益气祛湿方合并富血小板血浆治疗慢性难愈性创面的潜在分子机制的实验研究

目的通过构建慢性难愈性创面大鼠模型,探讨黄枫教授益气祛湿方及富血小板血浆(PRP)干预对大鼠创面组织血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGFA)、血小板-内皮细胞粘附分子(Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)、白细胞介素-6(Interleukin 6,IL-6)、血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)因子表达及创面组织病理学变化的影响。方法将36只SPF级12~14周龄雄性SD大鼠,适应性喂养1周后,按数字表法随机分为空白组、中药组、PRP组、中药+PRP组,每组各9只。均通过腹腔注射stz法构建慢性难愈性创面大鼠模型。造模成功后,各组每天分别进行相应干预措施(空白组灌胃等量生理盐水作对照;中药组灌胃等量益气祛湿方制备的中药;PRP组局部创面注射或涂抹同源PRP;PRP+中药组灌胃等量中药及注射PRP),于术后3 d、7 d、15 d三个不同时间点观察创面外观愈合情况,分别选取创面周围组织标本,用于行病理切片HE和Masson染色观察软组织病理变化,采用Western-blotting检测创面组织VEGFA、CD31、IL-6、PDGF蛋白的表达水平,采用RT-PCR检测创面组织VEGFA、CD31、IL-6、PDGF基因的表达水平。结果大鼠创面愈合评估,空白组随治疗时间递增未见明显愈合,PRP组及中药组随治疗时间递增可见创面少许愈合,PRP+中药组随治疗时间递增可见创面明显缩小。HE和Masson染色下,空白组创面组织可见大量炎性细胞,组织结构紊乱无序,未见明显胶原纤维及血管细胞形成,Masson染色较浅;PRP组及中药组创面组织可见少许炎性细胞浸润,组织结构较整齐,可见部分胶原纤维及血管细胞形成;PRP+中药组创面组织可见少量炎性细胞,组织结构紧密有序,可见大量胶原纤维及血管细胞形成,Masson染色较深。在Western-blotting检测及RT-PCR检测中,各组第7、15天较同组第3天VEGFA、CD31、PDGF因子表达均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05),第7天、15天较同组第3天IL-6因子表达均有所下降(P<0.05);在同一时间节点里PRP+中药组VEGFA、CD31、PDGF、IL-6因子表达最高,差异有统计学意义(P<0.05),空白组VEGFA、CD31、PDGF、IL-6因子表达最低,差异有统计学意义(P<0.05),PRP组及中药组因子表达介于前两组之间,差异无统计学意义(P>0.05)。结论PRP注射及黄枫教授治疗CRW益气祛湿方的服用均可通过提高VEGFA、CD31、PDGF因子水平,降低IL-6因子水平促进慢性创面的修复愈合,且两者结合使用效果更优于单独干预。

续断对大鼠骨质疏松性骨折愈合影响的生物力学实验研究

目的:观察续断对大鼠去卵巢骨质疏松性骨折模型骨折愈合中生物力学性能的影响。材料与方法:选取30只4月龄大鼠,分为假手术骨折对照组、去卵巢骨折对照组、去卵巢骨折中药处理组。后两组去卵巢3月造成绝经后骨质疏松模型,之后三组均造成桡骨远端骨折,灌药1月后检测桡骨骨痂生物力学强度。结果:中药处理组最大剪切力17.76±1.25N,剪切应力1.12±0.13N/mm2,生物力学性能与基础骨折对照组相接近,明显优于去卵巢骨折对照组(P<0.01)。结论:续断能改善骨质疏松性骨折愈合骨痂的生物力学性能,具有一定的促进骨折愈合的作用。

中药外洗结合TKA对晚期KOA临床效果及膝关节评分的影响

目的：探讨中药外洗联合全膝关节置换术治疗对晚期膝骨关节炎的疗效评价。方法：纳入本院2015年4月—2016年10月的60例晚期膝骨关节炎患者,随机分为两组,每组各30例,对照组全膝关节置换术治疗,观察组在对照组的基础上给予患者中医外洗治疗,4周治疗周期,治疗结束后采用Rasmussen分级、临床症状评估、临床疗效统计以评估两组的疗效。结果：治疗后两组患者的症状积分差异具有统计学意义（P〈0.05）,临床症状及体征比较,膝、跟键反射、生活及工作能力方面差异比较,无统计学差异（P〉0.05）,其他指标比较差异则具有统计学意义（P〈0.05）;对照组的总有效率达60.0%,观察组的总有效率达95.0%;治疗后症状积分和Rasmussen分级评分观察组明显优于对照组（P〈0.05）。结论：全膝关节置换术与中医外洗联合治疗方法可显著提高晚期膝骨关节炎的临床效果。

