舞蹈病一家系临床分析及基因诊断

目的从分子水平探讨Huntington舞蹈病(HD)的致病突变,为该家系的基因诊断和遗传咨询提供科学依据。方法对该病进行家系调查,应用巢式PCR及琼脂糖凝胶电泳技术检测患者、HD症前高风险成员、正常人(CAG)n片段的长度,进行基因诊断。结果该家系符合常染色体显性遗传病特征,患者DNA电泳显示2条扩增区带,正常人显示1条扩增区带。结论舞蹈病为常染色体性遗传病,患者相关基因分端(CAG)n重复序列存在异常扩增。

Proteus综合征临床特征及病因分析

目的分析Proteus综合征临床特征及病因,有利于本病的临床诊断。方法体格检查、X线检查,文献复习。结果左腿比右腿略短,左腿、左足及臀部皮肤布满不规则红褐色斑块。X线显示:左侧股骨比右侧缩短,左足跖骨和趾骨增粗且非骨性并连。结论 Proteus综合征临床特征及病因分析对其早期诊断具有重要价值。

Turner综合征胎儿超声诊断价值的探讨

目的探讨超声检查对Turner综合征胎儿诊断的价值。方法对我院13年来经染色体核型分析确诊的28例Turner综合征胎儿超声影像资料进行回顾性分析,评估产前超声检查对该综合征的诊断价值。结果 28例Turner综合征胎儿有25例(89%)超声异常,其中,两种及以上超声指标异常的23例(82%)、淋巴水囊瘤23例(82%)、胎儿水肿14例(50%)、主动脉狭窄8例(29%)。结论超声检查可发现Turner综合征胎儿异常,结合染色体核型分析,对于提高Turner综合征胎儿的产前诊断,降低该患儿出生率具有重要意义。

论外周血CD4^+淋巴细胞及Th1/Th2细胞因子变化与HIV/AIDS疾病发展的相关性

目的探讨CD4+细胞计数和Th1/Th2细胞因子与HIV/AIDS病程进展的相关性。方法利用流式细胞术及ELISA法检测15例HIV感染者和26例AIDS患者外周血CD4+细胞及Th1/Th2细胞因子水平。结果与正常组比较,AIDS组中CD4+细胞数与Th1细胞因子(IFN-γ)水平显著下降(P<0.01),而Th2细胞因子(IL-4)水平显著升高(P<0.01)。HIV组CD4+细胞数较正常组显著下降(P<0.01),Th1细胞因子(IFN-γ)与Th2细胞因子(IL-4)水平无显著性变化(P>0.05)。随着AIDS病情的加重,Th1细胞因子水平降低与CD4+细胞绝对数降低呈显著正相关(P<0.001),Th2细胞因子水平增高与CD4+细胞的绝对数降低呈显著负相关(P<0.01)。结论人体感染HIV后,CD4+细胞计数和Th1/Th2细胞因子水平在评估AIDS的疾病严重程度中可作为一个重要指标。

γδT细胞对系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞活化和凋亡的影响

目的探讨γδT细胞在系统性红斑狼疮疾病中的免疫保护作用。方法检测17例正常人群和44例系统性红斑狼疮患者外周血γδT细胞及亚群的表达情况。以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得17例活动期系统性红斑狼疮患者和10例正常人群外周血TCRγδ细胞系。测定γδT细胞毒活性。用正常人群γδT细胞系与异体活动期SLE患者外周血单核细胞(PMBC)以1∶5、1∶10比例共同培养48小时,活动期SLE患者PMBC作对照孔,观察γδT细胞系对活动期SLE患者PMBC活化和凋亡、细胞因子分泌的影响。结果SLE患者的γδT细胞及亚群数量明显减少(P<0.05)。IL-2可显著增强γδT细胞的细胞毒作用。正常人γδT细胞系与异体SLE活动期患者PMBC细胞共同培养,共同培养二组SLE患者PMBC的CD69表达和凋亡率均较对照组明显下降(P<0.01)。共同培养二组培养上清IL-10水平较对照组明显升高,具有明显差异(P<0.05)。结论SLE患者γδT细胞数及亚群较正常人群明显下降,γδT细胞对SLE外周血淋巴细胞的凋亡和活化具有抑制性作用,并使IL-10分泌水平升高,表明γδT细胞在SLE发病中具有保护性的免疫调节作用。

