞中,这种作用显得更为突出。外泌体释放后可通过胞膜融合、内吞及与靶细胞表面受体结合等方式被肿瘤微环境中的细胞、肿瘤细胞及血管内皮细胞等摄取,产生一系列信号改变,对肿瘤的生长、增殖、侵袭、转移、血管新生和免疫逃逸等产生影响。该文主要对外泌体的产生释放机制、成分及在肿瘤发生发展过程中的作用进行综述,并对外泌体在分子标志物方面的应用进行了阐述。