基因芯片技术在临床医学研究中的应用

概述了基因芯片技术在临床医学研究中的应用现状

Warburg效应在肿瘤耐药中的研究进展

肿瘤细胞的增殖和生长需要营养物质的支持,并进行能量代谢重编程。其中,线粒体功能改变是多种类型肿瘤发生的标志之一。Warburg效应是指肿瘤细胞通过激活乳酸脱氢酶、抑制丙酮酸代谢而产生大量乳酸,并在线粒体中进行能量代谢重编程的过程。肿瘤耐药是当前肿瘤临床治疗中较为棘手的问题之一。研究发现Warburg效应与抗肿瘤药物的耐药性息息相关。本文阐述Warburg效应在肿瘤耐药中的研究进展,为临床攻克肿瘤耐药提供新思路。

恶性肿瘤患者T细胞及NK细胞功能研究及临床意义

目的 :探讨恶性肿瘤患者免疫功能变化及意义。方法 :利用流式细胞仪 ,采用双色免疫荧光法测定 31例恶性肿瘤患者T淋巴细胞亚群及NK细胞水平。结果 :恶性肿瘤患者CD3 + 、CD4 + 明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;CD+ 8较对照稍有升高 ,无统计学意义 ;CD4 + /CD8+ 比值明显降低 (P <0 .0 1) ;NK细胞水平明显降低(P <0 .5 )。结论 :恶性肿瘤患者普遍存在免疫功能低下 ,建议在肿瘤治疗过程中定期观察其免疫功能状态 。

医学研究生教学中实验室管理探索

就如何为研究生创造一个良好的实验条件，使研究生在完成前期基础理论课学习进入实验研究阶段后提高实验研究效率，结合实际工作体会介绍一些经验，包括：实验室建设和管理，教师队伍建设，建立定期学术汇报制度及资源整合共享等。

复发性口腔溃疡与血清TNF-α,TGF-β浓度关系的临床研究

目的 :研究复发性口腔溃疡与血清TNF α,TGF β浓度关系。方法 :选择复发性口腔溃疡患者 3 2例 ,采用ELISA检测其血清TNF α ,TGF β水平 ,并与正常成年人作对照。结果 :复发性口腔溃疡患者TNF α水平较正常组明显升高 (P <0 .0 1) ,TGF β水平与正常组相比 ,无显著统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :复发性口腔溃疡的致病过程与细胞因子TNF α有关 ,与TGF

生物医用可吸收止血材料的研究与临床应用

背景:对于凝血功能障碍和实质性脏器出血的患者,单单使用常规外科技术止血不能起到很好的效果,因此医用可吸收止血材料的研究和应用得到了快速的发展。目的:回顾临床常用可吸收止血材料的研究现状,为临床医生合理应用止血材料提供指导。方法:应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2000-02/2010-02关于止血材料的文章,在标题和摘要中以"生物材料;止血材料;生物可吸收材料;止血效果;止血机制"或"biomaterial;hemostatic material;bioresorbable material;hemostasis effect;hemostatic mechanism"为检索词进行检索。文献检索语种限制为英文和中文。选入文章内容与生物可吸收止血材料及其应用有关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。文献类型包括综述和临床研究。排除重复研究及内容与研究目的不相符的文献。结果与结论:通过对文献的复习可知,近年来国内外主要应用的可吸收止血材料包括纤维蛋白胶、氧化纤维素和氧化再生纤维素、α-氰基丙烯酸酯类组织胶、可吸收性明胶海绵、微纤维胶原等。不同的止血材料其止血机理和止血效果均不相同,只有在充分的了解各种止血材料性能的基础上合理选择使用止血材料,才能在临床工作中得到事半功倍的效果。

