miR-489-3p在先天性甲状腺功能减退症新生大鼠中的表达及其靶向调节Jagged1对大鼠神经元凋亡的影响

目的探究微小RNA-489-3p(miR-489-3p)在先天性甲状腺功能减退症(CH)新生大鼠中的表达及其靶向调节Jagged1对大鼠神经元凋亡的影响。方法20只孕大鼠分为对照组、CH组[孕鼠灌胃6-丙基-2-硫尿嘧啶(PTU)]、CH+阴性对照组(孕鼠灌胃PTU,幼鼠尾静脉注射miR-489-3pantagomirnegativecontrol)、CH+miR-489-3p拮抗剂组(孕鼠灌胃PTU,幼鼠尾静脉注射miR-489-3p antagomir),孕鼠所产幼鼠于分娩后第7日开展实验,每组纳入12只幼鼠。ELISA检测血清促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平;TUNEL检测海马神经元凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qRCR)检测海马中miR-489-3p及Jagged1 mRNA水平;Western blot检测海马中Jagged1蛋白水平;双荧光素酶验证miR-489-3p与Jagged1的靶向关系。细胞实验分析重组Jagged1对miR-489-3p mimics诱导的海马神经元凋亡的影响。结果与对照组相比,CH组、CH+阴性对照组幼鼠血清TSH水平、神经元凋亡数量、miR-489-3p水平明显增加(P<0.05),FT3、FT4水平、体重、Jagged1 mRNA及蛋白水平明显减少(P<0.05);与CH组、CH+阴性对照组相比,CH+miR-489-3p拮抗剂组幼鼠血清TSH水平、神经元凋亡数量、miR-489-3p水平明显降低(P<0.05),FT3、FT4水平、体重及Jagged1 mRNA及蛋白水平明显增加(P<0.05)。TargetScan分析显示Jagged1mRNA的3’UTR含有与miR-489-3p序列配对的保守碱基,且经双荧光素酶验证二者靶向关系。细胞实验显示,重组Jagged1可显著减轻miR-489-3p mimics诱导的海马神经元凋亡。结论抑制miR-489-3p靶向上调Jagged1可减轻CH所致海马神经元凋亡。