系统性红斑狼疮患者树突状细胞亚型水平与疾病活动指数的相关性

目的检测系统性红斑狼疮患者树突状细胞亚型水平,探讨与疾病活动指数的相关性。方法使用免疫荧光染色、流式细胞仪检测髓系树突状细胞(MDC)亚型CD11c+和淋巴系树突状细胞(PDC)亚型CD123+的表达,并与SLEDAI、ds-DNA、C3、C4进行相关性分析。结果显示SLE患者和活动期患者外周血中CD11c+和CD123+表达(0.21±0.12);(0.19±0.13)较正常对照组(0.36±0.07)和(0.29±0.9)明显降低(P<0.05)。在SLE病人中,活动期组(0.16±0.11);(0.13±0.06)和静止期组(0.26±0.13);(0.23±0.16)患者外周血CD11c+和CD123+百分率差异存在显著性(P<0.05)。CD11c+和CD123+水平与SLEDAI、ds-DNA具有明显相关性(r=-0.408、-0.436、-0.474、-0.528;P分别为0.018、0.013、0.009和0.003),与C3、C4无明显相关性。结论SLE患者外周血树突状细胞亚型明显降低,并且与SLEDAI相关明显,可作为观察狼疮活动的客观指标。

无精症患者的遗传因素与性激素水平的临床分析

目的探讨无精症患者的遗传因素与性激素水平的关系。方法选取本院2015年7月至2019年9月被确诊为无精症的113例患者作为试验组,30例精子数量正常人作为对照组,分别进行外周血染色体核型、Y染色体AZF微缺失以及性激素检测。结果在113例无精症患者中检出染色体异常核型36例(31.9%),异常核型具体如下:47,XXY共21例(58.3%)、性反转共6例(16.7%)、易位共1例(2.8%)、倒位共2例(5.6%)、Y缺失共1例(2.8%)、性染色体嵌合共1例(2.8%)、染色体多态共4例(11.1%),对照组未检出异常,试验组患者的染色体核型异常率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组Y染色体AZF微缺失16例(14.2%),其中AZFa缺失1例(6.3%),AZFb缺失2例(12.5%),AZFc缺失6例(37.5%),AZFb+AZFc缺失4例(25.0%),AZFa+AZFb+AZFc缺失3例(18.8%),对照组未见异常。试验组患者的AZF微缺失异常率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组的促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)与催乳素(PRL)水平均显著高于对照组,试验组患者的睾酮(T)水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。异常染色体核型患者中47,XXY(Klinefelter综合征)发生率最高。异常核型患者中46,XX(性反转)的发生率仅次于47,XXY。6例性反转患者染色体核型均为女性核型(46,XX),其LH、FSH、PRL水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组中其他染色体异常核型患者的LH、FSH、PRL、T水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论染色体核型异常、Y染色体AZF微缺失、性激素水平异常与无精症密切相关。因此对无精患者进行染色体核型、Y染色体AZF微缺失以及性激素联合检测,能更加科学、有效地了解患者病情,有助于为后续的生殖治疗提供合理的临床方案。

核酸条码标识法PSA检测试剂盒的研制及验证

目的:建立核酸条码标识法检测前列腺特异性抗原(PSA)的方法,临床血清标本验证灵敏度、特异性等指标,并与试剂盒ELISA及RIA检测结果比较。方法:采用自制免疫磁球和双标记纳米金探针,利用双抗体夹心法原理,将PSA的检测转化为对核酸条码片段的检测,制备核酸条码法PSA检测试剂盒,对45例前列腺癌患者,45例前列腺良性增生患者,15例其它肿瘤患者,30例正常人群血清标本进行验证。结果:临床血清标本灵敏度约92,特异性约为68,假阳性率32,检测平均回收率大于95,批内变异系数(CV)为6.24,重复性平行性良好。与ELISA及RIA进口试剂盒检测结果比较,三法的差异无显著性(P>0.05),相关性良好,吻合度强。结论:建立的核酸条码标识PSA检测方法,为超微量蛋白质检测提供一种新的方法。