血清基质金属蛋白酶-9与冠心病相关性的临床研究

目的 观察冠心病患者基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)血清水平以及与冠状动脉内径狭窄程度的关系。探讨MMP- 9在冠心病发病中所起的作用。方法 行冠状动脉造影术诊断为冠心病者 32例 ,另选 30例正常人为对照组 ,用 EL ISA法测定两组之间血清 MMP- 9水平 ,并探讨 MMP- 9与冠状动脉内径狭窄程度的关系。结果 冠心病组血清 MMP- 9水平高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,冠状动脉内径狭窄程度与基质金属蛋白酶浓度值呈正相关 (r=0 .6 0 1,P<0 .0 1)。结论 MMP-

循环肿瘤细胞检测及临床应用的研究进展

研究发现,实体瘤患者外周血中存在循环肿瘤细胞。循环肿瘤细胞的检测有助于发现早期肿瘤患者的微转移,重新确定临床分期,监测患者术后肿瘤是否复发与转移,评估预后,选择个体化的治疗策略。由于存在循环肿瘤细胞检测方法、原发肿瘤细胞的不连续脱落、基因组的不稳定性及无效转移等诸多问题,循环肿瘤细胞检测的生物学意义和临床意义仍存在很大争议。本文综述了对实体瘤患者循环肿瘤细胞检测的方法和结果,并探讨当前肿瘤研究领域面临的问题和潜在的进展。

深圳地区人群接种乙肝疫苗后抗体水平监测研究

目的了解深圳地区人群乙肝疫苗接种后对抗-HBs的影响。方法采用单纯随机抽样的方法对1996～2003年来某院健康体检的资料完整的35000人进行HBsAg和抗-HBs调查。结果35000人中HBsAg平均阳性率为4.82%,抗-HBs平均阳性率为61.47%。抗-HBs阴性和抗-HBs阳性人群乙肝疫苗的平均接种率分别是99.92%和94.92%;乙肝疫苗接种后第1年和第3年检测抗-HBs阳性水平;全阴者平均抗-HBs阳性率分别为95.61%和37.46%;加强接种者平均抗-HBs阳性率分别为86.83%和57.62%。结论接种乙肝疫苗是预防乙型肝炎的最有效措施,乙肝疫苗接种3a后抗-HBs下降明显,需加强免疫。

N乙酰半胱氨酸对四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤的保护机制研究

目的考察抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)对四氯化碳(CCl4)所致的大鼠急性肝损伤的保护机制研究。方法将4~6周龄的SPF级SD雄性大鼠随机分为A、B、C三组,分别为模型组、对照组和NAC治疗组。本实验制备经典CCl4大鼠急性肝损伤模型,通过腹腔注射浓度为10%的CCl4橄榄油溶液10 ml/kg建立SPF级SD大鼠急性肝损伤的模型,CCl4注射前30 min、给药后6、12 h分别给腹腔注射等体积生理盐水,共三次。通过生化仪器检测血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血清碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清总胆红素(TBil)、白蛋白(ALB)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、谷氨酰转肽酶(GGTP)、血清铁、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平。留取每只大鼠肝脏相同部位,4%多聚甲醛固定,进行石蜡包埋,石蜡切片,每组织切1张,并进行HE染色及全景扫描。观察肝组织病理学变化。结果NAC治疗组的GLDH水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01);NAC治疗组的血清铁与SOD水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.0001);NAC治疗组的TBil、MDA水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.0001)。NAC治疗组能够降低模型组大鼠血清中GLDH水平,增加肝组织SOD的水平,降低肝组织TBil和MDA水平,可减少肝细胞坏死。结论NAC通过抗氧化应激途径,能够有效改善CCl4所致大鼠急性肝损伤,对肝损伤有积极作用。

