不同翼状胬肉大小对复发和屈光度的影响

目的观察不同大小的翼状胬肉对术后复发及屈光度的影响。方法回顾性分析2014年7月1日至2016年6月30日在深圳市人民医院行眼科手术的原发性翼状胬肉患者90例90眼的临床资料,根据翼状胬肉侵入角膜缘内的位置不同将翼状胬肉分为1、2、3级,分别对应A、B、C组,每组30例。术后随访12个月,对比分析三组患者术后角膜上皮愈合时间、视力和复发率。结果 A、B、C三组患者术后平均角膜上皮修复时间分别为(3.38±0.50)d、(4.63±0.45)d、(6.03±0.67)d,各组之间两两比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);A、B、C三组患者术前平均视力分别为(0.76±0.22)、(0.56±0.29)、(0.35±0.21),各组视力两两比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);A、B、C三组患者术后3个月的平均视力分别为(0.86±0.15)、(0.72±0.24)、(0.66±0.16),手术前后三组视力比较差异有显著统计学意义(P<0.01);A、B、C三组复发率分别为0、6.67%、13.33%,A组和C组复发率比较差异有统计学意义(P<0.05),而A组和B组,B组和C组复发率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论翼状胬肉对视力及术后复发的影响与其侵入角膜的大小相关,即胬肉组织侵入角膜内的范围越大,视力损害越严重,术后复发率越高。

lncRNA-MEG3通过P53途径介导视网膜母细胞瘤凋亡

目的探讨MEG3是否参与视网膜母细胞瘤的形成及其分子机制。方法应用实时荧光定量PCR技术检测视网膜母细胞瘤组织及瘤旁正常视网膜组织标本中MEG3的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3或siRNA-MEG3上调或干扰视网膜母细胞瘤细胞SORB50及HXO-RB44中MEG3的表达水平,随后用流式细胞仪检测转染后的细胞凋亡率变化,用Western blot检测转染前后P53蛋白表达水平的变化。结果视网膜母细胞瘤组织中MEG3的表达较瘤旁正常视网膜组织出现显著下降(P=0.014)。转染了pcDNA-MEG3的SO-RB50细胞MEG3表达显著增加(P=0.002),转染了siRNA-MEG3的HXO-RB44细胞MEG3表达显著减少(P=0.004)。流式细胞仪检测结果显示,MEG3表达上调后的SORB50细胞凋亡率显著增加(P<0.05);干扰MEG3表达后的HXO-RB44细胞凋亡率显著减少(P<0.05)。Western blot检测结果显示,转染了pcDNA-MEG3的SO-RB50细胞中P53蛋白的表达较阴性对照组显著增加(P<0.05),转染了siRNA-MEG3的HXO-RB44细胞中P53蛋白的表达较阴性对照组显著减少(P<0.05)。结论视网膜母细胞瘤组织中MEG3的表达下调,且MEG3可能通过促进P53蛋白的表达诱导视网膜母细胞瘤细胞的凋亡,从而影响视网膜母细胞瘤的发生和发展。

葡萄膜黑色素瘤高转移相关基因的筛选和分析

目的探讨葡萄膜黑色素原位瘤与转移瘤差异表达基因及其作用;探索乳腺癌1号基因相关蛋白1(BAP1)缺失的葡萄膜黑色素瘤(UM)差异表达基因以及预测BAP1靶标,探讨BAP1缺失对UM转移作用及其机制。方法生信分析筛选UM转移差异表达基因及其功能,对公共数据库GEO中的数据集GSE27831,GSE48863以及GSE39171中芯片数据以2为底数进行对数转换以及标准化(P<0.05,|logFC|>1)等预处理。为了进一步捕捉术语之间的关系,选择丰富的术语的子集,并将其作为网络图绘制,其中相似性>0.3的项由边缘连接。我们从20个簇中的每个簇中选择具有最佳P值的项,约束每个集群不超过15个术语,总共不超过250个术语。该网络用CytoSCAPE可视化插件,其中每个节点表示1个丰富的术语,并用其簇的名称着色。对于每个给定的基因列表,利用以下数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用富集分析:BioGrid、InWeb_IM、OmniPath。所得到的网络至少包含与另一个列表成员形成交互的蛋白质子集。如果网络中包含3~500个蛋白质,则进一步应用分子复合检测(MCODE)算法来识别紧密连接的网络组件。路径和过程富集分析被独立地应用于每个MCODE组件,并且保留3个最佳评分(按P值,P<0.05,FDR<0.001生物途径视为有价值)术语作为对应组件的功能描述。结果我们运用生物信息学技术对转移性和非转移性UM组织样本和BAP1沉默和正常表达UM细胞样本基于微阵列对基因组数据进行基因本体富集(GO)分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析,结果显示差异基因主要富集在补体凝血级联途径。结论 BAP1在转移性UM的异常低表达,UM中BAP1突变可能通过影响肿瘤血管生成促进肿瘤浸润转移。