性逆转综合征6例病例及分子遗传学研究进展报告

目的报道6例性逆转病例,结合相关文献探讨性逆转综合征的发病机制。方法收集2017年来在本院进行遗传咨询患者的临床资料与外周血标本,采用G显带染色体核型分析等技术分析患者染色体核型.结果同期在本实验室行遗传咨询者共1513例,其中6例诊断为性逆转综合征。G显带染色体核型分析确诊46,X X男性性逆转综合征2例,46,X Y女性性逆转综合征4例。结论对性发育异常患者进行核型分析有利于明确诊断,但性别决定是以SRY基因为主导及多个基因参与的过程,对性发育异常患者进行相应的基因筛查有利于明确病因。

子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植治疗糖尿病

目的探讨利用子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植保护移植胰岛，提高糖尿病移植疗效的可行性。方法分离纯化孕16dSD大鼠子鼠：胰腺干细胞培养传代，行Nestin免疫组织化学及流式细胞术鉴定；分离纯化SD大鼠胰岛，分联合移植组（10只）、单独移植组（10只）及正常对照组（10只），分别将2×10^5个子鼠：胰腺干细胞与800个胰岛和单纯800个胰岛移植至糖尿病大鼠模型左肾包膜下，定期监测各组大鼠血糖情况及留取血浆ELISA测胰岛素含量，观察胰岛存活时间。结果子鼠：胰腺干细胞培养传代3代后细胞涂片免疫组织化学示存在Nestin阳性细胞，流式细胞术测定nestin阳性细胞含量占74．1％。联合移植组大鼠均于术后第3天起血糖开始下降，血浆胰岛素水平逐渐升高，术后5d内血糖可降至正常[（5．4±0．6）mmol／L]，血浆胰岛素达到正常水平[（509．8±16．6）ng／L]，胰岛存活时间（18．2±2．4）d；单独移植组大鼠血糖可于术后1周内降至正常[（6．1±0．9）mmol／L]，胰岛存活时间（14．4±2．1）d；两组胰岛存活时间差别有统计学意义（P〈0．05）。结论子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植可保护胰岛功能，延长胰岛体内存活时间，提高移植疗效。

初发性系统性红斑狼疮患者外周血及T、B淋巴细胞疾病相关基因的筛选及鉴定

目的寻找在 SLE 分子发病机制中起关键作用的致病基因的候选基因。方法通过高密度基因芯片技术,得到初发性 SLE 患者外周血单核细胞及 T、B 淋巴细胞亚群的基因表达谱,在差异表达显著的基因中挑选4个位于 SLE 易感区段的基因,通过 TaqMan 实时 PCR 技术在55例 SLE 患者中验证基因的差异表达。结果得到初发性 SLE 患者外周血单核细胞及 T、B 淋巴细胞亚群的基因表达谱,确定 TRIM,KLRC1,IL-4R 及 EGR-1基因为 SLE 易感基因的候选基因,实时 PCR 结果证明:SLE 患者外周血单核细胞中,TRIM 基因△Ct 值显著低于正常人对照(P<0.05),基因表达水平为正常对照的2.43倍,IL-4R 基因与 EGR1基因的△Ct 值显著高于正常人对照(P<0.05),基因表达水平分别为正常对照的0.33倍、0.26倍,KLRC1基因的△Ct 值显著高于正常人对照(P<0.01),基因表达水平为正常对照的0.56倍,在 SLE 患者外周血 T 细胞亚群中,TRIM 基因△Ct值显著低于正常人对照(P<0.01),基因表达水平为正常对照的2.94倍,IL4R 基因与 EGR1基因的△Ct 值显著高于正常人对照(P<0.01),基因表达水平分别为正常对照的0.32、0.21倍,LRC1基因的△Ct 值显著高于正常人对照(P<0.01),基因表达水平为正常对照的0.56倍。在 SLE 患者外周血 B 淋巴细胞亚群中,由于 B细胞淋巴亚群所占淋巴细胞比率过低,基因检测数据不稳定,故未作统计学分析。结论在系统性红斑狼疮的发病中,患者外周血单核细胞及 T、B 淋巴细胞亚群细胞基因表达水平发生了改变,主要集中于一系列免疫相关基因,其中 TRIM,KLRC1,IL-4R 及 EGR-1基因在患者群中变化显著,初步断定为 SLE 易感基因的候选基因。