基于RNA-seq技术分析腰突颗粒防治腰椎间盘退变的转录组学特征

背景:腰突颗粒是课题组治疗腰椎间盘退行性疾病的经验方,一直有较好的临床疗效,但其作用机制一直未明确。目的:基于转录组测序(RNA-Seq)技术探讨临床经验方腰突颗粒防治腰椎间盘退变的可能分子机制。方法:将10只新西兰大白兔按随机数字表随机分为生理盐水组和腰突颗粒组(n=5),生理盐水组予以生理盐水20 mL/次灌胃,腰突颗粒组予以灌服腰突颗粒水煎剂20 mL/次,均2次/d,连续灌胃1周。于最后一次灌胃完成2 h后经颈总动脉采血收集兔血清分别制作为10%DMEM培养液;分别使用2种血清培养液培养人髓核细胞,镜下观察2组细胞形态,锥虫蓝染色后测定2组细胞活力;另取第3代髓核细胞,干预48 h后采用RNA-Seq技术对2组细胞中的mR NA进行检测,进行转录组测序筛选差异mR NA;将得到测序结果进行差异基因表达、GO功能显著性富集及Pathway显著性富集分析。结果与结论:(1)腰突颗粒组髓核细胞贴壁后以圆形或梭形多见,胞浆充足,胞核清晰。细胞核核表面光滑,核膜完整,长条状粗面内质网排列整齐,线粒体少,胞质内可见散在溶酶体及纤丝;生理盐水组细胞呈梭形和多角形,细胞核大,核仁多为2或3个,细胞核表面稍粗糙且质网可见轻微扩张,线粒体少且有部分膜不完整;(2)腰突颗粒组髓核P1、P2、P3代细胞贴壁速度、传代时间及细胞活力均优于生理盐水组(P<0.05);(3)比较2组测序结果发现,差异表达基因共有464个,其中上调基因有143个,下调基因有321个。差异基因的GO功能显著性富集分析显示,差异基因主要集中在生物过程部分的细胞调控与代谢过程中。差异基因的Pathway显著性富集分析结果发现,主要集中在代谢相关通路;(4)综上,通过RNA-Seq技术获得了腰突颗粒防治椎间盘退变作用的差异基因表达谱,腰突颗粒防治椎间盘退变的分子机制主要通过调节上调细胞外基质代谢相关基因及下调多糖合成相关基因实现,可为进一步研究提供基础。

亚甲蓝对人髓核细胞毒性的CCK-8法检测

背景:亚甲蓝在腰椎椎间孔镜手术中具有鉴别及显影退变椎间盘的作用,但是很多专家学者提出亚甲蓝会加速椎间盘的退变,然而国外文献研究发现亚甲蓝具有嗜酸性,推测对具有酸性环境的退变椎间盘具有治疗作用。因此,亚甲蓝对椎间盘是否具有毒性作用一直存在争议。目的:使用CCK-8法测定亚甲蓝对髓核细胞是否具有毒性作用。方法:选取2例椎间盘突出患者的废弃髓核组织,消化后提取髓核细胞,培养至细胞长满培养皿80%后消化细胞并制作细胞悬液,分6组接种到96孔板,一组为空白对照(只有培养基、CCK-8溶液而没有细胞),一组为0加药对照组(只有培养基、细胞和CCK-8溶液),其余分别加入1%,2%,3%,4%浓度的亚甲蓝干预细胞生长繁殖。在培养24,48,72,96 h后使用CCK-8法测定吸光度,计算细胞活力并观察每一组颜色变化。结果与结论:0加药对照组颜色最深,亚甲蓝各浓度组随着亚甲蓝浓度升高浓度变浅,细胞活力0加药组活力最强,随着亚甲蓝浓度增高,活力下降。推测亚甲蓝对人髓核细胞具有一定的细胞毒性。

健骨二仙提取液对去卵巢大鼠胫骨中段皮质骨形态计量学的影响

目的探讨健骨二仙提取液对去卵巢大鼠皮质骨形态计量学的影响,进一步研究该药防治骨质疏松症的作用机理。方法将42只6.5月龄雌性近交系大鼠随机分为4组:假手术组、单纯去卵巢组(即模型组)、卵巢切除+健骨二仙提取液(即治疗组)、卵巢切除+倍美力组(即倍美力组),采用去卵巢方法进行骨质疏松造模,6周后药物干预治疗10周,采用皮下注射盐酸四环素和钙黄绿素进行骨表面的双荧光标记,全部处死大鼠取右胫骨中段不脱钙骨切片进行骨形态计量学参数测定。结果与去卵巢组相比较,治疗组骨髓腔总面积减小(P<0.05),外膜面的骨形成各项参数均无明显变化,治疗组和倍美力组骨内膜面的骨吸收参数均降低(P<0.01),治疗组内膜面骨形成参数降低(P<0.05或<0.01),使皮质骨转换水平比倍美力组更接近假手术组水平。结论健骨二仙提取液可抑制去卵巢后高转换型骨质疏松的形成,总体抑制骨吸收大于骨形成,减少了骨量丢失和骨结构退化,是该药防治骨质疏松症的机理之一。

