骨髓间充质干细胞外泌体在高氧诱导的新生大鼠支气管肺发育不良模型中的修复作用

目的 明确骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exo)对高氧诱导的大鼠支气管肺发育不良(BPD)模型的修复作用。方法 将新生4 d的Sprague Dawley(SD)大鼠吸入85%高氧建立高氧肺损伤模型。分为空气对照组、高氧组、高氧+PBS组和高氧+Exo组4组。使用BMSCs-Exo腹腔注射1周后处死SD大鼠,取肺组织进行石蜡包埋,分别进行HE染色,辐射状肺泡计数(radial alveolar counts, RAC),Masson染色、免疫组化染色和TUNEL染色。ELISA和Real time-PCR(qPCR)检测血清和肺组织蛋白白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、组织金属蛋白酶-9(MMP-9)及血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的表达。结果 动物模型中,HE染色后对各组肺泡进行统计学分析显示,高氧+Exo组的肺泡数量显著高于高氧组及高氧+PBS组(P<0.001)。Masson染色后对蓝色胶原纤维所占面积百分比进行定量分析显示,高氧+Exo组胶原纤维所占面积百分比显著低于高氧组和高氧+PBS组(P<0.001)。免疫组化染色示高氧+Exo组的Ki-67和Bcl-2阳性细胞数量较高氧组和高氧+PBS组显著增高(P<0.05),而Bax阳性细胞数量较以上两组显著降低(P<0.001)。TUNEL染色检测凋亡的肺泡上皮细胞,高氧+Exo组显著低于高氧组和高氧+PBS组(P<0.001)。ELISA和qPCR检测显示,高氧+Exo组相较于高氧组和高氧+PBS组的IL-1β、TNF-α、MMP-9显著降低(P<0.001),而VEGF-A表达显著增高(P<0.001)。结论 BMSCs-Exos在肺发育不良模型干预中能抗高氧诱导的细胞凋亡,促进肺上皮细胞发育和组织修复。

中药复方防感汤对SARS-CoV-2刺突蛋白引起的肺和结肠上皮细胞损伤的保护作用与TGF-β/Smad2/3和NF-κB通路的调节有关

背景与目的探讨中药复方防感汤对SARS-CoV-2刺突蛋白诱导的肺、肠损伤的体外和体内保护作用及其机制。方法用重组SARS-CoV-2刺突蛋白刺激BALB/c雌性小鼠和3株经防感汤预处理的细胞系。检测各组组织苏木精-伊红(HE)染色、病理评分、细胞通透性和活力以及肺、结肠ACE2表达。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清和细胞上清中炎症因子水平。蛋白质印迹法(Western blotting)检测NF-κB p65、p-NF-κB p65、p-IκBα、p-Smad2/3、TGF-β1、Caspase3、Bcl-2的表达。结果从病理评分以及细胞通透性和活力来看,中草药在体内和体外均对刺突蛋白诱发的肺和结肠损伤均有保护作用(P<0.05)。中草药上调肺和结肠中被刺突蛋白降低的ACE2表达,显著改善刺突蛋白引起的炎症标志物的分泌紊乱,同时调节TGF-β/Smads和NF-κB通路的活性。结论中药复方防感汤对SARS-CoV-2刺突蛋白刺激的肺和肠组织损伤具有一定的保护作用,其机制基于对可能具有组织类型特异的NF-κB和TGF-β1/Smad通路的调控作用。