DNMT1蛋白通过沉默MEG3基因促进视网膜母细胞瘤增殖

目的探讨DNMT1蛋白是否通过沉默MEG3基因诱导视网膜母细胞瘤增殖。方法通过转染pcDNA-DNMT1或si-DNMT1上调或干扰DNMT1的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3或si-MEG3上调或干扰MEG3的表达水平;用Western blot检测视网膜母细胞瘤细胞系中DNMT1蛋白表达量;用CCK-8法及EdU法检测细胞的增殖能力;用实时荧光定量PCR技术检测转染后的视网膜母细胞瘤细胞中MEG3表达量的变化;干扰DNMT1表达后,用甲基化特异性PCR检测MEG3基因启动子DNA甲基化水平的变化。结果视网膜母细胞瘤SO-RB50及HXO-RB44细胞中DNMT1蛋白表达量显著升高(P<0.05)。转染了pcDNA-DNMT1的HXO-RB44细胞中DNMT1蛋白表达增加,细胞增殖能力增加,MEG3表达量降低;转染了siRNADNMT1的SO-RB50细胞DNMT1蛋白表达减少,细胞增殖能力降低,MEG3表达量增加(P<0.05)。干扰DNMT1蛋白表达后,MEG3基因启动子DNA甲基化水平降低(P<0.05)。逆转DNMT1蛋白对MEG3基因的调控后,DNMT1蛋白调控RB细胞增殖的能力减弱(P<0.05)。结论在视网膜母细胞瘤细胞中,DNMT1蛋白表达的上调,诱导了MEG3基因启动子DNA甲基化失活,最终导致细胞异常增殖。

兔同种异体角膜缘移植术后免疫排斥反应的实验研究

目的:本研究旨在探索同种异体角膜缘移植免疫排斥反应规律并观察环孢霉素A(CsA)滴眼液的免疫抑制作用。方法:32只新西兰白兔随机分成实验组和CsA对照组,建立右眼角膜缘缺陷症动物模型,1月后实施同种异体角膜缘移植术,术后分别予生理盐水及1%CsA眼液滴眼并观察4周。术前1天及术后1～8周动态监测外周血T淋巴细胞上CD25的表达;分别取术后第4、8及10周的角膜缘植片观测淋巴细胞浸润及T淋巴细胞上CD25的表达。结果:实验组术后第1周外周血表达CD25的T淋巴细胞数就有增高,第3周已达到高峰,第5周开始缓慢下降。CsA组角膜缘植片中浸润的淋巴细胞及表达CD25的T淋巴细胞数目显著低于实验组。结论:同种异体角膜缘移植术后排斥反应的发生与表达CD25的T淋巴细胞数目密切相关;CsA眼液可抑制外周血及植片中T淋巴细胞上CD25的表达,从而抑制排斥反应发生。

逆行置管术治疗鼻泪管阻塞的临床研究

目的探讨泪道逆行置管术治疗成人鼻泪管阻塞的疗效及骨性鼻泪管解剖因素对疗效的影响。方法71例（75眼）成人原发性鼻泪管阻塞，术前行CT三维成像测量骨性鼻泪管的长度及最小直径，然后分别经鼻泪管逆行植入“Y”形泪道引流硅胶管，术后3～6个月拔出，随访1年以上。结果75眼均一次置管成功。拔管时泪道冲洗通畅67眼（89．33％），冲洗有阻力8眼（10．67％）。拔管后1—3个月内有14眼再次阻塞（18．67％）。术前泪道CT三维成像测量结果统计学分析显示，治愈组与未愈组骨性鼻泪管平均长度：分别为（13．40±0．51）mm和（13．71±0．41）mm，骨性鼻泪管最小直径：分别为（3．47±0．34）mm和（3．23±0．28）mm差异均有统计学意义（t=4．81，t=5．64，P〈0．01）。结论泪道逆行置管术是治疗成人鼻泪道阻塞的较好方法。术前CT三维重建了解患者骨性泪道解剖特点，制定个性化治疗方案，可以提高泪道逆行置管术治愈率。