大规模并行基因组测序技术应用于无创产前诊断染色体非整倍体的研究

目的利用大规模并行基因组测序技术检测孕妇外周血浆中的游离DNA,行胎儿染色体非整倍体的无创产前诊断。方法选择2009年1月到2010年7月在深圳市人民医院产前诊断中心就诊,孕龄在8～30周之间高龄妊娠、唐氏综合征生化筛查高风险和(或)彩超显示胎儿异常等同意介入产前诊断的孕妇941例,抽取孕妇外周静脉血,提取血浆DNA,制备测序文库,应用Illumina HiSeq2000高通量基因测序仪检测,测得的基因序列与人类的参考基因组比对并作统计分析。同时采集胎儿羊水或脐血,经细胞培养后行羊水或脐血细胞染色体核型分析确定染色体非整倍体。结果①941例孕妇血浆样本处理后经大规模并行基因组测序技术检测判定胎儿为唐氏综合征高风险共27例,非唐氏综合征914例;以羊水或脐血染色体核型分析的结果为金标准进行结果对照,检测出的27例唐氏综合征高风险中2例误诊,其中一例核型为47,XXY,一例核型分析正常。经统计分析胎儿唐氏综合征的检出率为100%,检出正确率99.78%,误诊率0.22%;②941例样本中,检出18-三体高风险14例,18-三体低风险927例。与染色体核型分析相比,统计分析显示无创产前基因检测18-三体胎儿的检出率为93.33%(14/15),漏诊率为6.67%(1/15)、误诊率为0。结论利用大规模并行基因组测序技术检测孕妇外周血浆中的游离DNA行无创产前诊断胎儿染色体非整倍体,其敏感性、特异性与染色体核型分析技术具有较高的一致性。该技术具有无创性、高准确性、高通量等优势,具有临床实际应用价值。

轻微肝性脑病患者血清中代谢物组的研究

目的检测轻微肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)患者血清中的代谢物组,初步建立MHE诊断模型。方法采用核磁共振(NMR)方法检测25例肝硬化患者(肝硬化组)、25例轻微肝性脑病患者(MHE组)和30例健康对照(对照组)血清中的代谢物,应用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对NMR谱数据进行模式识别分析,并用临床标本验证代谢组模型诊断MHE的可行性。结果 OPLS-DA模型显示,健康对照与肝硬化患者(包括肝硬化组和MHE组患者)之间的区分非常明显,模型的质量参数R2X=35.1%,Q2Y=0.902;肝硬化组和MHE组标本可区分开来,模型质量参数R2 X=30.4%,Q2 Y=0.817。与对照组相比,肝硬化组和MHE组患者血清中葡萄糖、琥珀酸盐、柠檬酸盐等含量增高,低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、胆碱等含量减少;与肝硬化组相比,MHE组患者血清中的谷氨酰胺、苯丙氨酸、丙酮增高,缬氨酸和异亮氨酸降低。模型准确预测了10例MHE血清标本中的8例。结论基于1H NMR代谢组学技术可同时检测患者血清中多种代谢物质,有助于研究肝硬化和MHE的发病机制,可能为MHE的诊断提供一种新的手段。

唐氏综合征胎儿脐带血单个核细胞microRNA差异表达研究

目的检测唐氏综合征(Down syndrome,DS)胎儿和正常胎儿脐带血单个核细胞全基因组microRNA(miRNA)的差异表达。方法运用Solexa高通量测序技术对6例DS胎儿(DS组)和6例正常胎儿(对照组)脐带血单个核细胞miRNA表达水平进行检测,比较分析2组miRNA表达的差异,并用Stem-loop qRT-PCR对Solexa测序结果进行验证。结果 2组样本显著性差异表达miRNA有167种,8种miRNA在DS组样本中表达上调,159种miRNA表达下调;还有38种和139种miRNA分别特异性表达于DS组和对照组样本中;21号染色体上5个miRNA,除miR-802在DS组中高表达外,miR-99a、let-7c、miR-125b和miR-155均低表达。结论 DS胎儿和健康胎儿脐带血单个核细胞miRNA的表达差异显著,可能与DS胎儿免疫系统的发育缺陷及DS胎儿循环T、B淋巴细胞数目的减少有关;差异显著和特异性表达的miRNA可作为DS胎儿潜在的产前筛查诊断指标。

microRNA在肾脏疾病和生理中的研究进展

慢性肾脏疾病(CKD)与主要的非传染性疾病(如糖尿病和高血压)密切相关。微RNA(miRNA)是一类内源性有调控作用的非编码RNA,它们在肾脏发育、平衡和疾病中扮演重要角色。特别是在各种CKD的发展中,miRNA的表达与肾小管间质硬化和终末期肾小球病变发生相关。miRNA在基因中具有调控作用,其可能成为肾病的一种新的诊断标志物和治疗靶点。根据现有证据,miRNA可能与糖尿病肾病、IgA肾病、狼疮性肾炎、多囊肾病和移植排斥有关。