桂枝芍药知母汤对类风湿性关节炎滑膜细胞凋亡的基因调控的实验研究

目的观察探讨桂枝芍药知母汤对RA大鼠滑膜细胞增殖、凋亡的影响及对细胞凋亡调控基因的影响,探讨该汤药的作用机制。方法利用醋酸溶解Ⅱ型胶原蛋白及弗氏完全佐剂混合,诱导大鼠佐剂性关节炎模型,以"桂枝芍药知母汤浓缩液"为干预药物,行体内、体外双重实验,观察滑膜细胞凋亡及其形态改变情况,应用SP法检测Fas抗原、Bcl-2蛋白、p53蛋白。结果体内、体外实验实验组的作用均优于对照组(P<0.05),两实验中实验组细胞凋亡增加,Bcl-2、p53表达下降,Fas表达上调,与对照组及正常组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论桂枝芍药知母汤浓缩液可明显减轻类风湿性关节炎大鼠滑膜增殖的病理改变,并可使体内、体外实验组RA大鼠Bcl-2、p53表达下降,Fas表达上调,为临床应用桂枝芍药知母汤治疗RA提供了实验依据。

关节镜下微创内固定治疗SchatzkerⅢ型胫骨平台骨折的效果及对炎症因子的影响

目的探讨关节镜下微创内固定治疗SchatzkerⅢ型胫骨平台骨折的临床效果。方法选择本院骨科2016年1月至2019年5月期间收治的胫骨平台SchatzkerⅢ型骨折患者60例,按照随机数字表法分为2组,每组30例,治疗组予以关节镜下微创内固定手术治疗,对照组予以切开复位内固定手术治疗。比较两组手术时间、术中出血量、术后引流量、术后负重时间、术后住院时间、骨愈合时间和术后并发症发生率;比较两组术后3 d、6个月、12个月时血清、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平;比较两组术后6个月、12个月膝关节Lysholm功能评分。结果治疗组术中出血量、术后引流量均少于对照组(P<0.01),术后住院时间、术后负重时间、骨折愈合时间均短于对照组(P<0.05);术后3d、6个月时治疗组血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均低于对照组(P<0.01);术后6个月时治疗组疼痛、肿胀、下蹲评分均高于对照组(P<0.01);治疗组近期并发症、远期并发症发生率均低于对照组(P<0.05)。结论关节镜下微创内固定可减少术中出血量和术后引流量,缩短术后住院时间、术后负重时间和骨折愈合时间,减少术后并发症,降低炎症因子水平,改善膝关节功能,其治疗SchatzkerⅢ型胫骨平台骨折效果显著。

经皮椎间孔镜YESS与TESSYS技术结合治疗多节段腰椎间盘突出症

目的：探讨经皮椎间孔镜YESS与TESSYS技术结合治疗多节段腰椎间盘突出症的手术技巧及临床疗效。方法对52例经保守治疗无效的多节段腰椎间盘突出症患者术后采用经皮椎间孔镜YESS与TESSYS技术结合治疗。比较术前、术后1周、术后半年的下腰痛JOA评分和Oswestry功能障碍指数（ ODI）,进行改良MacNab疗效评定。结果手术时间72∽139（116±23）min,术中出血量3∽35（19±12）ml。术后患者均未出现感染、神经损伤、椎管内血肿等并发症。术后1周52例获得随访,术后半年48例获得随访。术后1周改良MacNab疗效评价：优45例,良5例,可1例,差1例,优良率96%；术后1周下腰痛JOA评分、ODI值与术前比较差异均有统计学意义（P〈0．01）,术后半年下腰痛JOA评分、ODI值以及改良MacNab疗效评定与术后1周比较差异均无统计学意义（ P 〉0．05）。结论根据多节段腰椎间盘突出症突出类型,采用经皮椎间孔镜YESS与TESSYS技术结合治疗是一种安全、微创、疗效满意的方法。

