荔枝壳原花青素对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制研究

目的研究荔枝壳原花青素(Procyanidins extracted from the litchi pericarp,LPPC)对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法实验大鼠随机分为5组,连续灌胃两周:空白对照组(control)和脓毒症模型组(LPS)每天给予蒸馏水灌胃1次;LPPC低、中、高剂量组分别每天给予新鲜配制的LPPC 50,100,200 mg·kg-1·d-1灌胃1次。给药结束后,建立脓毒症动物模型。即除空白对照组外所有大鼠腹腔内注射LPS(lipopolysacchride,10mg·kg-1,ip)诱导急性脓毒症模型。4 h后收集大鼠血清,检测血清同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(AST/GOT)的活力。取大鼠心肌组织,测定心肌组织丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。TUNEL染色观察大鼠心肌细胞凋亡情况。Western blot法检测凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3及TNF-α水平。结果与正常对照组(control)比较,脓毒症模型组大鼠血清CK-MB、LDH、AST/GOT以及心肌组织MDA含量均明显升高(P<0.01);同时,心肌组织T-AOC和GSH的活力明显降低(P<0.01);凋亡心肌细胞数量明显增加(P<0.01);Cleaved caspase-3及TNF-α表达水平明显下降(P<0.01)。LPPC预处理明显降低了大鼠血清CK-MB、LDH、AST/GOT以及心肌组织MDA含量;增加了大鼠心肌组织T-AOC和GSH的活力;凋亡心肌细胞数量明显减少;Cleaved caspase-3及TNF-α表达水平明显下降。结论荔枝壳原花青素预处理能够明显减轻脓毒症大鼠心肌细胞凋亡,可能与其抗氧化性损伤作用有关。

补益凉解法对病毒性肝炎小鼠免疫调节影响的实验研究

目的:探索补益凉解法对病毒性肝炎小鼠免疫调节的影响。方法:采用高滴度腺病毒尾静脉注射建立小鼠急性肝炎模型,运用免疫组化、淋巴细胞提取分离术、流式细胞术、定量RT-PCR等实验技术,研究补益凉解法对病毒性肝炎小鼠肝损伤、IL-33、ST2、肝脏病理、Th1及病毒载量的影响。结果:补益凉解法使IL-2和IFN-γ水平上调,血清ALT、IL-33、ST2水平下降。结论:补益凉解法对病毒性肝炎肝损伤的有防护作用,其机制可能是通过免疫调节,增强感染小鼠I型免疫应答,从而下调IL-33/ST2的表达、减轻肝脏损伤。

原花青素B_2对LPS诱导的心肌细胞凋亡的保护作用

目的研究原花青素B_2(procyanidin B_2,PCB_2)对脂多糖(lipopolysacchride,LPS)诱导的心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法采用原代培养新生大鼠心肌细胞,LPS诱导心肌细胞损伤模型,PCB_2低、中、高剂量组分别用含有6.25、12.5、25.0μmol·L^(-1)PCB_2的DMEM培养基持续培养24h。采用四唑盐(MTT)比色法测定心肌细胞存活率,光泽精化学发光法测定心肌细胞NOX的活性,Western blot法分析心肌NADPH氧化酶p47^(phox)亚基的表达,TUNEL法检测细胞凋亡,流式细胞术测定心肌细胞ROS的含量。结果 LPS诱导的细胞损伤组与正常对照组(Control)比较,心肌细胞活力明显降低(P<0.01),而心肌细胞NOX活性、p47^(phox)亚基的表达、凋亡细胞数量以及ROS含量均明显增加(P<0.01)。PCB_2处理后,低、中、高剂量组细胞活力均明显升高,心肌细胞NOX活性、p47^(phox)亚基的表达、凋亡细胞数量以及ROS含量均明显下降,且具有剂量依赖性(P<0.01)。结论 PCB_2通过抑制NADPH氧化酶激活、p47^(phox)的表达以及活性氧的产生发挥对LPS诱导的心肌细胞凋亡的保护作用。

舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:评价舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤是否具有保护作用,并探讨其可能的机制。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、舒芬太尼低剂量组(SL组)、舒芬太尼高剂量组(SH组)和舒芬太尼+渥曼青霉素组(WM组)。于再灌注前,各组分别注入以下药物:SL组予生理盐水及舒芬太尼1μg/kg,SH组予生理盐水及舒芬太尼3μg/kg,WM组予渥曼青霉素15μg/kg及舒芬太尼1μg/kg,S组及I/R组予生理盐水。于再灌注末,采集动脉血检测血浆c Tn I浓度;取心脏测定缺血危险区(AAR)和梗死区(IS)体积。结果:与S组相比,其余四组c Tn I浓度均明显升高(P<0.01);与I/R组比较,SL组、SH组c Tn I浓度及IS/AAR均明显降低(P<0.01),WM组c Tn I浓度明显降低(P<0.01);与SL组比较,SH组c Tn I浓度及IS/AAR均明显降低(P<0.01),WM组均明显升高(P<0.01)。结论:舒芬太尼后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,该保护作用与PI3K相关信号通路的激活有关。

舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的评价舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤肌钙蛋白的影响,并探讨其可能的机制。方法雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠30只,采用随机数字表法将大鼠随机分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、舒芬太尼低剂量组(SL组)、舒芬太尼高剂量组(SH组)和舒芬太尼+磷酸酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂渥曼青霉素组(WM组)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注模型。于再灌注前10 min及3 min时,各组分别经颈静脉注入以下不同药物:SL组分别注射0.9%氯化钠溶液及舒芬太尼1μg/kg,SH组分别注射0.9%氯化钠溶液及舒芬太尼3μg/kg,WM组分别注射渥曼青霉素15μg/kg及舒芬太尼1μg/kg,S组及I/R组注射相同容量的0.9%氯化钠溶液。于平衡后、缺血30 min、再灌注30 min、再灌注60 min、再灌注120 min时记录平均动脉压(MAP)和心率。于再灌注120 min时采集大鼠颈动脉血样,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆心肌肌钙蛋白I(cardiac troponins I,c Tn I)浓度。结果各组心率、平均动脉压比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与S组比较,I/R组、SL组、SH组、WM组血浆c Tn I浓度均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与I/R组比较,SL组、SH组、WM组血浆c Tn I浓度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与SL组比较,SH组血浆c Tn I浓度明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);WM组血浆c Tn I浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论舒芬太尼后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,该保护作用与PI3K相关信号通路的激活有关。

胃癌中lncRNA BC002811表达与微血管密度和淋巴结转移的关系及其临床意义

目的探讨lncRNA(long non-coding RNA,长链非编码RNA)BC002811在胃癌中的表达与微血管密度和淋巴结转移及胃癌发生发展及预后的关系。方法纳入行胃癌手术切除患者的病例样本共计48例,对这48例胃癌样本采用q PCR检测lncRNA BC002811的相对表达量及检测微血管密度(MVD)参数,并与淋巴结转移等预后情况进行相关性分析。结果 lncRNA BC002811相对表达量与患者的一般资料如年龄、性别以及肿瘤的特征如大小、发病的部位、侵袭深度、分期及分化程度、是否远处转移等并不存在相关性(P>0.05);而淋巴受累方面,淋巴受累组的lncRNA BC002811相对表达量明显上调(P<0.05),而无淋巴受累组的相对表达量与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。lncRNA BC002811表达水平与MVD差异表达具有相关性。结论 lncRNA BC002811相对表达量水平与胃癌的淋巴结转移及预后有一定的相关性,但还需进一步系统研究。