SLE患者外周血γδT细胞系的建立及表型和功能的研究

目的:建立体外扩增系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血γδT细胞的方法,并初步分析其表型和功能,探索γδT细胞在SLE发病中的作用。方法:采用单克隆抗体固相法,对15例SLE患者和8例正常人外周血γδT细胞进行体外扩增建系,以流式细胞仪检测γδT细胞表型,并用MTT法观察γδT细胞对Daud i细胞的细胞毒作用。结果:建立了SLE患者外周血γδT细胞系,其平均纯度为(58.1±11.2)%,较正常对照组(80.3±9.2)%偏低(P<0.05);其细胞表型为:Vδ1(34.4±24.5)%、Vδ2(61.9±28.6)%、Vδ3(16.1±10.6)%、Vγ9(76.4±11.8)%,其中Vδ2表达较对照组降低,而Vδ1和Vδ3表达增加(P均<0.05);其细胞毒作用在二组间无明显差别。结论:SLE患者外周血γδT细胞的Vδ、Vγ基因的取用表达存在差异,提示其在SLE的发病中可能起一定作用。

微阵列比较基因组杂交产前诊断8p23.1重复综合征胎儿的实验研究

目的了解一完全性心内膜垫缺陷（endocardial cushion defects，ECD）和右手轴前六指畸形患儿的基因组拷贝数变化（copy number variations，CNVs），探讨微阵列比较基因组杂交（array—based comparative genomic hybridization，array—CGH）在分子细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性。方法对胎儿及其父母进行常规G显带核型分析，运用array-CGH芯片对患儿进行全基因组高分辨率扫描和分析，实时定量PCR对array—CGH结果进行验证。结果常规G显带核型分析显示胎儿和父母的核型均正常。array—CGH结果显示8p23．1嗅觉受体／防卫素重复（ORDRs）之间存在大约1．43Mb的重复（位于10245882～11676699bp）。实时定量PCR证明array—CGH的结果是准确的。结论与传统的细胞遗传分析方法相比，array—CGH具有高分辨率、高特异性和高准确性等优点。

表观遗传DNA甲基化和组蛋白修饰与疾病关系的研究进展

近年来,表观遗传修饰在许多重大疾病中的致病机制和临床应用的研究受到广泛关注。在表观遗传修饰中,DNA甲基化和组蛋白修饰调节剂作为疾病发生、发展和临床诊断治疗的生物标志物,而DNA甲基化水平的高低和组蛋白修饰位点的不同均可能对疾病产生影响,DNA甲基化导致抑癌基因转录失活,组蛋白的异常修饰与肿瘤发生、发展相关。因此,探讨DNA甲基化和组蛋白修饰与疾病的关系,在疾病治疗过程中寻找靶向标志物,更深入地研究疾病的致病机制,可为疾病的预防、诊断和治疗提供新途径。

急性髓性白血病全基因组miRNA表达谱研究

目的通过比较微小RNA(miRNA)在急性髓性白血病(AML)与对照组骨髓样本中的表达情况,发现在AML中异常表达的miRNA。方法提取骨髓样本总RNA,应用Illumina高通量测序技术对15例AML患者(AML组)和10例骨髓象正常的贫血或发热原因待查患者(对照组)骨髓样本中的miRNA表达水平进行检测,分析比较二者miRNA表达的差异。结果AML样本与对照样本间差异表达的miRNA共307种,其中232种miRNA在AML组呈表达上调,75种miRNA呈表达下调。结论多种miRNA在AML患者的骨髓样本中异常表达,提示它们可能在AML发生和发展过程中起重要调控作用。