马钱子药膏改善颈椎病患者周围神经压迫症状:随机对照306例效果观察

目的:观察马钱子药膏改善颈椎病患者周围神经压迫症状的临床效果,并与扶他林软膏进行对照。方法:将2002-06/2005-11到深圳市中医院门诊就诊的360例颈型、神经根型颈椎病患者随机分为治疗组185例和对照组175例,治疗组采用马钱子药膏,对照组采用扶他林软膏,均外用于颈项部,每天外搽3次,每次五六分钟,7d为1个疗程,持续治疗4周,每周观察记录1次。将颈项部疼痛、上肢放射痛、上肢麻木症状按轻重不同分别计为0,1,2,3分。同时参照2002年卫生部颁发的《中药新药临床研究指导原则》中关于颈椎病的诊断疗效标准判定疗效。结果:360例患者均进入结果分析。①治疗组治疗1,2,3,4周颈项痛、放射痛评分低于对照组(P<0.05或0.01)。治疗组治疗2,3,4周上肢麻木症状低于对照组(P<0.05或0.01)。对各症状的缓解主要体现在治疗的第1,2周,治疗第3,4周时效果趋于稳定,与治疗2周后的差异不明显。②治愈率和总有效率:治疗组高于对照组(41.6%,33.1%;92.4%,85.8%,P<0.05)。③治疗组有14例患者出现皮肤瘙痒症状,9例患者出现敷药部位的皮肤潮红,其中严重的有2例患者出现皮肤小水疱,对照组10例患者出现皮肤瘙痒症状,6例患者出现敷药部位的皮肤潮红,但经过正确的局部处理措施后,症状缓解。结论:马钱子药膏对颈项痛、上肢放射痛、上肢麻木等症状具有可靠的治疗效果,该药对上述症状的改善要优于扶他林软膏。

血浆硬化蛋白浓度与膝关节骨关节炎软骨退变程度的相关性

目的分析血浆硬化蛋白(sclerostin)水平与膝骨关节炎(KOA)严重程度的相关性。方法选取KOA女性患者和健康女性各95例,ELISA检测血浆中sclerostin、CTX-II和aggrecan降解片段AGG1及AGG2的浓度。根据Kellgrene&Lawrence(KL)分级对95例KOA患者进行X线分级,并进行相关分析。结果 KOA患者血浆sclerostin浓度明显低于对照组(P<0.001)。血浆sclerostin浓度与KL分级负相关(r=-0.828,P<0.001),与血浆CTX-II(r=-0.917,P<0.001)、AGG1(r=-0.658,P<0.001)、AGG2(r=-0.583,P<0.001)负相关。结论 KOA患者的血浆sclerostin浓度与软骨退变程度相关,有助于在临床上监测病情进展以及评价病情的严重性。

寒痹散穴位贴敷联合按摩治疗膝骨性关节炎的效果观察

目的观察寒痹散穴位贴敷联合按摩治疗膝骨性关节炎的临床效果。方法采用随机单盲对照法将符合入选标准的骨科入院患者分为3组:寒痹散穴位贴敷联合按摩组、寒痹散痛点贴敷组、寒痹散穴位贴敷组,每组各30例患者,治疗前后参照WOMAC骨关节炎指数评分和膝关节各项体征积分,对比3组的临床疗效。结果寒痹散穴位贴敷联合按摩组总有效率97%,寒痹散痛点贴敷组67%,寒痹散穴位贴敷组70%,3组间进行比较,寒痹散穴位贴敷联合按摩组优于寒痹散痛点贴敷组和寒痹散穴位贴敷组,P<0.05,差异有统计学意义。结论寒痹散穴位贴敷联合按摩治疗膝骨性关节炎临床效果显著。

马来酸桂哌齐特配合颈椎牵引治疗颈性眩晕的临床观察

目的观察马来酸桂哌齐特配合颈椎牵引治疗颈性眩晕的疗效。方法治疗组136例采用马来酸桂哌齐特注射液配合颈椎牵引治疗;对照组94例采用颈椎牵引治疗。结果治疗组总有效率为95.6%,高于对照组的66.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论马来酸桂哌齐特配合颈椎牵引治疗颈性眩晕优于单纯颈椎牵引治疗。

经皮激光椎间盘减压术加中药内服治疗腰椎间盘突出症36例疗效观察

目的:观察经皮激光椎间盘减压术(PLDD)加中药内服治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:将73例患者随机分为2组。治疗组36例,采用PLDD术后联合中药二陈汤加活血祛瘀药内服治疗;对照组37例,单纯采用椎板开窗髓核摘除术治疗。观察临床疗效及住院天数、手术时间、术中出血量等情况。结果:优良率治疗组为80．56％,对照组为81．08％,2组比较, 差异无显著性意义(P>0．05)。但在住院天数、手术时间、术中出血量方面,治疗组与对照组比较,差异均有显著性意义(P< 0．05)。结论:PLDD术后联合中药二陈汤加活血祛瘀药内服治疗腰椎间盘突出症,具有住院天数短、手术时间短、术中出血量少和术后恢复快等优点,是微创加中药内服治疗腰椎间盘突出症的首选方法。

铍针治疗颈横皮神经卡压综合征

目的 :探讨颈横皮神经卡压对颈部疼痛的影响及相应治疗方法。方法 :对 112例颈横皮神经卡压所致颈部疼痛的患者 ,采用铍针进行治疗 ,选取胸锁乳突肌后缘及颈椎棘突旁压痛点为进针点 ,并对治疗前后进行疗效评估。结果 :112例患者平均随访 16个月 ,其中治愈 6 4例 ,显效 36例 ,好转 8例 ,无效 4例 ,总有效率达 97 15 %。结论 :颈横皮神经卡压可以导致颈部疼痛 ,铍针治疗效果肯定。

肩峰下撞击综合征45例治疗体会

目的:总结肩峰下撞击综合征的治疗体会。方法:肩峰下撞击综合征患者45例,按Neer分期和肩峰形态分型分为手术组(Neer分期Ⅲ期或Ⅲ型肩峰患者17例)及非手术组(余下的28例)。手术组先在关节镜下行肩关节检查和清创,再通过关节镜在肩峰下间隙行肩峰成形减压术。非手术组行肩峰下封闭,将封闭液(2%利多卡因5mL、曲安奈德注射液40mg、维生素B12500μg、生理氯化钠5mL)注射入肩峰下间隙,每周1次,治疗2～3次,同时予口服双氯芬酸和物理治疗。结果:手术组(共19例,2例由非手术组转入),总有效率为84%(16/19);非手术组总有效率为89%(25/28)。结论:正确掌握非手术治疗和手术治疗的适应证是成功治疗肩峰下撞击综合征的关键。肩关节镜下肩峰成形减压术适用Neer分期Ⅲ期、Ⅲ型肩峰患者和经非手术治疗失败的患者,其余患者可采用以封闭为主的非手术治疗。

原发性甲状旁腺功能亢进症28例误诊剖析

目的探讨原发性甲状旁腺功能亢进症(primary hyperparathyroidism,PTHT)误诊原因及防范措施。方法对曾误诊的28例PTHT的临床资料进行回顾性分析。结果本组误诊率66. 7%(28/42)。28例首发症状为关节疼痛6例,腰痛、全身骨痛或无力6例,全身多关节疼痛致行走障碍6例,病理性骨折4例,肾绞痛或血尿、烦渴4例,恶心、呕吐、食欲缺乏或便秘2例。就诊初期误诊为骨质疏松症9例,骨肿瘤及肾结石各4例,强直性脊柱炎及类风湿性关节炎各3例,膝关节骨性关节炎2例,胃溃疡、慢性胰腺炎及骨囊肿各1例。误诊时间1周～6年。28例中1例确诊时已出现甲状旁腺危象,经治疗无效死亡;余27例按误诊疾病治疗效果不佳,后经详细分析临床表现并行相关实验室、影像学检查确诊为PTHT,均行手术治疗,术后病情好转出院。术后1个月复查甲状旁腺激素24例正常,3例稍低于正常水平。结论 PTHT起病隐匿,临床表现复杂,对该病认识不足以及过于重视局部症状而忽视整体病情判断是其误诊主要原因。提高对该病认识,熟练掌握其临床特点和诊断线索,对疑似PTHT患者进行多学科会诊,可避免或减少PTHT误诊误治。

胸腰椎压缩骨折复位床托快速复位法治疗胸腰椎压缩骨折30例临床疗效观察

目的探讨自行研制的胸腰椎骨折复位床托治疗胸腰椎压缩骨折的临床疗效和安全性。方法将2011年1月-2012年9月住院治疗的30例胸腰椎压缩骨折患者予快速复位治疗,观察并比较治疗前后胸腰椎压缩骨折患者伤椎高度恢复率、伤椎高度矫正率、症状评分、体征评分和功能活动评分等各项临床指标。结果快速复位后患者伤椎高度恢复率、伤椎高度矫正率、症状评分、体征评分和功能活动情况均优于复位前的,有显著性差异(P<0.05)。结论胸腰椎压缩骨折复位床托快速复位治疗胸腰椎压缩骨折患者临床疗效肯定,治疗后椎体高度恢复满意,临床并发症少,有效减轻患者医疗费用,值得推广。